豆粕是淡水鱼饲料中最常见的植物蛋白源，具有蛋白质含量高、氨基酸平衡、质量稳定等优点[1]。鲤鱼饲料配方中豆粕含量占20%~40%[2-4]。近年来，豆粕作为植物蛋白源的需求供应不足，饲料成本显著增加[5]。因此，在不影响鱼类生长速度的前提下，有必要寻找可替代的可持续性蛋白源[6]。花生粕是花生米用溶剂提取油脂后的副产品。花生粕营养价值较高，蛋白质含量高达48%。花生粕价格低于豆粕，来源广泛。有研究表明，饲料中花生粕替代50%的豆粕不会影响草鱼的生长性能[7]。Lopes等[8]研究表明，花生粕替代豆粕的比例为25%时，对罗非鱼的生长性能，饲料效率以及营养组成的影响不显著。Li等[9]使用25%的花生粕替代斑点叉尾鮰饲料中豆粕，发现其生长性能、饲料效率和体组成未产生不利影响。津新鲤2号（Cyprinus carpio）是以经4代选育的乌克兰鳞鲤为母本，津新鲤为父本杂交获得的新品种。津新鲤2号的生长速度、性成熟年龄、抗病力、耐寒性以及起捕率等均优于其他鲤鱼品种。目前，利用花生粕替代豆粕在津新鲤2号养殖中的研究未见报道。因此，本试验探究饲料中花生粕替代豆粕对津新鲤2号生长性能、肌肉营养组成和血清生化指标的影响，为评估花生粕在津新鲤2号饲料中的适宜用量提供参考。1材料与方法1.1试验动物与饲养管理津新鲤2号初始体质量为（18.0±0.22）g，购自连云港市博旺特种水产养殖有限公司。饲养试验在江苏海洋大学水产养殖实验室内的可控生态水槽系统（大连汇新）进行。每天投喂4次（8：00、11：00、14：00和17：00），投喂总量为体质量的4%，并根据鱼体质量和摄食情况每周调整1次。试验期间每天处理残饵，换水1次，换水量约25%。养殖水温20~24 ℃，溶氧大于5 mg/L。每日及时记录采食量和采食情况。1.2试验设计试验开始前暂养1 w，投喂基础饵料，驯化鲤鱼上浮抢食。正式试验开始前停食24 h，选取体质健康、规格均匀的幼鱼450尾，随机分成5组，每组3个重复，每个重复30尾鱼。各试验组分别为PNM0、PNM25、PNM50、PNM75和PNM100，分别以0、25%、50%、75%和100%的花生粕替代配方中的豆粕，并以鱼粉、菜粕、棉粕为蛋白源，豆油为脂肪源，添加晶体赖氨酸和蛋氨酸平衡饲料氨基酸含量，配制5组饵料。试验饵料组成及营养水平见表1。试验期8 w。按照配方设计，饲料原料经粉碎过60目筛网，充分混匀10 min，每千克原料加水500 mL，揉拌15 min，利用便携式绞肉机（TK-12，丰瑞吉食品机械有限公司）进行制粒，挤压成直径为0.4 mm左右的颗粒饲料，放入干燥箱中55~60 ℃烘4 h，水分控制在10%~12%，装袋密封，编号后置于4 ℃冰箱中保存。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.10.001.T001表1试验饵料组成及营养水平（风干基础）项目PNM0PNM25PNM50PNM75PNM100原料组成鱼粉6.006.006.006.006.00豆粕24.0018.0012.006.000花生粕0.006.0012.0018.0024.00棉粕20.0020.0020.0020.0020.00菜粕12.4611.3810.309.248.16面粉29.1130.0631.0031.9532.90赖氨酸0.370.480.600.700.81蛋氨酸0.160.180.200.210.23磷酸二氢钙1.701.701.701.701.70胆碱0.300.300.300.300.30豆油5.005.005.005.005.00多维0.400.400.400.400.40多矿0.500.500.500.500.50合计100.00100.00100.00100.00100.00营养水平粗蛋白质37.8938.0338.1737.9137.98粗脂肪6.856.546.606.666.48粗灰分6.676.456.336.306.41水分10.1210.2410.1310.1910.29注：1.多维为每千克饵料提供：VA 5 000 IU、VD 2 000 IU、VE 50 mg、VB1 8 mg、VB2 10 mg、VB6 8 mg、VK 5 mg、泛酸30 mg、VB12 0.03 mg、叶酸3 mg、烟酸30 mg、肌醇100 mg、生物素0.4 mg。