大枣多糖（jujube polysaccharide，JP）是大枣中重要的天然活性成分。新鲜大枣中的可溶性多糖含量约为30%~40%。研究表明，大枣多糖能刺激免疫功能，提高抗氧化活性[1]。大枣多糖对DPPH、羟基自由基和超氧阴离子均有清除作用，并在一定浓度范围内呈正相关趋势。大枣多糖可以促进免疫抑制小鼠脾细胞产生白细胞介素和血清可溶性白细胞介素，促进免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞产生白介素（IL）－1及脾细胞增殖。是一种典型中医治疗药物慢性疲劳综合征（chronic fatigue syndrome，CFS）的药物[2]。有关大枣多糖对肉仔鸡免疫机能调节作用报道较少，免疫调节作用机理并不清楚。因此，本试验研究大枣多糖对肉仔鸡淋巴细胞、新城疫抗体效价（NDV-Ab）、生长性能、屠宰性能和免疫器官指数的影响，为大枣多糖的开发应用和进一步阐明其免疫调节作用机理提供参考。1材料与方法1.1试验材料1.1.1试验动物1日龄爱维因肉鸡雏，由锦州鸿强牧业有限公司提供。1.1.2基础日粮组成及营养水平（见表1）雏鸡日粮由大成农技（葫芦岛）有限公司生产。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.11.001.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.0玉米57.2代谢能/(MJ/kg)12.19豆粕30.5粗蛋白/%20.00鱼粉4.0水分/%14.00棉籽粕3.0粗灰分/%8.00豆油1.7粗纤维/%6.00碳酸氢钙1.2赖氨酸/%1.00石粉1.1总磷/%0.55氯化钠0.3蛋氨酸/%0.42~0.89预混料1.0钙/%0.06~1.20注：预混料为每千克基础日粮提供：VA 12 000 IU、VD 32 500 IU、VE 20 mg、VK 33 mg、VB1 3 mg、VB2 8 mg、VB6 7 mg、VB12 0.03 mg、泛酸20 mg、烟酸50 mg、生物素0.1 mg、叶酸1.5 mg、氯化胆碱300 mg、铜9 mg、锌110 mg、铁100 mg、锰100 mg、硒0.16 mg、碘0.6 mg。1.1.3药品及试剂大枣多糖购自晨光生物技术有限公司，纯度≥90%；盐酸左旋咪唑、甲基噻唑蓝（MTT）、台盼蓝（Trypan Blue）、鸡外周血淋巴细胞分离液试剂盒、二甲基亚砜（DMSO），购自北京索莱宝科技有限公司；胎牛血清购自浙江天杭生物科技有限公司产品；鸡新城疫抗体活疫苗（La Sota）、血凝抑制稀释液、新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV），购自辽宁益康生物股份有限公司。1.2试验设计与饲养管理试验选用1日龄肉鸡雏300只，分成5组，每组3个重复，每个重复20只肉雏鸡。设KB组、YX组、1DT组、2DT组和4DT组。KB组肉鸡饲喂基础日粮，YX组在基础日粮中添加0.2 g/kg盐酸左旋咪唑，1DT组、2DT组和4DT组在基础日粮中分别添加1、2、4 g/kg大枣多糖。试验肉鸡网上饲养，自由饮水和采食，试验周期42 d。雏鸡7日龄时采用滴鼻点眼方法接种新城疫疫苗Ⅳ系（Lasota株），21日龄时采用新城疫疫苗Ⅳ系（Lasota株）饮水免疫[3]。1.3测定指标及方法1.3.1鸡新城疫抗体效价参考鲁卫红[4]、石蓉[5]方法，于14日龄和28日龄，采用血凝抑制试验方法（HI）对肉仔鸡血清中新城疫抗体效价进行测定。1.3.2淋巴细胞悬液制备42日龄时，每组随机抽取3只鸡，翅下静脉无菌采取肝素抗凝血2 mL[6-7]，加等量全血组织稀释液，参考刘素贞等[8]试验方法，配置淋巴细胞悬液。取90 µL加10 µL台盼蓝（Trypan Blue），注入玻片计数板上，利用倒置显微镜观察细胞活力至95%以上并用含10%血清的RPMI 1640培养液调整细胞浓度为5×106 个/mL。1.3.3外周血淋巴细胞转化率根据蔡文涛[9]试验方法，每个样品重复5个复孔，进行MTT试验。1.3.4生长性能试验期间记录每只鸡体重、增重，每组采食量。计算平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）计算平均日增重=(末重-初重)/天数(1)平均日采食量=总采食量/天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.3.5屠宰性能和免疫器官指数参考王明武等[10]、席鹏彬等[11]方法，于42日龄禁食12 h，每组随机选择3只肉鸡宰杀，计算屠宰率、半净膛率、全净膛率、胸肌率、腿肌率、腹脂率、胸腺指数、脾脏指数和法氏囊指数。