银鲫(Carassius auratus gibelio)属鲤形目(Cypriniformes)、鲤科(Cyprinidae)、鲫属(Carassius),在中国仅分布在额尔齐斯河及黑龙江水系[1]。额尔齐斯河银鲫(Carassius auratus gibelio Block)是额尔齐斯河流域重要的经济鱼类,其产量主要依靠额尔齐斯河及其附属水体的天然渔业资源。近年来,人工繁殖及苗种培育技术的日趋成熟,额尔齐斯河银鲫已逐渐成为池塘养殖新品种之一,并表现出生长速度快[2]、对不良环境耐受力强[3]等优点,是极具开发价值的优质经济鱼类。目前,关于额尔齐斯河银鲫的生物学特性[1]、遗传多样性[4-5]等方面开展较多研究。在鱼体营养成分方面,仅见研究报道池塘养殖额尔齐斯河银鲫营养成分[6]、饲料脂肪水平对其肌肉营养成分的影响[7],有关野生额尔齐斯河银鲫肌肉营养成分及与养殖群体的比较分析尚未见报道。研究采用常规生化分析方法,对野生和养殖额尔齐斯河银鲫的肌肉营养成分及品质进行评价与比较,旨在分析人工养殖对额尔齐斯河银鲫营养品质产生的影响,为其配合饲料的研制提供参考。1材料与方法1.1试验材料6尾野生额尔齐斯河银鲫捕自额尔齐斯河附属水体乌伦古湖,4龄鱼体长19.2~21.3 cm、体重272~368 g;6尾养殖额尔齐斯河银鲫为新疆水生野生动物救护中心主养松浦镜鲤成鱼池塘套养的子一代鱼种,4龄鱼体长18.8~20.8 cm、体重252~341 g,池塘投喂饲料为鲤鱼成鱼配合饲料,饲料营养成分为:粗蛋白质32.15%、粗脂肪4.84%、粗灰分13.66%、赖氨酸1.48%。1.2样品采集试验鱼至冰盘上取鱼体头后至尾柄前肌肉,去皮捣碎混匀,取样品100 g,置于-40 ℃冰箱中保存,用于测定肌肉的水分、粗蛋白、粗脂肪、粗灰分和氨基酸、脂肪酸等指标。1.3测定指标及方法1.3.1常规营养成分样品的水分含量采用105 ℃直接干燥法测定(GB/T 5009.3—2016);粗蛋白质含量采用凯氏定氮法测定(GB/T 5009.5—2016);粗脂肪含量采用索氏抽提法测定(GB/T 5009.6—2016);粗灰分含量采用马福炉灰化法测定(GB/T 5009.4—2016)。1.3.2肌肉中氨基酸组成色氨酸采用碱水解法(GB/T 18246—2000)测定;半胱氨酸采用过甲酸氧化水解法(GB/T 15399—1994)测定;其余16种氨基酸采用酸水解法(GB/T 5009.124—2003)测定,使用日立L-8900型氨基酸自动分析仪测定氨基酸含量。1.3.3肌肉中脂肪酸组成参照GB/T 9695.2—2008方法,采用氯仿-甲醇提取法抽提肌肉中脂肪,分别用0.5 mol/L氢氧化钠-甲醇和质量分数14%三氟化硼甲醇溶液使脂肪酸皂化,再用异辛烷和饱和氯化钠溶液制备脂肪酸甲酯。样品皂化甲酯化后,加无水硫酸钠脱水,采用日本岛津GC-2010型气相色谱仪测定。各脂肪酸相对含量采用面积归一化法计算。1.4营养品质评价方法依据1973年联合国粮食与农业组织(FAO)/世界卫生组织(WHO)提出的必需氨基酸评分模式[8]和1991年中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所提出的鸡蛋蛋白质评分模式[9],按下列公式计算氨基酸评分(AAS)、化学评分(CS)、必需氨基酸指数(EAAI):AAS=aaAAFAO/WHO (1)CS=aaAAEgg (2)EAAI=100aae×100bbe×100cce...×100iien (3)式中:aa为待评蛋白质中某氨基酸含量(mg/g N);AAFAO/WHO为FAO/WHO 评分标准模式中同种氨基酸含量(mg/g N);AAEgg为全鸡蛋蛋白质中同种氨基酸含量(mg/g N);n为比较的必需氨基酸个数,a、b、c、⋯、i为鱼肌肉蛋白质的各必需氨基酸含量(mg/g N);ae、be、ce、⋯、ie为全鸡蛋蛋白质的各必需氨基酸含量(mg/g N)。1.5数据统计与分析试验数据采用SPSS 22.0中的One-way ANOVA和Turkey均值多重比较法进行差异显著性分析,结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1野生和养殖额尔齐斯河银鲫的营养成分(见表1)由表1可知,野生额尔齐斯河银鲫的全鱼水分含量显著低于养殖群体(P0.05),全鱼粗蛋白质、粗脂肪含量显著高于养殖群体(P0.05)。