N-氨甲酰谷氨酸（N-carbamylglutamate，NCG）是NAG的功能类似物，可以恢复或改善尿素循环功能[1]，可以通过促进精氨酸的内源性合成调节动物体内代谢及生长发育[2]。NCG不属于碱性氨基酸，不与其他的碱性氨基酸在吸收方面存在竞争的关系。有研究表明，在日粮中添加NCG可以促进内源性Arg的合成，调控动物机体的新陈代谢，从而达到改善动物肉质的目的[3]。NCG成本低、在瘤胃中不需包被、添加量小。利用NCG可以促进尿素循环，激活Arg发挥作用。因此，本试验旨在研究日粮中添加不同水平NCG对肉羊生产性能、肉品质及机体血浆抗氧化能力的影响，初步探讨NCG对肉羊生长及肉品质变化的影响及作用机制。1材料与方法1.1试验动物与试验设计在同一羊群内，选取32只体况健康、体重相近的4月龄断奶夏寒杂交公羊。试验采用单因素试验设计，随机分为4个组，每组8个重复，每个重复1只羊。4个组分别为对照组（饲喂基础饲粮）、处理组Ⅰ（基础日粮+0.08% NCG）、处理组Ⅱ（基础日粮+0.12% NCG）、处理组Ⅲ（基础日粮+0.16% NCG）。预试期7 d，正式试验期53 d。试验前对羊舍和附属设施充分清洗消毒，自然通风，自然采光。采用分圈饲养方式，8只羊为一圈，自由采食与饮水。试验期间，每天7：00、18：00各喂料1次，喂料量以羊充分吃饱几乎不留余料为准。按照羊场常规的清洁和消毒制度定期对羊舍进行打扫和消毒。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.004.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.0玉米44.5消化能/(MJ/kg)11.81玉米胚芽粕2.0干物质/%88.41DDGS3.0粗蛋白/%14.63豆粕11.0粗纤维/%10.97花生蔓30.0灰分/%5.49次粉3.0粗脂肪/%2.76膨化尿素2000.5中性洗涤纤维/%29.18石粉1.0酸性洗涤纤维/%19.61硫酸钠1.0酸性洗涤木质素/%0.22小苏打1.0钙/%1.16盐0.5总磷/%0.24预混料0.5赖氨酸/%0.58糖蜜2.0蛋氨酸/%0.22注：每千克预混料可提供：CuSO4·5H2O 18 g、FeSO4·H2O 82 g、ZnSO4·7H2O 90 g、MnSO4·H2O 85 g、CoSO4·7H2O 0.95 g、5% KI 6 g、Na2SeO3 5 g、VA 36 000 kIU、VD3 7 500 kIU、VE 32 000 IU、烟酰胺38 000 mg、生物素42 mg。1.2测定指标及方法1.2.1生长性能试验正式开始时，空腹测定羊的初重；试验开始后每周测定空腹体重1次，记录羊的健康状况；试验结束后，空腹测定羊的末重，统计各试验组肉羊的采食量和增重情况。计算平均日采食量、平均日增重和料重比。平均日采食量=耗料量/试验天数(1)平均日增重=增重量/试验天数(2)料重比=耗料量/增重量(3)1.2.2屠宰性能和胴体品质试验结束时，称取每只羊宰前的体重，宰前24 h停食、2 h停水；称取每只羊的屠宰后胴体重量，胴体剔出骨头后余下的净肉重量；测量每只羊第12和13胸肋脊椎间眼肌（背最长肌）的横切面积；每只羊胴体各部位精剔肉后，骨头分别称重。总增重=末重-初重(4)屠宰率=(胴体重/宰前活重)×100%(5)净肉率=(净肉重/宰前活重)×100%(6)产肉率=(净肉重/胴体重)×100%(7)1.2.3肉品质基于NCG对肉羊生长性能及屠宰性能的测定结果，选择处理组Ⅱ与对照组（每组4只羊样品）进行羊肉品质、血浆抗氧化能力测定，取屠宰后的肉羊背最长肌4 ℃带回实验室用于后续pH值、系水力及剪切力的测定。1.2.3.1pH值测定屠宰后第1 d测定pH24 h值，取肌肉样品3 g，利用干净的手术剪将其剪碎，置于培养皿中加入等量的蒸馏水搅拌，室温放置10 min，将酸度计探头插入混合物中，直至显示屏稳定即可读出样品的pH值。1.2.3.2肌肉系水力滴水法测定滴水损失率。滴水损失率=(滴水前肉样重量－滴水后肉样重量)/滴水前肉样重量×100%(8)离心法测定失水率和系水率。失水率=(离心前肉样重量－离心后肉样重量)/离心前肉样重量×100%(9)系水率=1－(离心前肉样重量－离心后肉样重量)/离心前肉样重量×100%(10)施加热力测定熟肉率及蒸煮损失率。熟肉率=煮后肉样重量/煮前肉样重量×100%(11)蒸煮损失率=(煮前肉样重量－煮后肉样重量)/煮前肉样重量×100%(12)1.2.3.3剪切力沿肌纤维方向取肉样，于自封袋中密封，4 ℃冰箱备用，测定时取出室温平衡并用吸水纸擦干表面水分，取3 cm×1 cm×1 cm的肉样，利用嫩度仪测定剪切力。