近年来，抗生素在家禽生产使用中逐渐受到限制[1]，需要寻找能够改善鸡肠道健康的抗生素替代品[2]。溶菌酶，又称为1,4-β-N-乙酰胞壁酸酶，是一种天然抗菌酶，通过水解细菌内肽聚糖的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰葡萄糖胺之间的β-1,4糖苷键可以直接发挥抗菌活性，或者通过间接刺激巨噬细胞来杀灭细菌[3-4]。溶菌酶作为酶制剂，已广泛应用于医疗、食品和其他行业。本试验以溶菌酶和抗生素作对比，旨在探究溶菌酶对蛋雏鸡生长性能、肠道形态和显著提高抗氧化能力的影响，为溶菌酶在蛋雏鸡中应用提供参考依据。1材料和方法1.1试验材料溶菌酶（纯度约80%，酶活力约20 000 U/mg，浙江艾杰斯生物科技有限公司生产）、金霉素（河南驻马店华中正大有限公司生产）、甲基盐霉素（美国礼来公司生产）和维吉尼亚霉素（美国辉宝有限公司生产）。1.2试验设计选取720只体重相近的6日龄京粉1号蛋雏鸡，随机分为4组，每组6个重复，每组30只鸡。分为对照组（饲喂基础日粮）、甲基盐霉素组（在基础日粮中添加50 mg/kg甲基盐霉素）、混合抗生素组（在基础日粮中添加30 mg/kg金霉素、50 mg/kg甲基盐霉素和20 mg/kg维吉尼亚霉素）、溶菌酶组（在基础日粮中添加40 mg/kg溶菌酶）。溶菌酶添加量为公司推荐量，抗生素添加量参照农业农村部公告。本试验于2019年4月初至5月底在广东省清远市广生元畜牧发展有限公司蛋鸡场进行。试验期为42 d，前期（1～21 d）和后期（22～42 d）两个阶段。基础饲粮参照NRC（1994）配制，基础饲粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.11.001.T001表1基础饲粮组成及营养水平（风干基础）原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米57.50代谢能/(MJ/kg)11.98豆粕29.00粗蛋白质/%20.82次粉5.00粗纤维/%2.75膨化大豆4.00钙/%0.95进口鱼粉0.50总磷/%0.70石粉1.50有效磷/%0.44预混料2.50赖氨酸/%1.25蛋氨酸/%0.49注：1.预混料为每千克饲粮提供：VA 12 500.00 IU、VD 2 800.00 IU、VE 20.00 IU、VK3 1.50 mg、VB1 3.50 mg、VB2 10.50 mg、VB6 5.25 mg、VB12 0.02 mg、叶酸1.05 mg、泛酸12.50 mg、生物素0.07 mg、烟酸35.00 mg、氯化胆碱1.00 g、Fe 80.00 mg、Cu 8.00 mg、Mn 100.00 mg、Zn 60.00 mg、Co 0.20 mg、Se 0.40 mg。2.营养水平均为计算值。1.3饲养管理蛋雏鸡饲养于3层重叠式笼中，采用料斗和乳头式饮水器，自由采食及饮水，每天定时饲喂2次，其间匀料3～4次，根据蛋雏鸡日龄来调整合适的温度、湿度以及光照时间、强度等。蛋雏鸡及时接种疫苗。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能试验期间每天记录蛋雏鸡耗料量，每周末进行称重，称重前12 h禁食，自由饮水。称量计算雏鸡体重(BW)，平均日增重(ADG)、平均耗料量(ADFI)、料重比(F/D)。平均日增重=(末重–初重)/天数(1)平均日采食量=总耗料重量/天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2肠道形态试验第42 d，随机选择2只蛋雏鸡空腹12 h后，进行屠宰，取十二指肠、空肠和回肠中段各2 cm样本。样本立即放置于4%多聚甲醛中固定24 h，常规石蜡切片，苏木精-伊红（HE）染色，HE染色切片光镜下观察，每例样本分别选取3个完整的典型肠绒毛、隐窝，使用OLYMPUS cell Sens Standard 1.18（Build 16686）软件测量各组肠段的绒毛高度和隐窝深度。绒毛隐窝比=绒毛高度/隐窝深度(4)1.4.3抗氧化能力试验第42 d，蛋雏鸡屠宰后，取肝脏5 g，将十二指肠和空肠各3 cm利用生理盐水洗净，滤纸吸干水分，分别利用锡箔纸包好，编号迅速置入液氮冷冻，于-80 ℃冰箱保存，采用上海碧云天生物技术有限公司生产的试剂盒测定蛋雏鸡十二指肠、空肠和肝脏中的总抗氧化能力（T-AOC）和丙二醛（MDA）的含量。