野生额尔齐斯河银鲫肌肉的水分、粗蛋白质、粗脂肪含量显著高于养殖群体(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.10.020.T001表1野生和养殖额尔齐斯河银鲫的一般营养成分组别全鱼肌肉水分粗蛋白质粗脂肪粗灰分水分粗蛋白质粗脂肪粗灰分野生组71.08±0.26b16.81±0.16a5.89±0.11a3.16±0.0875.12±0.29a19.26±0.12a2.01±0.08a1.21±0.05养殖组72.43±0.25a15.79±0.18b3.45±0.14b3.32±0.1573.39±0.37b18.78±0.19b1.40±0.03b1.27±0.01注:同列数据肩标小写字母不同表示差异显著(P0.05),字母相同或无字母表示差异不显著(P0.05)。%2.2野生和养殖额尔齐斯河银鲫肌肉氨基酸组成与营养品质评价2.2.1野生和养殖额尔齐斯河银鲫的肌肉氨基酸组成(见表2)由表2可知,额尔齐斯河银鲫肌肉共含18种常见氨基酸,包括必需氨基酸(EAA)8种、半必需氨基酸(HEAA)2种和非必需氨基酸(NEAA)8种。野生和养殖额尔齐斯河银鲫肌肉中色氨酸含量差异显著(P0.05),其余17种氨基酸均无显著差异(P0.05)。各氨基酸在野生与养殖群体肌肉中含量的高低顺序一致,谷氨酸含量最高(9.45%、8.90%),其次为天冬氨酸赖氨酸亮氨酸丙氨酸,色氨酸含量最低(0.52%、0.47%)。野生群体的总氨基酸(TAA)、必需氨基酸、非必需氨基酸总量均显著高于养殖群体(P0.05)。野生和养殖额尔齐斯河银鲫的必需氨基酸/总氨基酸、必需氨基酸/非必需氨基酸均无显著差异(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.10.020.T002表2野生和养殖额尔齐斯河银鲫的肌肉氨基酸组成(干物质基础)项目野生组养殖组苏氨酸*3.34±0.173.13±0.22缬氨酸*3.74±0.213.50±0.24蛋氨酸*2.17±0.112.04±0.17异亮氨酸*2.99±0.162.79±0.26亮氨酸*5.58±0.265.19±0.32苯丙氨酸*2.84±0.112.67±0.16赖氨酸*7.07±0.346.57±0.47色氨酸*0.52±0.02a0.47±0.02b组氨酸**2.69±0.132.53±0.19精氨酸**4.14±0.213.88±0.34半胱氨酸2.37±0.112.51±0.36天冬氨酸7.28±0.296.88±0.52谷氨酸9.45±0.478.90±0.72甘氨酸4.25±0.204.00±0.33丙氨酸4.52±0.254.20±0.49酪氨酸2.21±0.092.06±0.17丝氨酸2.74±0.122.60±0.14脯氨酸2.52±0.112.35±0.17总氨基酸70.41±0.63a66.29±1.04b必需氨基酸28.25±0.74a26.37±0.69b半必需氨基酸6.83±0.346.41±0.53非必需氨基酸35.33±0.46a33.51±0.43b必需氨基酸比例40.12±0.6939.78±0.51半必需氨基酸比例(SEAA/TAA)9.69±0.409.66±0.66注:1.*为必需氨基酸,**为半必需氨基酸。2.同行数据肩标字母不同表示差异显著(P0.05),字母相同或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。%2.2.2野生和养殖额尔齐斯河银鲫肌肉营养品质评价(见表3)由表3可知,野生和养殖额尔齐斯河银鲫肌肉中的赖氨酸含量分别为571.13、582.11 mg /g N,均高于FAO/WHO模式和全鸡蛋蛋白质的氨基酸模式。根据氨基酸评分,野生和养殖群体的第一限制性氨基酸均为色氨酸,第二限制性氨基酸均为异亮氨酸;根据化学评分,野生和养殖群体的第一限制性氨基酸均为色氨酸,第二限制性氨基酸均为苯丙氨酸+酪氨酸。野生和养殖群体的必需氨基酸指数分别为79.30、81.63。