2.多矿为每千克饵料提供：Mg 300 mg、VC 180 mg、Zn 150 mg、Fe 170 mg、Co 0.25 mg、Cu 4 mg、Mn 22 mg、Se 0.4 mg。3.营养水平中总能为计算值，其余均为实测值。%1.3样品采集养殖试验结束试验鱼饥饿24 h，对各组鱼体进行计数、称重。在每个缸中随机取10尾鱼，其中5尾鱼测定其体质量和体长，随后尾静脉采血，4 ℃静置2 h，3 000 r/min离心15 min，收集血清，-20℃冰箱保存，用于测定血液生化指标。解剖后取出内脏，计算脏体比。另外5尾取侧线以上、背鳍以下的肌肉捣碎，每组混合均匀置于离心管中，-80 ℃冰箱保存，用于测定肌肉中常规营养成分以及氨基酸和脂肪酸的组成。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能成活率=n2/n1×100% (1) 饲料系数=m3/(m2-m1) (2)增重率=(m2-m1)/m1×100% (3)蛋白质效率=(m2-m1)/(m3×P)×100% (4)特定生长率=(lnm2-lnm1)/t×100% (5)脏体比=m4/m2×100% (6)肥满度=m2/L3 (7)式中：m1、m2分别为试验鱼的初重和末重（g）；t为养殖时间（d）；m3为饲料摄入量（g）；P为饲料粗蛋白质含量（%）；n1、n2分别为试验开始和结束时试验鱼的数量（尾）；L为体长（cm）；m4为试验鱼的内脏重（g）。1.4.2营养成分粗蛋白质（CP）采用KjeltecTM-8400全自动凯氏定氮仪（丹麦福斯）测定；粗脂肪（EE）采用Soxtec TM8000 Extraction Unit索式抽提仪（丹麦福斯）测定；粗灰分（Ash）采用550 ℃灼烧称量法（GB 5009.4—2016）测定；肌肉氨基酸经盐酸水解后采用Hitachi L-8900氨基酸分析仪（日本株式会社）测定；肌肉脂肪酸采用氯仿-甲醇法提取后经岛津GC-MS 2010 S E气相色谱质谱联用仪（日本株式会社）测定。1.4.3血清生化指标碱性磷酸酶（AKP）、谷草转氨酶（AST）、溶菌酶（LZM）活性及甘油三酯（TG）含量采用南京建成生物工程研究所的试剂盒测定。1.5数据统计与分析采用SPSS 23软件对数据进行单因素方差分析，结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1饲料中花生粕替代豆粕对津新鲤2号生长性能的影响（见表2）由表2可知，花生粕100%替代豆粕时鲤鱼的蛋白质效率显著低于其他各组（P0.05）。各试验组鲤鱼其他指标均无显著差异（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.10.001.T002表2饲料中花生粕替代豆粕对津新鲤2号生长性能的影响组别末重/g增重率/%饲料系数蛋白质效率/%特定生长率/(%/d)脏体比/%肥满度/(g/cm3)PNM0组90.97±5.24391.27±29.291.19±0.082.60±0.16a2.84±0.118.12±0.682.63±0.21PNM25组94.06±3.29410.90±16.931.16±0.062.68±0.11a2.91±0.068.32±0.832.57±0.23PNM50组90.21±4.81389.69±8.221.20±0.072.59±0.15a2.84±0.098.68±1.082.61±0.14PNM75组88.29±16.2378.66±8.221.24±0.022.49±0.05a2.80±0.038.42±0.682.60±0.22PNM100组89.57±3.16385.89±15.301.23±0.052.23±0.11b2.82±0.068.63±0.782.55±0.26注：同列数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著（P0.05），不同字母表示差异显著（P0.05）；下表同。