豆粕是畜禽养殖业中的主要蛋白源。我国蛋白质饲料供给严重不足，大豆依赖进口[1]。大豆价格大幅波动[2]给畜牧业健康发展带来巨大冲击。开发非常规的蛋白饲料以缓解国内蛋白饲料短缺有重要意义[3]。紫苏籽富含多不饱和脂肪酸，其中α-亚麻酸含量高达60%[4]。在蛋鸡饲粮中添加富含α-亚麻酸的原料可以改变蛋黄脂肪酸的组成[5]，常用于生产富集ω-3 PUFA鸡蛋。紫苏籽饼（Perilla seed meal，PSM）是紫苏籽脱脂后的副产品。紫苏饼蛋白含量为28%~45%[6]。与棉籽饼、菜籽饼等植物蛋白饲料相比，紫苏饼气味芳香、适口性好，抗营养因子少，富含必需脂肪酸，是具有开发价值的蛋白饲料资源[7]。目前对紫苏饼饲用价值研究较少。本试验以罗曼蛋鸡为研究对象，探讨紫苏饼替代部分豆粕对蛋鸡产蛋性能、蛋品质和蛋黄脂肪酸组成的影响，以期为紫苏蛋白饲料资源的开发利用提供参考。1材料与方法1.1试验材料紫苏饼（PSM）由250双螺旋冷却压榨机压榨（新乡市天众机械制造有限公司），购自贵州金硒源农业发展有限公司。紫苏饼养分含量实测值为：干物质93.97%、粗蛋白37.37%、粗脂肪11.31%、粗灰分5.68%、钙1.16%、磷1.75%、中性洗涤纤维33.67%、酸性洗涤纤维28.82%、α-亚麻酸（ALA）6.75%、亚油酸（LA）1.35%。1.2试验设计选择480只24周龄产蛋率相近的罗曼粉蛋鸡，随机分为4组，每处理5个重复，每个重复24只。参照NRC（1994）蛋鸡营养需要和中国饲料成分及营养价值表（2017）设计玉米-豆粕型日粮配方。对照组试鸡采食基础日粮，试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组的试验饲粮分别使用10%、15%和20%的紫苏饼替代基础饲粮中的豆粕。平衡氨基酸等养分以保证除粗蛋白外，各组饲粮营养水平相近，试验日粮组成及营养水平见表1。对照组、试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组的饲料成本分别为2.60、2.40、2.31、2.21元/kg。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.10.001.T001表1试验日粮组成及营养水平（风干基础）项目对照组试验Ⅰ组试验Ⅱ组试验Ⅲ组原料组成/%玉米62.0061.6461.5661.48豆粕26.0016.0011.006.00紫苏饼0.0010.0015.0020.00赖氨酸盐酸盐0.000.170.250.33蛋氨酸0.000.190.190.19颗粒钙（粗）5.005.005.005.00颗粒钙（细）3.003.003.003.00预混料4.004.004.004.00合计100.00100.00100.00100.00营养水平代谢能/(MJ/kg)11.0310.9810.9610.95粗蛋白质/%16.0215.7115.4615.22钙/%3.903.913.923.93总磷/%0.450.470.470.48有效磷/%0.230.270.290.31赖氨酸/%0.750.750.750.75蛋氨酸/%0.420.420.420.42胱氨酸/%0.230.220.220.21苏氨酸/%0.540.530.530.53色氨酸/%0.160.150.140.14注：1.预混料为每千克日粮提供：Fe 30 mg、Cu 2.88 mg、Mn 7.48 mg、Zn 30 mg、VA 6 400 IU、VD3 1 600 IU、VE 11.2 IU、VK3 2 mg、VB2 4 mg、VB6 0.8 mg、VB12 0.008 mg、烟酸24.4 mg、泛酸钙8.8 mg、氯化胆碱120 mg。2.营养水平均为计算值。1.3饲养管理采用3层阶梯式笼子饲养，每个笼子饲养3只鸡。自然加人工补光，每天恒定光照16 h。每天投喂2次（7：00、15：00），匀料4次，自由采食；乳头式饮水器供水，自由饮水；每日16：00捡蛋。预试期7 d，正式试验期30 d。1.4测定指标及方法参照NY/T 2123—2012《蛋鸡生产性能测定技术规范》[8]和NY/T 823—2004《家禽生产性能名词术语和度量统计方法》[9]测定以下指标。1.4.1生产性能每日准确记录产蛋个数、总蛋重，计算平均日采食量、平均蛋重、产蛋率和料蛋比。平均蛋重(g)=平均每日总蛋重/总蛋数 (1)产蛋率=统计期内总产蛋数/(供试蛋鸡数×统计期天数)×100% (2)料蛋比=统计期内总耗料量(kg)/统计期内总蛋重(kg) (3)1.4.2蛋品质正式试验第30 d，每个重复随机收集6个鸡蛋，每组30个，用于蛋品质测定。EMT-5200蛋品质测试仪（日本Robotmation公司）测定蛋重、蛋白高度、哈夫单位和蛋黄颜色。