1.5数据统计与分析采用SPSS 17.0软件对试验数据进行单因素方差分析，多重比较采用Duncan氏法，结果以“平均值±标准误”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1饲粮中添加溶菌酶对蛋雏鸡生长性能的影响（见表2）由表2可知，与对照组、甲基盐霉素组和抗生素组相比，饲粮中添加溶菌酶对蛋雏鸡试验期体重、各阶段平均日增重、平均日采食量和料重比均无显著影响（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.11.001.T002表2饲粮中添加溶菌酶对蛋雏鸡生长性能的影响时间项目对照组甲基盐霉素组混合抗生素组溶菌酶组P值第1 dBW/g55.36±0.6155.38±0.5455.42±0.8155.42±0.931.000第21 dBW/g231.80±1.81227.83±2.59232.06±2.77230.51±2.320.591第42 dBW/g474.21±3.44470.92±4.18480.63±5.97484.03±4.710.214第1~21 dADG/g8.40±0.078.21±0.138.41±0.138.34±0.090.552ADFI/g16.47±0.2416.24±0.1516.65±0.3116.57±0.230.663F/D1.96±0.021.98±0.031.98±0.011.99±0.020.765第1~42 dADG/g9.98±0.079.89±0.1010.13±0.1410.21±0.100.172ADFI/g23.04±0.1422.99±0.2922.74±0.5023.34±0.200.454F/D2.31±0.022.32±0.022.24±0.062.29±0.020.366注：同行数据肩标小写字母不同表示差异显著（P0.05），字母相同或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2饲粮中添加溶菌酶对蛋雏鸡肠道形态的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，溶菌酶组十二指肠的绒毛高度和绒毛隐窝比显著提高（P0.05）；与甲基盐霉素组相比，溶菌酶组十二指肠的隐窝深度显著降低（P0.05），十二指肠的绒毛隐窝比显著提高（P0.05）；与混合抗生素组相比，溶菌酶组蛋鸡空肠绒毛隐窝比显著降低（P0.05）。与对照组和甲基盐霉素组相比，溶菌酶组空肠的绒毛高度和隐窝深度显著降低（P0.05）；与对照组相比，溶菌酶组空肠的绒毛隐窝比显著提高，且与甲基盐霉素组无差异（P0.05）；与混合抗生素组相比，溶菌酶组空肠的绒毛隐窝比显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.11.001.T003表3饲粮中添加溶菌酶对蛋雏鸡肠道形态的影响组织项目对照组甲基盐霉素组混合抗生素组溶菌酶组P值十二指肠绒毛高度/μm1 001.17±21.48c1 238.59±28.76a1 143.57±28.03b1 208.78±17.06ab0.010隐窝深度/μm202.87±8.91ab218.75±5.51a200.09±7.09ab190.60±4.86b0.003绒毛隐窝比5.15±0.23c5.86±0.19b6.00±0.29ab6.59±0.17a0.010空肠绒毛高度/μm746.64±32.53ab769.27±45.94a597.72±78.43bc574.17±64.21c0.030隐窝深度/μm263.14±12.3a209.19±24.46b109.58±13.84c135.00±15.40c0.010绒毛隐窝比3.2±0.23c4.19±0.26b5.73±0.31a4.36±0.13b0.010回肠绒毛高度/μm758.98±15.05712.25±11.07752.92±18.25758.08±21.980.257隐窝深度/μm150.23±6.86147.05±6.79151.73±4.62151.79±7.080.962绒毛隐窝比5.64±0.285.18