2.2饲料中花生粕替代豆粕对津新鲤2号肌肉常规组成的影响（见表3）由表3可知，各试验组鲤鱼肌肉中粗蛋白质、粗脂肪和粗灰分含量均无显著差异（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.10.001.T003表3饲料中花生粕替代豆粕对津新鲤2号肌肉常规组成的影响（风干基础）组别粗蛋白质粗脂肪粗灰分PNM0组88.11±1.525.12±0.034.60±0.02PNM25组88.26±1.295.10±0.054.62±0.05PNM50组89.37±2.055.17±0.034.65±0.04PNM75组90.20±0.385.12±0.024.65±0.04PNM100组88.68±1.295.13±0.044.62±0.03%2.3饲料中花生粕替代豆粕对津新鲤2号血清生化指标的影响（见表4）由表4可知，PNM100组鲤鱼的甘油三酯的含量显著高于其他各组（P0.05）。随着花生粕替代豆粕比例的增高，溶菌酶活性降低，PNM75和PNM100组显著低于其余各组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.10.001.T004表4饲料中花生粕替代豆粕对津新鲤2号血清生化指标的影响组别碱性磷酸酶/(U/L)谷草转氨酶/(U/mL)甘油三酯/(mmol/L)溶菌酶/(U/mL)PNM0组31.20±1.200.65±0.172.69±0.08b111.01±1.88aPNM25组33.60±1.570.69±0.162.54±0.10b107.67±2.45abPNM50组30.18±1.050.65±0.132.53±0.09b105.89±2.56bPNM75组29.05±1.640.76±0.182.51±0.14b97.22±1.73cPNM100组32.76±1.840.73±0.392.81±0.11a78.11±1.45d2.4饲料中花生粕替代豆粕对津新鲤2号肌肉氨基酸组成的影响（见表5）由表5可知，各试验组津新鲤2号肌肉中必需氨基酸、呈味氨基酸和总氨基酸含量均无显著差异（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.10.001.T005表5饲料中花生粕替代豆粕对津新鲤2号肌肉氨基酸组成的影响（风干基础）项目氨基酸PNM0组PNM25组PNM50组PNM75组PNM100组必需氨基酸赖氨酸（Lys）6.69±0.277.02±0.566.98±0.417.12±0.326.88±0.35苏氨酸（Thr）3.33±0.313.02±0.293.03±0.333.26±0.363.19±0.22缬氨酸（Val）3.89±0.483.96±0.354.01±0.293.94±0.353.88±0.21蛋氨酸（Met）3.21±0.193.01±0.413.33±0.213.12±0.563.29±0.42异亮氨酸（Ile）3.42±0.363.39±0.453.35±0.473.20±0.393.42±0.29亮氨酸（Leu）6.29±0.056.24±0.235.82±0.545.71±0.465.81±0.67苯丙氨酸（Phe）3.53±0.593.56±0.453.31±0.273.09±0.313.24±0.19组氨酸（His）0.29±0.110.31±0.080.25±0.130.36±0.050.24±0.08精氨酸（Arg）4.02±0.394.08±0.113.96±0.213.74±0.144.16±0.22非必需氨基酸谷氨酸（Glu）*10.9±0.6110.56±0.4310.32±0.5210.45±0.4910.88±0.34甘氨酸（Gly）*3.48±0.183.33±0.293.45±0.283.12±0.643.21±0.37丙氨酸（Ala）*5.01±0.215.18±0.195.33±0.305.39±0.244.61±0.86天冬氨酸（ASP）*7.96±0.147.88±0.418.04±0.508.09±0.487.45±0.36胱氨酸（Cys）2.61±0.152.53±0.062.63±0.092.77±0.102.34±0.21酪氨酸（Tyr）0.15±0.010.17±0.020.09±0.060.14±0.020.11±0.01脯氨酸（Pro）2.36±0.312.45±0.262.02±0.192.13±0.272.66±0.25丝氨酸（Ser）2.86±0.152.99±0.082.71±0.143.04±0.203.01±0.13呈味氨基酸（DAA）27.35±0.0926.95±1.2327.14±2.0127.05±1.9325.65±2.30必需氨基酸（EAA）34.67±1.5334.59±2.4534.04±1.6133.54±1.5534.11±1.19总氨基酸（TAA）70.00±2.6169.68±3.1868.63±2.4268.67±0.1567.88±1.98注：1.