分离蛋白和蛋黄，使用BL-320H电子天平（日本）称量蛋黄重量。使用游标卡尺测量蛋的纵径与横径，计算蛋形指数=纵径/横径。使用EFG-0503蛋壳强度测定仪（日本）测定蛋壳强度。剥去蛋壳膜，在蛋壳大头、中间和小头处，用数显游标卡尺测定厚度3次，取平均值，即为鸡蛋的蛋壳厚度。1.4.3蛋黄脂肪酸将各组的蛋黄样品冷冻干燥制成蛋黄样本。称取5 g样本与海砂20 g混匀，全部移入滤纸筒内。将滤纸筒放入索氏抽提器内，无水乙醚于65 ℃水浴回流提取，至完全抽提。使用3mL三氟化硼-甲醇法于90 ℃甲酯化7 min。使用HP-7890气相色谱仪（惠普，美国）、氢火焰离子化检测器（FID）、HPINNOWAX毛细管色谱柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）检测脂肪酸含量。条件：柱温185 ℃、汽化温度220 ℃、载气N2流速60 mL/min、检测温度250 ℃。1.5数据统计与分析数据录入2010 Excel初步处理，使用SPSS 20.0统计软件进行单因素方差（One-way ANOVA）分析，采用Duncan氏法进行多重比较，结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著，P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1紫苏饼对蛋鸡产蛋性能的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，各试验组蛋鸡的平均日采食量、平均蛋重、产蛋率和料蛋比无显著差异（P0.05），各试验组每千克鸡蛋的饲料成本分别降低0.38、0.57、0.77元（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.10.001.T002表2紫苏饼对蛋鸡产蛋性能和经济效益的影响组别平均日采食量/g产蛋率/%平均蛋重/g料蛋比饲料成本/(元/kg)对照组120.13±4.5095.83±2.6461.30±0.561.98±0.025.14±0.05A试验Ⅰ组120.14±3.1595.71±2.8461.21±0.481.98±0.024.76±0.05B试验Ⅱ组120.11±3.6896.31±2.3160.92±0.561.98±0.024.57±0.05C试验Ⅲ组120.10±3.5495.83±1.9460.92±0.621.98±0.024.37±0.04D注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05），不同大写字母表示差异极显著（P0.01），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）。2.2紫苏饼对蛋品质的影响（见表3）由表3可知，蛋鸡采食PSM饲粮后蛋重、蛋黄重和蛋黄比例显著升高（P0.05）。与对照组相比，试验组蛋重分别提高4.43%、4.86%和3.50%，蛋黄重分别提高10.50%、12.68%和7.35%，蛋黄比例分别提高6.00%、7.46%和7.35%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.10.001.T003表3紫苏饼对蛋品质的影响项目对照组试验Ⅰ组试验Ⅱ组试验Ⅲ组蛋重/g60.03±0.01b62.69±0.03a62.95±0.06a62.13±0.04a蛋黄重/g15.61±0.31b17.25±0.47a17.59±0.63a17.34±0.44a蛋黄比例/%26.00±0.41b27.56±0.52a27.94±0.59a27.91±0.46a蛋黄颜色9.24±1.629.34±1.419.22±1.179.49±1.64蛋形指数0.72±0.110.83±0.130.83±0.140.80±0.13蛋白高度/mm6.21±0.116.46±0.726.66±0.636.65±0.67哈夫单位78.62±2.8680.11±3.0280.11±2.7580.07±3.21蛋壳厚度/mm0.38±0.010.38±0.020.39±0.010.39±0.01蛋壳强度/(kg/cm2)60.33±2.3260.56±2.8260.79±2.4960.66±2.31注：同行数据肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.3紫苏饼对蛋黄脂肪酸组成的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，各试验组蛋黄ALA和MUFA含量均显著升高（P0.05）。试验Ⅲ组蛋黄DHA、ω-3 PUFA含量显著高于对照组和试验Ⅰ组（P0.05）。