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.10.020.T003表3野生与养殖额尔齐斯河银鲫肌肉氨基酸营养价值评价项目必需氨基酸总量/(mg/g N)野生组养殖组FAO/WHO模式全鸡蛋蛋白质的氨基酸模式野生养殖氨基酸评分化学评分氨基酸评分化学评分必需氨基酸指数79.3081.63异亮氨酸250331241.21247.550.960.730.990.75亮氨酸440534450.80460.111.020.841.050.86赖氨酸340441571.13582.111.681.301.711.32苏氨酸250292269.34276.921.080.921.110.95缬氨酸310411301.79310.450.970.741.000.76色氨酸609941.9441.760.700.420.700.42蛋氨酸+半胱氨酸220386366.42403.061.670.951.831.04苯丙氨酸+酪氨酸380565408.07419.451.070.721.100.742.3野生和养殖额尔齐斯河银鲫的背肌脂肪酸组成(见表4)由表4可知,额尔齐斯河银鲫肌肉共含脂肪酸19种,包括饱和脂肪酸(SFA)6种、单不饱和脂肪酸(MUFA)4种和多不饱和脂肪酸(PUFA)9种。其中,野生额尔齐斯河银鲫的饱和脂肪酸和n-6系列多不饱和脂肪酸含量显著低于养殖群体(P0.05),单不饱和脂肪酸和n-3系列多不饱和脂肪酸含量显著高于养殖群体(P0.05),多不饱和脂肪酸含量无显著性差异(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.10.020.T004表4野生和养殖额尔齐斯河银鲫的背肌脂肪酸组成(总脂肪酸)项目野生组养殖组C14∶01.96±0.092.11±0.10C15∶00.64±0.040.59±0.08C16∶013.33±0.42b16.02±0.91aC17∶00.39±0.07b0.62±0.05aC18∶03.42±0.20b4.11±0.32aC22∶00.11±0.03b0.37±0.03a饱和脂肪酸19.83±0.64b23.83±0.51aC16∶1n-73.79±0.20b5.20±0.36aC18∶1n-932.43±1.04a28.70±1.36bC20∶1n-92.53±0.18a1.69±0.14bC22∶1n-90.18±0.070.19±0.02单不饱和脂肪酸38.93±1.32a35.78±0.88bC18∶3n-33.48±0.343.37±0.30C20∶3n-30.20±0.110.22±0.03C20∶5n-3 (EPA)1.46±0.291.45±0.15C22∶6n-3 (DHA)11.89±1.25a2.82±0.28b∑n-3多不饱和脂肪酸17.03±1.60a7.86±0.16bC18∶2n-63.75±0.29b16.19±0.96aC18∶3n-60.07±0.05b0.40±0.03aC20∶2n-60.75±0.180.93±0.09C20∶3n-60.77±0.130.92±0.10C20∶4n-62.62±0.18a1.98±0.11b∑n-6多不饱和脂肪酸7.97±0.54b20.42±1.09a多不饱和脂肪酸25.00±2.1428.28±1.25EPA+DHA13.35±1.45a4.27±0.43b%比较各脂肪酸组成,饱和脂肪酸中均以C16∶0含量最高,分别为13.33%、16.02%,野生群体显著低于养殖群体(P0.05)。单不饱和脂肪酸中,C18∶1n-9含量最高,野生群体(32.43%)显著高于养殖群体(28.70%)(P0.05)。n-3系列多不饱和脂肪酸中,C22∶6n-3含量野生群体(11.89%)显著高于养殖群体(2.82%)(P0.05)。n-6系列多不饱和脂肪酸中,C18∶2n-6、C18∶3n-6含量野生群体显著低于养殖群体(P0.05),C20∶4n-6含量显著高于养殖群体(P0.05)。3讨论3.1野生与养殖额尔齐斯河银鲫营养成分分析鱼类的品系、饵料、养殖模式等因素均会影响着鱼体营养组成[10-12]。本研究结果显示,野生和养殖额尔齐斯河银鲫的全鱼、肌肉常规营养成分含量存在显著差异。野生鱼群体因捕食、躲避敌害生物等原因,活动量相对较大,而养殖群体因有稳定的食物供应,能量消耗少,肌肉较疏松,水分含量相对较高[13]。