我国羊乳制品消费额每年增长约30亿元,市场份额占乳制品的10%[1]。提高奶山羊产奶性能,增加羊乳营养水平,维护奶山羊机体健康是奶山羊产业持续发展的方向。植物提取物安全有效,既能满足奶山羊产业发展的需求,又能避免传统药物饲料添加剂的弊端,是当前研究热点[2]。黄芪多糖(APS)是一种具有免疫调节功效的活性多糖,具有抗氧化、抗肿瘤、抗病毒和抗菌的作用[3]。黄芪多糖在动物生产中可以改善动物健康,提高生产性能,避免抗生素使用带来的残留问题[4]。目前,黄芪多糖在猪、禽和奶牛的养殖生产中应用较多,但关于黄芪多糖应用于奶山羊生产中的研究报道较少。本试验在奶山羊日粮中添加不同水平的黄芪多糖,研究其对奶山羊产奶性能和免疫性能的影响,为指导生产实践提供参考。1材料与方法1.1试验材料黄芪多糖为湖北中牧安达药业有限公司生产的黄芪多糖粉,黄芪多糖含量≥98%。1.2试验动物及设计本试验采用单因素试验设计,选择24只由西安市建仁种羊场提供的体重(57.36±2.25)kg、产奶量(2.24±0.15)kg/d、产羔2~3胎次、泌乳期90~130 d的健康关中奶山羊,将奶山羊随机分为4组,每组6只,每只为1个重复,分别为对照组、试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组。对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组在基础日粮的基础上分别添加50、100、150 mg/kg黄芪多糖粉。预试期7 d,正式试验期60 d。1.3试验日粮与饲养管理试验日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.11.002.T001表1基础日粮组成及营养水平(风干基础)原料组成含量/%营养水平合计100.00青贮玉米35.20消化能/(MJ/kg)12.43玉米24.50干物质/%87.50苜蓿青干草20.40粗蛋白质 /%11.86麦麸14.10钙/%0.97豆粕3.00磷/%0.63石粉0.80粗灰分/%4.21磷酸氢钙0.60中性洗涤纤维/%42.62食盐0.40酸性洗涤纤维/%25.47预混料1.00注:1.预混料为每千克日粮提供:VA 10 000 IU、VD 5 800 IU、VE 50 mg、Fe 45 mg、Cu 30 mg、Zn 95 mg、Mn 40 mg、I 1.5 mg、Se 0.3 mg、Co 0.5 mg。2.营养水平均为计算值。试验在陕西省西安市阎良区武屯镇建仁种羊场开展。试验开始前对试验羊的圈舍进行打扫消毒处理,并为每只试验羊打好耳标,注射疫苗并驱虫。每日分别在6:00、11:00和17:00饲喂,自由采食粗饲料,全天自由饮水。定期打扫圈舍,消毒通风,保持羊圈卫生良好,温度适宜。1.4测定指标及方法1.4.1产奶量试验期内每日准确记录每只羊的产奶量。每日6:00、18:00挤奶,2次相加即为每只奶羊的日产奶量。1.4.2乳成分本试验主要测定羊奶乳蛋白、乳脂肪、乳糖和非脂固形物等含量。第1、15、30、45、60 d用灭菌离心管采取奶样,7:00和17:00各1次(50 mL/次),放入4 ℃冰箱保存。取混合奶样50 mL,使用全自动奶样分析仪(FOSSMilkoScanTMFT-120,丹麦)对乳成分进行分析。1.4.3血清免疫指标正式试验期第60 d清晨,对各组山羊空腹进行颈静脉采血,每只羊采集15 mL血液,吸取血清,-20 ℃保存。使用迈瑞BS-450全自动生化仪检测奶山羊血清中总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)含量。血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量采用酶联免疫法,通过STAT FAX-210全自动酶标仪进行测定。试剂盒购自上海恒远生物科技有限公司。