1.2.4血清抗氧化指标屠宰前对试验羊进行静脉采血，注入肝素抗凝管中，离心后取上清液，置于液氮中备用。血清中过氧化氢酶活性（CAT）、总抗氧化能力（T-AOC）、总超氧化物歧化酶活性（T-SOD）、丙二醛含量（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶活性（GSH-Px）采用南京建成生物工程研究所试剂盒测定。1.3数据统计与分析血清抗氧化指标及羊肉品质测定重复3次，数据以“平均值±标准差”表示，结果采用SPSS 19.0统计软件进行方差分析。P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1NCG对肉羊生产性能的影响（见表2）由表2可知，随着NCG添加水平的升高，肉羊的末重、总增重和平均日增重呈现先升高后降低的趋势，料重比呈现先降低后升高的趋势，4个处理组间无显著差异（P0.05）。与对照组相比，处理组Ⅰ、Ⅱ的末重、总增重、平均日增重均有所增加（P0.05），料重比有所降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.004.T002表2NCG对肉羊生产性能的影响组别初重/kg末重/kg总增重/kg平均日增重/kg料重比对照组30.11±0.2440.76±1.2410.65±1.28152.14±18.288.09±1.16处理组Ⅰ30.01±0.2741.08±1.9711.06±1.84158.04±26.237.94±1.58处理组Ⅱ29.96±0.2541.10±1.6111.14±1.62159.11±23.117.88±1.29处理组Ⅲ30.04±0.1840.70±1.2110.66±1.23152.32±17.617.91±1.012.2NCG对肉羊屠宰性能的影响（见表3）由表3可知，随着日粮中NCG水平的增加，屠宰率与净肉率均呈现下降的趋势，产肉率呈先降低后升高的趋势，骨重、眼肌面积呈先升高后降低的趋势，各处理组间在屠宰率、净肉率、产肉率、骨重、眼肌面积方面均无显著差异（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.004.T003表3NCG对肉羊屠宰性能的影响组别屠宰率/%净肉率/%产肉率/%骨重/kg眼肌面积/cm2对照组40.88±1.1330.25±1.1774.00±3.382.99±0.1122.31±0.88处理组Ⅰ40.62±0.9230.00±0.9373.88±1.963.03±0.1522.49±0.63处理组Ⅱ40.38±1.3029.38±1.0673.00±1.773.01±0.2422.34±0.66处理组Ⅲ39.75±1.9129.75±1.2874.75±2.252.91±0.3022.05±1.212.3NCG对肉羊肉品质的影响（见表4）由表4可知，两组间羊肉pH值差异不显著（P0.05）；处理组Ⅱ失水率、蒸煮损失率、滴水损失率、剪切力降低，系水率、熟肉率升高，各指标在两组间均无显著差异（P0.05）。处理组Ⅱ肉羊肌肉滴水损失率显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.004.T004表4NCG对肉羊肉品质的影响组别pH值失水率/%系水率/%熟肉率/%蒸煮损失率/%滴水损失率/%剪切力/N对照组5.76±0.095.71±3.1194.29±3.1155.19±1.4444.81±1.443.88±0.18*22.51±3.16处理组Ⅱ5.68±0.105.25±2.1494.75±2.1457.19±2.2742.81±2.273.17±0.4317.66±1.30注：*表示同列数据差异显著（P0.05）；下表同。2.4NCG对肉羊血浆抗氧化指标的影响（见表5）由表5可知，两组间血浆过氧化物酶活性、总抗氧化能力、谷胱甘肽过氧化物酶和总超氧化物歧化酶活性均无显著差异（P0.05）。与对照组相比，处理组Ⅱ肉羊血清丙二醛含量降低8.5 μmol/L，两组间差异显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.09.004.T005表5NCG对肉羊血浆抗氧化指标的影响组别过氧化氢酶/(U/mL)总抗氧化能力/(mmol/L)谷胱甘肽过氧化酶/(mol/L)总超氧化物歧化酶/(U/mL)丙二醛/(μmol/L)对照组1.72±1.344.16±0.30451.03±48.15156.30±6.9614.21±7.04*处理组Ⅱ2.94±1.254.17±0.20430.68±72.47156.30±13.555.71±5.823讨论3.1NCG对肉羊生产性能的影响精氨酸作为多胺和一氧化氮的前体物，是一种功能性氨基酸，在生理反应、代谢调控中起着重要作用[4]。