试验Ⅰ组和试验Ⅱ组蛋黄AA、ω-6 PUFA和SFA含量较对照组均显著降低（P0.05），试验Ⅲ组AA和SFA含量显著低于对照组（P0.05），但ω-6 PUFA含量与对照组无显著差异（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.10.001.T004表4紫苏饼对蛋黄脂肪酸组成的影响项目对照组试验Ⅰ组试验Ⅱ组试验Ⅲ组亚油酸（LA）10.35±0.4110.40±0.239.94±0.3610.66±0.34α-亚麻酸（ALA）0.19±0.01b0.37±0.02a0.40±0.02a0.52±0.03a花生四烯酸（AA）5.17±0.12a3.02±0.15b3.26±0.18b3.90±0.20b二十碳五烯酸（EPA）0.15±0.010.09±0.010.11±0.010.14±0.01二十二碳六烯酸（DHA）1.17±0.11b1.24±0.13b1.44±0.11a1.67±0.19aω-6 多不饱和脂肪（ω-6 PUFA）15.52±0.48a13.42±0.51b13.20±0.62b14.56±0.71abω-3 多不饱和脂肪（ω-3 PUFA）1.51±0.15b1.70±0.12b1.95±0.18ab2.33±0.24a多不饱和脂肪（PUFA）17.03±0.22a15.12±0.39b15.15±0.43b16.89±0.67a饱和脂肪酸（SFA）43.50±1.52a38.95±1.28b38.56±1.46b40.57±1.25b单不饱和脂肪酸（MUFA）37.07±1.20c44.24±1.33a44.6±2.34a40.65±1.87b%3讨论3.1紫苏饼对产蛋性能的影响高玉鹏等[10]使用10%~20%PSM替代豆粕饲喂蛋鸡，发现10%和15%PSM组蛋鸡的产蛋率和料蛋比无显著差异，20%PSM组蛋鸡的产蛋率和饲料转化效率降低，可能与饲粮中单宁、植酸和粗纤维含量较高，下调谷丙转胺酶活性，降低体蛋白质代谢和消化酶活性有关。本试验结果显示，饲粮中配合10%~20%PSM对蛋鸡的产蛋率、采食量和料蛋比均无显著影响。贵州省紫苏资源品质性状调查显示，不同品种紫苏的蛋白质、脂肪[11]以及粗纤维[12-13]等成分含量差异较大，上述试验结果的差异是否由紫苏品种不同所致有待进一步研究。3.2紫苏饼对蛋品质的影响在饲粮中添加适宜含量的不饱和脂肪酸可以影响蛋重。有研究表明，添加0.2%ALA能够显著提高蛋重[14]。李志琼[15]研究表明，在饲粮中添加0.5%~3.0%ALA可以增大蛋重，过高ALA会使（4%）蛋重降低。本试验中，各试验饲粮PSM水平分别提供ALA约0.68%、1.01%和1.35%，说明随着ALA含量提高，各试验组蛋重显著增大，这与上述试验结果一致。LA是影响蛋重的重要因素[16]，1% LA即可满足蛋鸡生产性能的需求[17]，为获得最大蛋重，LA含量应为饲料量1.5%~2.0%[18]。研究证明，随着亚油酸含量的提高，蛋重有逐渐提高的趋势[19]。本试验使用的PSM中LA含量为1.35%，玉米中LA含量约为2.10%，则各组LA含量约为1.32%、1.45%、1.49%和1.56%，较对照组分别提高0.14%、0.20%和0.27%。高玉鹏等[10]试验表明，PSM对蛋重无显著性影响。原因可能是该PSM残油率低，提供的ALA和LA含量相对较低，从而对蛋重影响较小。本试验结果表明，PSM能显著提高蛋黄重和蛋黄比例，对哈夫单位、蛋白高度、蛋黄颜色等无显著性影响。3.3紫苏饼对蛋黄脂肪酸组成的影响通过日粮调控可以改变鸡蛋脂肪酸组成和含量[20-21]。饲粮中添加15%紫苏籽（ALA约4%）[22]，会使蛋黄中ALA和DHA含量提高。直接添加1%ALA到饲粮中，饲喂28 d后，蛋黄DHA较对照组提高43%，ALA增加近6倍[15]。本试验饲粮ALA含量为1.35%（20%PSM）时，试验30 d，蛋黄脂肪酸含量和组成发生改变，蛋黄DHA含量提高42.73%，与前人研究结果相近；蛋黄ALA含量提高幅度低于上述研究，这可能因为饲粮中未添加抗氧化剂，PSM中部分ALA氧化，致使蛋黄ALA沉积效率降低。本试验结果显示，试验组蛋黄ω-3 PUFA含量提高，ω-6 PUFA含量降低，与吴永保等[5]、Bean等[23]所得的结论相似，原因可能是ω-3 PUFA与ω-6 PUFA竞争利用相同的去饱和酶和碳链延长酶，ω-3 PUFA与这组酶有较大亲和力，使ω-6 PUFA的合成受到抑制，从而在蛋黄中沉积较少[24]。4结论在本试验条件下，饲粮中添加10%~20%PSM替代豆粕不影响蛋鸡的产蛋性能，且能够降低生产成本，提升经济效益。饲粮中添加PSM可以提高蛋重、蛋黄重和蛋黄比例，改变蛋黄脂肪酸组成。因此，利用紫苏饼代替饲粮中的豆粕是可行的。