1.5数据统计与分析采用Microsoft Excel 2007对数据进行分类统计和初步处理,采用SPSS 22.0统计软件进行One-way ANOVA单因素方差分析,并采用LSD法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同黄芪多糖添加量对奶山羊产奶量的影响(见表2)由表2可知,奶山羊饲粮中添加黄芪多糖对奶山羊产奶量无显著影响(P0.05)。在4个试验阶段中,3个试验组奶山羊的产奶量高于对照组,但差异不显著(P0.05)。整个试验期试验Ⅱ组平均日产奶量最高,比对照组提高4.71%,试验Ⅰ组、试验Ⅲ组分别比对照组高2.94%和3.53%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.11.002.T002表2不同黄芪多糖添加量对奶山羊产奶量的影响项目第1~15 d第16~30 d第31~45 d第46~60 d平均值对照组1.72±0.111.71±0.111.68±0.111.67±0.111.70±0.11试验Ⅰ组1.74±0.111.75±0.141.76±0.131.76±0.141.75±0.13试验Ⅱ组1.75±0.121.77±0.131.79±0.131.80±0.131.78±0.13试验Ⅲ组1.74±0.121.73±0.121.80±0.121.77±0.121.76±0.12kg/d2.2不同黄芪多糖添加量对奶山羊乳品质的影响(见表3)由表3可知,各试验组不同时间采集的奶样中乳脂率和非脂固形物差异均不显著(P0.05)。第1、15、30 d,各组乳蛋白含量差异不显著(P0.05)。第45 d和第60 d,试验Ⅱ组和Ⅲ组乳蛋白含量显著高于对照组和试验Ⅰ组(P0.05),试验Ⅱ组、试验Ⅲ组之间差异不显著(P0.05)。整个试验期,试验Ⅱ组、试验Ⅲ组乳蛋白含量分别比对照组高4.48%和3.36%。第45 d,试验I、Ⅱ、Ⅲ组乳糖含量显著高于对照组(P0.05),但3组之间差异不显著(P0.05)。其他时间,各组之间乳糖含量差异不显著(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.11.002.T003表3不同黄芪多糖添加量对奶山羊乳品质的影响项目组别采样时间/d平均值115304560乳脂对照组3.24±0.093.19±0.113.22±0.103.18±0.103.24±0.153.21±0.10试验Ⅰ组3.31±0.103.26±0.113.33±0.103.22±0.133.31±0.123.29±0.11试验Ⅱ组3.34±0.113.30±0.113.27±0.143.29±0.103.35±0.143.31±0.11试验Ⅲ组3.27±0.103.30±0.083.31±0.103.28±0.133.30±0.113.29±0.10乳蛋白对照组2.72±0.082.67±0.092.68±0.102.64±0.09a2.67±0.10a2.68±0.09试验Ⅰ组2.67±0.092.68±0.102.70±0.102.68±0.12a2.71±0.10a2.69±0.10试验Ⅱ组2.76±0.082.77±0.092.77±0.092.84±0.09b2.87±0.10b2.80±0.09试验Ⅲ组2.73±0.082.73±0.082.75±0.082.82±0.10b2.84±0.11b2.77±0.08乳糖对照组4.12±0.124.08±0.144.10±0.124.06±0.14a4.08±0.134.09±0.13试验Ⅰ组4.15±0.114.11±0.114.16±0.134.22±0.12b4.11±0.104.15±0.11试验Ⅱ组4.06±0.144.08±0.144.03±0.134.31±0.09b4.20±0.134.14±0.10试验Ⅲ组4.02±0.113.98±0.104.07±0.124.24±0.11b4.16±0.114.09±0.11非脂固形物对照组8.06±0.167.97±0.197.87±0.148.01±0.178.04±0.207.99±0.15试验Ⅰ组8.18±0.168.12±0.177.99±0.198.11±0.208.13±0.208.11±0.17试验Ⅱ组8.04±0.188.07±0.198.02±0.208.16±0.248.19±0.198.10±0.18试验Ⅲ组8.13±0.178.18±0.208.07±0.198.21±0.198.17±0.248.15±0.19注:同列数据肩标字母相同或无字母表示差异不显著(P0.05),小写字母不同表示差异显著(P0.05),大写字母不同表示差异极显著(P0.01);下表同。