NCG对畜禽生长性能的影响主要通过促进精氨酸的内源性合成。Arg可以调控4EBP1的磷酸化，通过小肠上皮细胞中的mTOR信号通路，以信号转导的方式参与调控体内蛋白质的生成[5]；Arg还可以促进机体生长激素和胰岛素的合成[6]，从而促进畜禽的生长。本试验中，随饲粮中NCG水平的升高，肉羊的末重、总增重和平均日增重呈现先升高、再降低的趋势，日粮中添加不同水平NCG对肉羊的试验末重及日增重无显著差异，与孙雪丽等[4]在荷斯坦奶公牛饲粮中添加NCG的结果一致。3.2NCG对肉羊屠宰性能的影响屠宰率是衡量动物生产性能的重要指标，胴体重是衡量肉羊生产水平的重要标志，眼肌面积与产肉性能有较强的相关性。本试验研究发现，添加NCG对肉羊的屠宰率、产肉率和眼肌面积均无显著影响。张桂杰等[3]研究发现，在滩羊日粮中添加NCG可以显著提高滩羊的屠宰率，且添加0.1%和0.15%水平的NCG可以显著提高净肉重占胴体重的比值，与本试验结果存在一定差异，原因可能是羊的生长阶段、品种和日粮水平高低不同。3.3NCG对肉羊血浆抗氧化指标的影响在新陈代谢过程中，动物体内的ROS通过线粒体呼吸链途径、内源氧化酶途径和外源途径产生，线粒体呼吸链产生的ROS约占95%，这部分ROS作为信号分子调控体内信号通路，对机体代谢具有重要的意义。ROS水平的增加，会降低肌肉中胶原蛋白的周转率，导致肌肉内成纤维细胞净胶原转换的减少，降低某些肌肉中的胶原溶解性，进而降低基质金属蛋白酶（MMP）活性，影响肉的嫩度[7]。MMP是一种可降解细胞外基质成分的酶，也是一种重要信号分子。MMP可以调节肌肉、脂肪和结缔组织发育等多种生物学过程。有研究表明，MMP2、9、13对肌细胞、肌纤维及脂肪生成的调节具有重要作用[8-9]。肌肉纤维的数量及脂肪含量与肌内脂肪含量及大理石花纹息息相关，会影响肉的嫩度和风味[10-11]。冯鑫等[12]研究发现，ROS可以影响MMP的活性，肉牛血清MMP2浓度与牛肉大理石花纹评分呈显著正相关，血清MMP9、13浓度与血清ROS含量及牛肉剪切力显著负相关。罗海玲等[13]发现，在波尔山羊日粮中补饲抗氧化剂维生素E可以提高红细胞膜流动性，维持细胞膜完整性，改善羊肉品质，这可能与抗氧化剂对ROS的清除，进而保护MMP9、13的活性有关。MDA是机体内脂质过氧化作用的最终产物。MDA含量升高表明机体内脂质过氧化作用的自由基出现异常，机体过氧化保护防御系统的抗氧化能力降低。因此，MDA水平可以直观地显示细胞氧化损伤的程度[14]。本研究中，在日粮中添加NCG后，血浆中MDA的含量显著降低，肉羊血浆中总抗氧化能力提高。晁雅琳[15]研究RP-Met与NCG对舍饲滩羊抗氧化性的影响，发现各个试验组羊血清及肌肉各项抗氧化性指标中T-AOC、SOD及CAT均高于对照组，MDA低于对照组。张桂杰等[16]发现，在羔羊的饲粮中添加瘤胃保护性的NCG能够显著降低MDA含量，与本试验结果一致。可以推测NCG能促进机体内源性Arg的合成，Arg是机体自由基的清除剂，可以通过其代谢产物NO来提高抗氧化酶的活性，减少氧化应激，进而降低机体内MDA的水平，增加胶原的溶解性，提高MMP的活性，改善肉质的嫩度。3.4NCG对肉羊肉品质的影响有研究发现，Arg可以通过生成NO来调控机体内脂肪代谢，NO可抑制体内组织中的糖和脂肪的合成，促进皮下脂肪中的细胞脂类水解[3]。肌肉内的脂肪水平可以改变动物的肉质和大理石花纹，这与肉的嫩度和汁水具有一定的相关性。本试验研究发现，添加NCG的肉羊肌肉系水率、滴水损失率显著高于对照组；处理组肉羊肌肉嫩度显著高于对照组。谷英[17]在山羊和绵羊的饲粮中添加NCG，检测NCG对肌肉嫩度的影响，发现NCG对山羊的肌肉嫩度无显著影响，但可以降低绵羊股二头肌的肌肉嫩度。周玉香等[18]研究N-氨甲酰谷氨酸对舍饲滩羊产肉性能和肉品质的影响，发现与NCG相比，共轭亚油酸和过瘤胃赖氨酸对肌肉嫩度有降低的趋势，NCG对羊肉嫩度无明显影响。目前，NCG对肌肉嫩度的相关研究相对较少，各种结果也不尽一致，因此NCG对肉品质的影响及其作用机理还有待进一步研究。4结论NCG可以在一定程度上提高肉羊的日增重，降低料重比，对其他屠宰性能无影响；NCG可以通过降低血浆中MDA含量、提高CAT活性，提高机体抗氧化能力；NCG可以在一定程度上改善肉品质的系水能力和嫩度。