铁在动物机体内广泛存在,能够参与机体内部的多种生化反应。作为动物必需的微量元素之一,铁在维持动物正常生理机能和免疫防御中具有重要作用[1]。铁是血红蛋白的重要组成部分,可以有效预防和治疗动物的贫血、保证动物健康成长。铁还参与血红素、肌红蛋白等的合成,并与许多酶类的活性密切相关[2-3]。缺铁会使动物机体免疫功能和抗氧化能力下降,引起缺铁性贫血,表现为生长性能差、精神萎靡、心率和呼吸频率加快等,严重时会导致仔猪死亡[4]。然而,目前市场上用于饲料添加的铁制剂产品形式多样,质量也参差不齐。不同类型的铁制剂其作用效果的差异较大。质量较差的铁制剂产品不能满足动物机体的需求,容易出现铁元素利用率低、稳定性差等。因此选择合理的铁制剂产品至关重要。本试验在仔猪日粮中添加添加硫酸亚铁、甘氨酸铁、蛋氨酸铁,探讨其对仔猪生长性能、皮毛指数及血清指标的影响,为仔猪日粮寻找合适的铁源提供参考。1材料与方法1.1试验材料试验所用铁制剂分别为:硫酸亚铁(Fe含量为30%)、甘氨酸铁(Fe含量为16.81%)及蛋氨酸铁(Fe含量为10.55%),均由山东省济南市盛世创富化工有限公司生产。1.2试验设计96头体重接近、健康状态良好的28日龄的断奶仔猪随机分为4个处理组,每组4个重复,每个重复6头仔猪。对照组饲料为基础日粮,试验组在基础日粮中分别添加200 mg/kg的硫酸亚铁、甘氨酸铁、蛋氨酸铁。基础日粮组成及营养水平见表1。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.07.011.T001表1基础日粮组成及营养水平(风干基础)Tab.1Basal diet composition and nutritional level (air dried basis)原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米58.00消化能/(MJ/kg)18.30豆粕30.00蛋白质/%14.30乳清粉3.55钙/%0.72大豆油1.50总磷/%0.60石粉0.80赖氨酸/%1.20磷酸氢钙1.25蛋氨酸+胱氨酸/%0.73食盐0.40鱼粉3.50预混料1.00注 :1.预混料为每千克日粮提供:Cu 125 mg、Zn 120 mg、Mn 40 mg、I 0.3 mg、Se 0.3 mg、VA 12 000 lU、VD3 3 200 lU、VK 32.5 mg、VE 80 mg、VB1 2.5 mg、VB2 6.5 mg、VB6 5 mg、VB12 0.05 mg、烟酸45 mg、泛酸20 mg、叶酸1.5 mg、生物素0.15 mg。2.营养水平均为计算值。1.3饲养管理试验前对猪舍及器具进行彻底消毒。预试期7 d,试验期28 d。试验期间每天分别在早中晚各饲喂1次。喂料时仔细观察每头猪的采食、精神情况、被毛情况等并详细记录。按常规程序驱虫和免疫,试验期间断奶仔猪自由采食与饮水,温度、光照等饲养管理条件保持一致,对每天饲料的添加剂量和料槽内的剩余量进行详细的记录和统计。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能试验前和试验第28 d对仔猪进行禁食,称重并记录。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=总采食量/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2皮毛指数皮毛指数是指对皮肤的红润程度、毛色的亮度以及毛的顺滑程度进行综合评判。试验期间根据评分标准表对每头仔猪进行打分,计算出皮毛指数。皮毛指数评分见表2。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.07.011.T002表2皮毛指数评分Tab.2Fur index score分数皮肤红润程度毛色亮度毛顺程度1苍白无光泽明显凌乱2微红微弱光泽微弱凌乱3红润明显光泽柔顺1.4.3血清指标试验第28 d对仔猪进行前腔静脉采血,血液分离血清保存至-20 ℃备用。按照ELISA试剂盒的操作方法测定仔猪血清中免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)含量。试剂盒购自南京建成生物工程研究所。按照试剂盒的说明书要求测定仔猪血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)。试剂盒购自南京建成生物工程研究所。将采集的血液,使用全自动生化仪检测红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、血细胞比容(HTC)。1.5数据统计与分析运用Excel 2007软件对试验原始数据进行整理,使用SPSS 20.0软件进行One-Way ANOVA的方差分析,利用Duncan氏法对其进行多重比较,结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同铁源对断奶仔猪生长性能的影响(见表3)由表3可知,与对照组相比,日粮中添加甘氨酸铁和蛋氨酸铁试验组断奶仔猪的平均日采食量显著增加(P0.05);日粮中添加甘氨酸铁显著降低断奶仔猪的料重比(P0.05)。