同行数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著（P0.05），不同字母表示差异显著（P0.05）；下表同。2.*为呈味氨基酸。%2.5饲料中花生粕替代豆粕对津新鲤2号肌肉脂肪酸组成的影响（见表6）由表6可知，PNM75、PNM100组鲤鱼肌肉中MUFA含量显著高于对照组（P0.05）；PNM50、PNM75和PNM100组鲤鱼肌肉中PUFA含量显著低于对照组（P0.05）。C18∶2n-6c（亚油酸）和C22∶6n-3（DHA）随着花生粕比例的增加呈现下降趋势，PNM75和PNM100组显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.10.001.T006表6饲料中花生粕替代豆粕对津新鲤2号肌肉脂肪酸组成的影响（风干基础）项目脂肪酸PNM0组PNM25组PNM50组PNM75组PNM100组饱和脂肪酸（SFA）c14∶01.24±0.07bc1.19±0.07c1.33±0.07abc1.36±0.08ab1.45±0.10ac16∶034.43±1.1633.96±0.9234.95±0.9134.62±0.8534.55±0.22c18∶014.02±0.6814.67±0.6713.93±0.9115.10±0.3814.93±0.58单不饱和脂肪酸（MUFA）c16∶10.66±0.10b0.66±0.07b0.90±0.14a0.95±0.14a0.92±0.12ac18∶1n-9c19.11±0.68b19.34±0.56b19.75±0.45b21.18±0.55a21.32±0.64ac20∶1n-90.91±0.09ab0.85±0.10b1.01±0.10ab1.06±0.11a0.95±0.06ab多不饱和脂肪酸（PUFA）c18∶2n-6c20.93±0.68a20.75±0.92a20.26±0.10ab19.07±0.48b19.32±1.01bc18∶3n-32.28±0.142.17±0.182.17±0.112.02±0.082.02±0.17c20∶2n-60.56±0.03a0.52±0.08ab0.50±0.04ab0.45±0.04b0.46±.0.02bc20∶3n-60.72±0.09a0.74±0.04a0.66±0.13ab0.53±0.05b0.54±0.02bc20∶5n-3（EPA）NDND0.01±0.00NDNDc22∶6n-3（DHA）1.83±0.40a1.80±0.30a1.52±0.32ab1.17±0.17b1.21±0.03bΣSFA49.70±0.5049.83±1.3450.21±0.3251.08±0.7150.92±0.67ΣMUFA20.68±0.80b20.84±0.65b21.66±0.58b23.18±0.50a23.19±0.77aΣPUFA26.32±0.70a25.98±0.94ab25.11±0.24b23.25±0.75c23.54±1.18cΣn-3 PUFA4.11±0.27a3.97±0.16ab3.69±0.23abc3.20±0.20c3.22±0.19cΣn-6 PUFA22.21±0.64a22.01±0.96ab21.41±0.15ab20.06±0.56c20.31±1.01bcΣn-3/Σn-60.19±0.010.18±0.010.17±0.010.16±0.010.16±0.01%3讨论3.1饲料中花生粕替代豆粕对津新鲤2号生长性能的影响花生粕来源广泛、价格低廉，可以替代水产饲料中的豆粕。