本研究发现,野生额尔齐斯河银鲫全鱼与肌肉的粗蛋白质、粗脂肪显著高于养殖群体,与花羔红点鲑[13]、俄罗斯鲟[14]、异齿裂腹鱼[15]的研究结果类似,可能因为野生额尔齐斯河银鲫生活的乌伦古湖饵料较为丰富,而池塘养殖群体因套养在松浦镜鲤主养池塘里,两个养殖品种在生态位和食物链上存在重合,导致额尔齐斯河银鲫不易获得饵料,影响其生长性能和体成分[16]。3.2野生与养殖额尔齐斯河银鲫肌肉氨基酸组成分析与营养价值评价饵料种类会影响鱼体氨基酸组成,进而影响氨基酸总量。野生额尔齐斯河银鲫的18种肌肉氨基酸含量均高于养殖群体,但仅色氨酸含量存在显著性差异,其余17种氨基酸无显著性差异,表明额尔齐斯河银鲫鱼体氨基酸含量相对稳定。本研究中,野生额尔齐斯河银鲫肌肉中总氨基酸和必需氨基酸含量显著高于养殖群体,与草鱼[17]、翘嘴鲌[18]的研究结果类似,这与摄食的饵料种类及营养成分均衡性有关。赖氨酸能够促进人体发育,增强免疫功能,提高中枢神经组织功能,是人体第一限制性氨基酸,也是谷类蛋白质和人乳的第一限制性氨基酸。本试验表明,不管是野生群体还是养殖群体,其肌肉中赖氨酸含量均高于FAO/WHO模式和全鸡蛋蛋白质的氨基酸模式,因此食用额尔齐斯河银鲫具有很好的营养平衡作用,可以补充以谷类为主的膳食者的赖氨酸不足。从鱼体肌肉营养品质评价,野生和养殖群体的限制性氨基酸为色氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸+酪氨酸,在额河银鲫专用饲料配制时应考虑饲料氨基酸含量的均衡性。3.3野生与养殖额尔齐斯河银鲫肌肉脂肪酸组成分析野生与养殖额尔齐斯河银鲫的肌肉脂肪酸组成差异较大,野生额尔齐斯河银鲫的饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸含量分别显著低于、高于养殖群体,多不饱和脂肪酸含量差异不显著。对花羔红点鲑[13]、草鱼[17]等鱼类的研究发现,饵料成分对鱼体的不饱和脂肪酸含量影响较大,对饱和脂肪酸的作用较少。本试验未表现出类似结果,可能因为不同鱼品种对饵料中脂肪利用方式和能力存在差异。鱼类的必需脂肪酸主要包括n-3和n-6系列脂肪酸,营养学把n-6系列脂肪酸和n-3系列脂肪酸的含量和比值作为评价脂肪酸营养价值的重要指标[19-21]。本研究发现,野生与养殖额尔齐斯河银鲫肌肉脂肪酸组成均符合人类膳食脂肪酸摄入量模式[22]。野生额尔齐斯河银鲫肌肉中n-3系列多不饱和脂肪酸含量显著高于养殖群体,n-6系列多不饱和脂肪酸含量显著低于养殖群体,n-3系列和n-6系列脂肪酸的比值高于养殖群体,可能与不同生活环境下额尔齐斯河银鲫的食物种类有关。在野生状态下,野生额尔齐斯河银鲫主要摄食植物碎屑、摇蚊幼虫[1];在养殖状态下,配合饲料使用较多的植物性油脂如大豆油、菜籽油等含n-6系列脂肪酸较高,因此导致野生与养殖额尔齐斯河银鲫肌肉脂肪酸组成的差异。鱼体高度不饱和脂肪酸中的EPA和DHA可以减少胆固醇和甘油三酯在血管壁的沉积,提高血管的韧性,降低心血管疾病的发生概率。EPA和DHA具有促进视力和大脑健康发育等功能[23-24]。因而,EPA、DHA含量是评价鱼类营养高低的重要指标[25]。本研究中,肌肉的EPA含量无显著性差异,但DHA含量野生群体显著高于养殖群体,EPA+DHA含量表现出与DHA变化一致。额尔齐斯河流域纬度较高,寒温带气候可能导致土著鱼类额尔齐斯河银鲫需要较高的不饱和脂肪酸来满足其生长需求[26]。鱼类肌肉不饱和脂肪酸的含量及组成受饲料中脂肪酸的含量及组成直接影响[27-29]。因此,可考虑在额尔齐斯河银鲫饲料中增加高度不饱和脂肪酸含量以在满足其机体发育需求的同时,提高鱼肉品质[30-31]。4结论野生及养殖额尔齐斯河银鲫肌肉中赖氨酸含量丰富,必需氨基酸指数较高(分别为79.30、81.63)。野生和养殖额尔齐斯河银鲫肌肉营养成分存在一定差异;野生群体肌肉中总氨基酸、必需氨基酸、非必需氨基酸总量显著高于养殖群体;野生与养殖额尔齐斯河银鲫肌肉脂肪酸组成均符合人类膳食脂肪酸摄入量模式,野生群体的单不饱和脂肪酸和n-3多不饱和脂肪酸含量较高,养殖群体的饱和脂肪酸和n-6多不饱和脂肪酸含量较高。
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