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.07.011.T003表3不同铁源对断奶仔猪生长性能的影响Tab.3Effect of different iron sources on the growth performance of weaned piglets组别初重/kg末重/kg平均日增重/(g/d)平均日采食量/(g/d)料重比对照组7.39±0.3812.32±1.58176.07±2.92348.21±32.91b1.97±0.06a硫酸亚铁组7.42±0.4113.13±1.13203.93±36.01387.42±46.74ab1.90±0.04ab甘氨酸铁组7.41±0.4614.30±1.46246.07±40.26432.21±41.69a1.76±0.03b蛋氨酸铁组7.38±0.4313.82±1.37224.04±37.13413.46±53.83a1.80±0.05ab注 :同列数据肩标字母不同表示差异显著(P0.05),无字母或字母相同表示差异不显著(P0.05);下表同。2.2不同铁源对断奶仔猪皮毛指数的影响(见表4)由表4可知,在试验第21 d,相比对照组,日粮中添加甘氨酸铁可以显著提高断奶仔猪的皮毛指数(P0.05);在试验第28 d,添加不同铁源组断奶仔猪的皮毛指数均显著高于对照组(P0.05)。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.07.011.T004表4不同铁源对断奶仔猪皮毛指数的影响Tab.4Effect of different iron sources on the coat index of weaned piglets组别14 d21 d28 d对照组5.16±0.345.51±0.43b6.61±0.23b硫酸亚铁组5.52±0.276.58±0.24b7.95±0.32a甘氨酸铁组5.53±0.457.57±0.36a7.91±0.43a蛋氨酸铁组5.82±0.336.65±0.32ab7.89±0.64a2.3不同铁源对断奶仔猪血清免疫球蛋白含量的影响(见表5)由表5可知,与对照组相比,日粮中添加不同铁源组断奶仔猪血清中IgA含量均显著提高(P0.05);断奶仔猪日粮中添加硫酸亚铁和甘氨酸铁显著提高血清IgG含量(P0.05)。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.07.011.T005表5不同铁源对断奶仔猪血清免疫球蛋白含量的影响Tab.5Effect of different iron sources on serum immunoglobulin content of weaned piglets组别IgAIgMIgG对照组49.31±3.54b51.21±2.6049.08±3.31b硫酸亚铁组58.25±2.67a53.46±3.7661.24±4.87a甘氨酸铁组60.14±4.34a54.27±4.5360. 53±3.63a蛋氨酸铁组58.87±3.36a56.29±4.6856.50±4.72abg/L2.4不同铁源对断奶仔猪血清抗氧化指标的影响(见表6)由表6可知,与对照组相比,添加甘氨酸铁和蛋氨酸铁可显著增强断奶仔猪血清中SOD活性(P0.05);添加硫酸亚铁和甘氨酸铁显著降低断奶仔猪血清中MDA含量(P0.05);甘氨酸铁显著提高断奶仔猪血清中T-AOC(P0.05)。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.07.011.T006表6不同铁源对断奶仔猪血清抗氧化指标的影响Tab.6Effect of different iron sources on serum antioxidant indexes of weaned piglets组别SOD/(U/mL)MDA/(nmol/mL)T-AOC/(U/mL)对照组169.45±23.37b6.12±0.22a45.34±3.52b硫酸亚铁组188.25±32.67ab5.36±0.26b50.35±3.58ab甘氨酸铁组260.41±34.34a5.06±0.14b56.47±3.43a蛋氨酸铁组258.87±40.64a5.52±0.28ab52.32±4.27ab2.5不同铁源对断奶仔猪在血液生理指标的影响(见表7)由表7可知,相比对照组,日粮中添加不同铁源组断奶仔猪血液中红细胞数量、血红蛋白浓度显著提高(P0.05)。