±0.245.08±0.135.29±0.210.2942.3饲粮中添加溶菌酶对蛋雏鸡肠道和肝脏抗氧化能力的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，溶菌酶组空肠和肝脏的总抗氧化能力（T-AOC）显著提高（P0.05），十二指肠丙二醛（MDA）的含量显著降低（P0.05）；与甲基盐霉素组相比，溶菌酶组十二指肠、空肠和肝脏的T-AOC和MDA含量均无显著差异（P0.05）；与混合抗生素组相比，溶菌酶组空肠T-AOC显著提高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.11.001.T004表4饲粮中添加溶菌酶对蛋雏鸡肠道和肝脏抗氧化能力的影响组织项目对照组甲基盐霉素组混合抗生素溶菌酶P值十二指肠T-AOC/(mmol/g)180.31±26.69174.79±14.16173.28±15.18175.66±15.920.994MDA/(μmol/g)0.29±0.02a0.16±0.01b0.15±0.01b0.19±0.02b0.001空肠T-AOC/(mmol/g)63.51±3.12c71.57±3.14ab66.37±1.38bc77.42±1.48a0.003MDA/(μmol/g)0.27±0.02a0.25±0.02a0.18±0.02b0.22±0.02ab0.036肝脏T-AOC/(mmol/g)43.30±4.13b57.19±4.10a52.80±2.78a59.83±3.00a0.005MDA/(μmol/g)0.127 3±0.010 70.140 0±0.013 00.136 9±0.012 50.134 6±0.007 50.8763讨论3.1饲粮中添加溶菌酶对蛋雏鸡生长性能的影响本试验结果表明，与对照组相比，日粮中添加40 mg/kg溶菌酶对蛋雏鸡ADFI、FCR及ADG均无显著影响，与Gong等[5]、Torki等[6]和Xia等[7]结论一致。与甲基盐霉素组和混合抗生素组相比，溶菌酶组的蛋雏鸡生长性能差异不显著，与刘伟等[8]在岭南黄雏鸡饲粮中添加2.5 mg/kg那西肽和蛋源溶菌酶（10、13mg/kg）比较的结果相似。Abdel-Latif等[9]研究表明，饲粮中添加90 mg/kg溶菌酶可以提高肉鸡平均日增重，降低料重比。Liu等[10]研究表明，饲粮中添加溶菌酶显著降低料重比，使感染产气荚膜梭菌肉鸡体重有增加趋势。本试验前期结果表明，饲粮中添加200 mg/kg发酵溶菌酶饲喂产蛋高峰期蛋鸡，可降低料蛋比3.4%[11]。以上不同研究结果可能与溶菌酶活性、添加量和制备工艺有关，当试验鸡的品种、饲料营养、饲养管理和条件不同时也有一定影响。3.2饲粮中添加溶菌酶对蛋雏鸡肠道形态的影响绒毛隐窝比值与肠道消化吸收能力呈正相关[12]。本试验结果表明，与对照组和甲基盐霉素组相比，溶菌酶组显著提高十二指肠绒毛隐窝比，与Humphrey等[13]在饲粮中添加含有能表达10％溶菌酶的大米饲喂雏鸡的结果相似。溶菌酶对肠道形态的有益影响可能与肠道菌群变化和大肠菌数量减少有关[14-15]，促进十二指肠对营养物质消化吸收[16-17]。Torki等[6]研究表明，雏鸡饲粮中添加40 mg/kg溶菌酶可以显著降低空肠绒毛高度和隐窝深度，与本试验结果一致。May等[18]研究表明，饲粮中添加溶菌酶可以增加空肠和回肠隐窝深度及回肠绒毛高度。Abdel-Latif等[9]研究发现，饲粮中添加溶菌酶可以增加肉鸡空肠绒毛高度和隐窝深度。有关溶菌酶与抗生素在肠道形态上对比研究较少，影响机制需进一步试验研究。3.3饲粮中添加溶菌酶对蛋雏鸡肠道和肝脏抗氧化能力的影响消化酶在肠道中消化食物时，会产生致氧化因子[19]，活性氧浓度的增加会诱导细胞氧化应激[20-21]，导致肠道黏膜损伤[22]。试验结果显示，与对照组相比，溶菌酶组空肠和肝脏T-AOC含量显著提高，十二指肠MDA含量显著降低，与混合抗生素组相比，溶菌酶组空肠T-AOC含量显著提高。表明饲粮中添加溶菌酶与甲基盐霉素对提高机体的综合抗氧化能力均具有促进作用，能在一定程度上降低机体氧化应激损伤，效果优于对照组和混合抗生素组。4结论饲粮中添加40 mg/kg溶菌酶对蛋雏鸡生长性能无显著影响，促进蛋雏鸡十二指肠对营养物质消化吸收，可提高十二指肠、空肠和肝脏抗氧化能力。