饲料中花生粕替代25%的豆粕，不影响斑点叉尾鮰的增重率、饲料系数和成活率[9]；在凡纳滨对虾的研究中发现，花生粕替代组的增重率、特定生长率和成活率与豆粕组不显著，但是蛋白质效率比低于豆粕组[10]；使用25%花生粕替代豆粕，对罗非鱼的生长性能无显著影响[8]。本研究中，花生粕替代25%~75%的豆粕，对津新鲤2号的成活率、末重、增重率、饲料系数、蛋白质效率比以及脏体比和肥满度均无显著影响（P0.05），与上述研究基本一致，表明花生粕替代豆粕比例不超过75%时，对津新鲤2号生长性能无不良影响。3.2饲料中花生粕替代豆粕对津新鲤2号肌肉常规组成的影响水产动物的肌肉组成能够反映饲料成分转化为自身营养的情况。在花生粕、菜粕、棉粕以及黑水虻幼虫培养基等原料替代豆粕的研究中，罗非鱼肌肉中粗蛋白和粗脂肪含量降低[8,11-12]。然而，在对草鱼的研究中，花生粕替代25%、50%和75%的豆粕对鱼体肌肉中粗蛋白、粗脂肪和粗灰分无显著影响[7]。饲料中花生粕、菜粕和棉粕等混合植物蛋白源替代豆粕20%~80%时，对黄河鲤肌肉常规组成无影响[13]。在斑点叉鮰的饲料中使用花生粕替代10%~25%的豆粕，鱼体肌肉中粗蛋白和粗脂肪含量均无变化[9]，与本试验中花生粕替代25%~100%豆粕的结果一致，表明花生粕可以很好地被津新鲤2号用于蛋白质合成和肌肉生长。3.3饲料中花生粕替代豆粕对津新鲤2号血清生化指标的影响鱼类血清生化指标能够反映机体的免疫功能和健康状况。碱性磷酸酶和谷草转氨酶是参与机体内氨基酸氨基转运的酶，两种酶的活性可以反映机体肝脏的健康状态[14]。溶菌酶活性可以反映机体抗氧化能力；甘油三酯主要参与机体能量代谢，可以释放供机体活动所需的能量。已有研究表明，石斑鱼饲料中随着花生粕替代鱼粉的比例升高，溶菌酶的活性显著增强[15]。在凡纳滨对虾的研究中，花生粕组和豆粕组中的溶菌酶、碱性磷酸酶和谷草转氨酶的活性无显著变化[16]。本试验中，花生粕替代不同比例的豆粕，津新鲤血清中溶菌酶和碱性磷酸酶的活性均无显著差异（P0.05）；替代比例高于75%后，津新鲤血清中溶菌酶的活性降低（P0.05）；替代100%豆粕，津新鲤血清甘油三酯含量显著升高（P0.05）。结果表明，花生粕替代75%~100%的豆粕后会降低津新鲤的免疫力。3.4饲料中花生粕替代豆粕对津新鲤2号肌肉氨基酸组成的影响氨基酸是决定水产动物肌肉品质的主要成分。必需氨基酸（EAA）的含量和构成比例是评价鱼体肌肉蛋白质营养价值最重要的决定因素。呈味氨基酸（DAA）是水产品呈味的基础，不同的组成与含量使水产品呈现不同的风味特征。侯红利[17]利用棉粕全部替代豆粕，发现鲤鱼肌肉中EAA和DAA含量略微降低。何亚丁等[18]利用小球藻藻渣替代豆粕，发现凡纳滨对虾肌肉DAA含量显著上升，总氨基酸（TAA）和EAA含量呈现先上升后下降的趋势。对中华绒螯蟹的研究表明，发酵豆粕组幼蟹肌肉中的总游离氨基酸和DAA含量均低于豆粕组[19]。以上研究表明，不同的蛋白源替代饲料中的豆粕对鱼类肌肉中氨基酸组成的影响不同。在本试验中，花生粕替代不同比例的豆粕，对津新鲤2号肌肉中的EAA、DAA和TAA含量无显著影响（P0.05）。在罗非鱼的研究中，各处理组肌肉中EAA和非必需氨基酸（NEAA）含量均无显著差异[20]，与本试验结果一致，表明花生粕替代豆粕对津新鲤2号肌肉氨基酸营养价值和风味无不良影响。3.5饲料中花生粕替代豆粕对津新鲤2号肌肉脂肪酸组成的影响脂肪酸是脂类重要的组成部分，多不饱和脂肪酸（PUFA）是人体不可或缺的营养物质。有研究使用肉骨粉和酵母发酵豆粕替代鱼粉，发现各试验组青鱼幼鱼肌肉中的PUFA和单不饱和脂肪酸（MUFA）含量无显著差异[21]。南极磷虾粉替代鱼粉后，银鲳鱼肌肉中饱和脂肪酸（SFA）、MUFA和PUFA的含量均无明显差异[22]。在本试验中，各组肌肉MUFA含量随花生粕替代豆粕水平的增加而显著增加（P0.05），PUFA显著降低，与对黄颡鱼[23]的研究结果一致，说明花生粕可在一定程度上改善津新鲤2号肌肉的香味。本试验结果表明，当替代水平超过50%时，津新鲤2号肌肉中的DHA和亚油酸含量显著降低（P0.05），与蝇蛆粉替代鱼粉对黄颡鱼[23]的研究结果一致，可能是由于花生粕中亚油酸的含量较低、不同物种对PUFA需求量的不同。4结论当饲料中豆粕含量为24%，花生粕替代其比例不超过50%时，对津新鲤2号的生长性能、肌肉营养组成和血清生化指标无明显负面影响，可以降低津新鲤2号的饲料成本。