%2.3不同黄芪多糖添加量对奶山羊血清蛋白含量的影响(见表4)由表4可知,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组奶山羊的血清总蛋白、白蛋白和球蛋白含量与对照组差异均不显著(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.11.002.T004表4不同黄芪多糖添加量对奶山羊血清蛋白含量的影响组别总蛋白白蛋白球蛋白对照组68.17±1.6226.51±2.2041.62±1.50试验Ⅰ组67.13±1.9025.48±0.9241.57±1.22试验Ⅱ组66.60±1.7324.87±1.2241.69±1.47试验Ⅲ组70.09±2.0326.26±1.2542.14±1.08g/L2.4不同黄芪多糖添加量对奶山羊血清免疫指标的影响(见表5)由表5可知,各试验组奶山羊IgA含量均高于对照组,其中试验Ⅱ组与对照组差异极显著(P0.01),比对照组提高14.05%,试验Ⅰ组、试验Ⅲ组显著高于对照组(P0.05),分别比对照组提高8.26%、9.92%。与对照组相比,各试验组IgG有升高的趋势,但各组之间差异不显著(P0.05)。各试验组IgM含量均高于对照组,其中试验Ⅱ组IgM显著高于对照组(P0.05),比对照组提高4.65%,各试验组间差异不显著(P0.05)。试验Ⅱ组IL-2含量显著高于其他各组(P0.05),比对照组提高5.07%。试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组IL-6含量分别比对照组提高1.32%、7.18%、4.50%,但各组之间差异不显著(P0.05)。与对照组相比,各试验组血清TNF-α含量无显著差异(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.11.002.T005表5不同黄芪多糖添加量对奶山羊血清免疫指标的影响组别IgA/(g/L)IgG/(g/L)IgM/(g/L)IL-2/(ng/L)IL-6/(ng/L)TNF-α/(ng/L)对照组1.21±0.08Aa12.88±0.382.58±0.08a175.78±6.78a132.50±8.35162.66±6.21试验Ⅰ组1.31±0.08ABb13.06±0.282.63±0.09ab173.31±5.54a134.25±6.64159.23±6.08试验Ⅱ组1.38±0.07Bb13.30±0.192.70±0.07b184.69±8.54b142.01±8.11165.81±9.00试验Ⅲ组1.33±0.10ABb13.21±0.472.67±0.11ab176.21±6.89a138.46±8.70162.89±7.733讨论3.1黄芪多糖对奶山羊产奶量的影响连慧香[5]研究嗜酸乳杆菌发酵的黄芪粉(主要成分为APS)对奶牛产奶量的影响,对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组在每头奶牛基础日粮中分别添加10、20和30 g/d的发酵黄芪粉,结果表明,与对照组相比,试验组奶牛每头产奶量增加0.95、1.45和1.58 kg/d,乳产量显著提高。曾涵芳等[6]研究表明,为奶牛肌肉注射30、50 mL/d APS注射液,与对照组相比,产奶量无显著差异。