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.07.011.T007表7不同铁源对断奶仔猪在血液生理指标的影响Tab.7Effect of different iron sources on blood physiological indexes of weaned piglets组别RBC/(×1012/L)Hb/(g/L)HCT/%对照组2.03±0.03b72.64±4.52b32.12±3.24硫酸亚铁组3.13±0.07a94.38±6.47a35.36±2.47甘氨酸铁组3.28±0.11a101.81±9.37a36.56±4.14蛋氨酸铁组3.16±0.09a96.36±6.33a34.52±2.283讨论3.1不同铁源对断奶仔猪生长性能的影响铁是断奶仔猪生长发育过程中重要的微量元素之一,其对提高仔猪生长性能具有重要作用。郭海涛等[5]研究发现,在断奶仔猪的日粮中添加硫酸亚铁和复合氨基酸铁可以极显著提高断奶仔猪的平均日增重,降低料重比。胡培等[6]比较了在断奶仔猪日粮中添加无机铁和有机铁对其生长性能的影响,发现添加甘氨酸铁可以提高断奶仔猪的日增重,降低料重比,表明甘氨酸铁对提高断奶仔猪生产性能的效果要优于无机铁。李伟等[7]研究发现,添加不同含量有机铁和硫酸亚铁试验组断奶仔猪的平均日增重均高于对照组,平均日增重的提高与添加的铁含量呈正比例关系,添加有机铁的效果要好于无机铁,有机铁含量为200 mg/kg时效果最佳。本研究结果发现,在断奶仔猪日粮中添加甘氨酸铁可以显著提高断奶仔猪的平均日采食量,降低料重比,与上述研究结果类似。然而,蒋荣成等[8]研究发现,甘氨酸铁改善仔猪生长性能的效果最好,能提高仔猪的平均日增重,降低料重比,改善皮毛指数;蛋氨酸铁的效果较差,其效果次于硫酸亚铁,其原因可能时是添加剂量不同。3.2不同铁源对断奶仔猪皮毛指数的影响动物皮肤的红润程度、毛色的亮度以及毛顺程度等可以反映动物健康状况。本研究结果表明,随着日龄的增加添加不同铁源,断奶仔猪的皮毛指数显著改善,以添加甘氨酸效果最佳。蔡菊[9]研究发现,在仔猪日粮中添加甘氨酸铁可提高仔猪皮毛指数,与本研究结果一致。甘氨酸铁可能是通过影响动物体内血液状况而改善皮肤色泽。郭海涛等[10]在仔猪日粮中添加硫酸亚铁和复合氨基酸螯合铁,2周后仔猪皮毛评分显著提高。杨敏[11]研究发现,相比其他有机铁,日粮中添加甘氨酸铁能有效改善断奶仔猪的营养状况,促进生长,降低料重比,改善皮毛指数。3.3不同铁源对断奶仔猪血清指标的影响免疫球蛋白是机体体液免疫的重要组成部分,对动物机体的免疫防御具有重要作用。动物机体内氧自由基的水平也是影响其免疫机能的重要因素,当机体内产生与清除氧自由基的动态平衡被打破时,会导致抗氧化酶活性降低,使氧自由基在体内积累发生氧化损伤,影响动物的免疫力。研究表明,仔猪缺铁会降低免疫功能和抗氧化功能,引起缺铁性贫血,严重时会导致仔猪死亡[12]。添加外源铁可以不同程度地提高断奶仔猪血液中SOD活性、T-AOC;而添加有机铁则可以显著提高断奶仔猪血清中IgG含量[13]。冯国强[14]通过连续饲喂缺铁日粮构建临界缺铁仔猪模型,后续分别在日粮中添加不同的铁制剂,结果发现,与对照组相比,硫酸亚铁、甘氨酸亚铁组仔猪血清中IgG和IgM含量分别提高22.95%、15.38%;甘氨酸亚铁组断奶仔猪血清中SOD活性也显著增强,表明在断奶仔猪日粮中添加甘氨酸亚铁的效果要优于硫酸亚铁,能够快速改善其缺铁的不良状态,增强仔猪免疫功能和抗氧化性能。在妊娠后期母猪的日粮中添加适宜剂量的乳铁蛋白和甘氨酸螯合铁,不仅能够预防母猪贫血,还能够提高初生仔猪的初生重以及血清免疫指标,增强仔猪的抗病能力[15]。本研究结果发现,日粮中添加不同铁制剂均可显著提高断奶仔猪血清中IgA的含量,添加硫酸亚铁和甘氨酸铁还能显著提高断奶仔猪血清中IgG的含量。此外,日粮中添加甘氨酸铁能显著增强断奶仔猪血清中SOD的活性和T-AOC,降低MDA含量,与石磊等[16]在母猪中的研究结果一致。血液生理生化指标可反映动物机体的代谢情况和健康状况。仔猪体内60%~70%的铁以血红蛋白的形式存在于红细胞中,红细胞及血红蛋白是运输氧气和二氧化碳的重要载体,红细胞比容可以作为判断动物机体是否贫血的重要指标。仔猪的血红蛋白浓度低于70 g/L时,表明其处于贫血状态,其生长发育会受阻碍[17]。本研究结果表明,试验所有仔猪均未出现贫血状况。袁明贵等[18]研究发现,在断奶仔猪日粮中添加60 mg/kg的甘氨酸铁络合物能显著提高其血红蛋白浓度、红细胞总数、血细胞比容,红细胞平均体积也有一定程度的提高,能够有效预防仔猪的贫血。李伟[13]研究发现,添加有机铁能显著提高断奶仔猪的血血细胞比容,添加200 mg/kg有机铁仔猪平均血红蛋白浓度最高,添加50 mg/kg有机铁仔猪红细胞计数和血细胞比容值最高。研究发现,在母猪日粮中添加甘氨酸亚铁和复合氨基酸螯合铁,可改善母猪生产时和产后21日龄以及仔猪初生和断奶后体内血液红细胞数量、血液平均红细胞的体积和血液中血细胞比容,降低仔猪贫血的风险[19]。本研究发现,日粮中添加不同铁制剂各试验组断奶仔猪血液中红细胞数量显著提高,血红蛋白浓度也有显著增加,与上述研究结果类似。4结论本研究结果表明,在断奶仔猪日粮中添加甘氨酸铁能显著提高断奶仔猪的生长性能,改善其皮毛指数,提高断奶仔猪血清免疫力,增强抗氧化功能,提高红细胞数量,增加血红蛋白浓度。甘氨酸铁的效果优于硫酸亚铁和蛋氨酸铁。