李占锋等[7]将黄芪组方制成粉剂添加在奶牛日粮中,添加剂量为200 g/d,产奶量在第5、6 w显著高于对照组。本试验中,在奶山羊饲料中添加50、100、150 mg/kg的APS对奶山羊的产奶量均无显著影响,与曾涵芳等[6]的研究结果一致,与连慧香等[5]和李占锋等[7]的研究结果不一致。原因可能是黄芪多糖对奶山羊和奶牛的产奶性能的作用效果有区别,也可能因为本试验选用奶山羊均处于泌乳中期,APS对产奶量的作用效果并不显著,或添加剂量不能够对其产奶性能产生影响,具体机制还需进一步研究。3.2黄芪多糖对奶山羊乳成分的影响奶畜常规乳成分包括乳糖、乳脂、乳蛋白和非脂固形物等,是衡量乳品质的重要指标。连慧香[5]研究表明,APS可以显著提高奶牛乳蛋白率,但对奶牛乳脂率、乳糖及非脂固型物含量均无显著影响。曾涵芳等[6]发现,注射APS可使牛奶中的乳蛋白率和乳脂率得到提高。李占锋等[7]试验表明,试验组奶牛的乳脂率、乳蛋白与对照组相比分别提高0.27%和0.93%,乳糖和非脂乳固体与对照组相比分别提高0.44%和3.29%,但是差异均不显著。本试验中,试验组第45 d和第60 d乳蛋白率显著提高,表明饲粮中添加黄芪多糖能在一定程度上提升羊奶中乳蛋白含量,与上述研究结果一致。试验第45 d,试验组羊乳中乳糖含量显著高于对照组,其他时间乳糖含量差异不显著,与上述研究结果有所差别。原因可能是黄芪多糖对奶牛和奶山羊的作用效果有差异,还与试验期间奶山羊机体状态和日粮品种质量等因素有关。3.3黄芪多糖对奶山羊血清蛋白含量的影响王志龙等[8]在哺乳母猪基础饲粮中添加200 mg/kg APS,发现血清中TP和ALB含量显著提高。徐端红等[9]研究发现,饲粮中添加APS可提高羔羊血清TP、ALB含量。赵天章等[10]研究发现,在獭兔基础饲粮中添加400、800 mg/kg的APS可以极显著提高其血清中TP的含量,添加800、1 600 mg/kg的APS可以极显著提高ALB含量,降低GLB含量。钟伟等[11]在4组冬毛期银黑狐饲粮中分别添加0、100、200和300 mg/kg APS,结果表明,各添加量的APS对血清中TP、ALB、GLB含量及白球比均无显著影响。本研究中,试验组奶山羊血清总蛋白、白蛋白和球蛋白含量与对照组差异均不显著,与以上结论不完全相同。原因可能是奶山羊机体对蛋白质的代谢速率较快,转化为体蛋白或乳蛋白,使血液沉积蛋白含量无显著差异。3.4黄芪多糖对奶山羊血清免疫指标的影响APS可以促进动物体内免疫分子分泌,提高免疫分子活性。其中IgG、IgA、IgM、IL-2、IL-6和TNF-α等免疫球蛋白和细胞因子的含量可以反映动物机体的健康状况和免疫力水平。李莉[12]研究表明,在饲粮中添加APS可以显著提高小尾寒羊血清中IgA、IgG、IgM含量。李楠等[13]研究表明,APS可使獭兔血清中免疫球蛋白含量增加,其中添加0.15%、0.20%的APS对IgM、IgA含量增加效果显著,但对IgG含量无影响。鲍玉林等[14]试验表明,在舍饲藏羊基础日粮中添加0.1% APS可以显著提高藏羊的IgG、IgA、IgM和IL-2含量。冯会利等[15]研究不同水平的APS对断奶羔羊免疫指标的影响,结果表明,在断奶羔羊日粮中添加0.2、0.4 g/kg的APS可以显著提高血清中IgA和IgG含量,降低TNF-α含量。钟伟等[11]研究表明,在冬毛期银黑狐饲粮中添加200 mg/kg APS可使血清中IL-2含量极显著高于对照组,但是对IgG、IgA、IgM和TNF-α含量均无显著影响。本研究结果表明,3个试验组奶山羊血清中IgA含量显著提高,100 mg/kg APS组的IgM和IL-2含量显著高于对照组。本试验结果与以上研究结果有所差异,可能因为动物体内各免疫指标的含量变化会受到多种因素的影响,如物种差别、饲粮营养成分和机体健康状况等。4结论日粮中添加黄芪多糖可以改善奶山羊乳品质,提高奶山羊免疫性能。综合试验结果及成本因素,以添加量为100 mg/kg较为适宜。
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