1.4数据统计与分析数据采用SPSS 22.0进行单因素方差分析，结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1大枣多糖对肉鸡新城疫抗体效价的影响（见表2）由表2可知，14和28日龄时，与KB组相比，YX组、1DT组和2DT组新城疫抗体效价极显著提高（P0.01）。YX组新城疫抗体效价显著高于1DT组（P0.05），极显著高于4DT组（P0.01），与2DT组差异不显著（P0.05）。2DT组新城疫抗体效价显著高于4DT组（P0.05），与1DT组差异不显著（P0.05）。结果显示，大枣多糖能够有效提高鸡新城疫抗体效价，2DT组效果最佳。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.11.001.T002表2大枣多糖对肉鸡新城疫抗体效价的影响组别14日龄28日龄KB组6.33±0.47Bb6.33±0.47BbYX组8.33±0.47Aa8.67±0.47Aa1DT组7.33±0.47Ab7.67±0.47Ab2DT组8.00±0Aa8.33±0.47Aa4DT组7.00±0Bb7.00±0Bb注：同列数据肩标大写字母不同表示差异极显著（P0.01），小写字母不同表示差异显著（P0.05），字母相同或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2大枣多糖对肉鸡外周血淋巴细胞增殖的影响（见表3）由表3可知，YX组、1DT组、2DT组和4DT组肉鸡血淋巴细胞增殖均极显著（P0.01）高于KB组。YX组肉鸡血淋巴细胞增殖显著（P0.05）高于1DT组、4DT组，与2DT组相比差异不显著（P0.05）。1DT组和4DT组肉鸡血淋巴细胞增殖差异均不显著（P0.05）。试验表明，大枣多糖能增强肉鸡外周血淋巴细胞的增殖，2DT组效果最佳。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.11.001.T003表3大枣多糖对肉鸡外周血淋巴细胞增殖的影响组别刺激指数KB组1.00±0BcYX组4.22±0.87Aa1DT组3.13±0.71Ab2DT组4.03±0.89Aa4DT组3.11±0.70Ab2.3大枣多糖对肉鸡生长性能的影响（见表4）由表4可知，YX组、1DT组和2DT组肉鸡平均日增重均极显著高于KB组（P0.01）。YX组和2DT组肉鸡平均日增重极显著高于1DT组和4DT组（P0.01）。1DT组肉鸡平均日增重显著高于4DT组（P0.05）。2DT组肉鸡平均日采食量极显著低其他各组（P0.01），其余组间差异均不显著（P0.05）。YX组、1DT组和2DT组肉鸡料重比极显著低于KB组（P0.01），4DT组料重比显著低于KB组（P0.05）。YX组肉鸡料重比极显著低于1DT组、2DT组和4DT组（P0.01）。2DT组肉鸡料重比显著低于1DT组（P0.05），极显著低于4DT组（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.11.001.T004表4大枣多糖对肉鸡生长性能的影响组别平均日增重/g平均日采食量/g料重比初重/g末重/gKB组49.28±1.86Cc94.78±1.64Aa1.93±0.10Aa42.03±4.09Aa2 112.00±75.53CcYX组66.14±3.18Aa93.02±0.31Aa1.41±0.07Cd40.57±1.03Aa2 818.30±132.94Aa1DT组58.08±2.12Bb92.76±0.48Aa1.60±0.05Bc40.48±2.48Aa2 480.00±86.41Bb2DT组62.88±2.28Aa90.90±1.51Bb1.45±0.06Bd42.45±3.19Aa2 683.30±94.19Aa4DT组52.79±0.71Bc93.45±0.46Aa1.77±0.03Ab39.54±3.58Aa2 256.70±33.00Bc试验表明，大枣多糖能够提高平均日增重和平均日采食量，降低料重比，2DT组效果最佳。2.4大枣多糖对肉鸡屠宰性能和免疫器官指数影响（见表5）由表5可知，YX组和2DT组肉鸡的屠宰率、腿肌率显著高于KB组（P0.05）。YX组、1DT组和2DT组肉鸡的半净膛率极显著高于KB组和4DT组（P0.01）。YX组、1DT组、2DT组、4DT组肉鸡的全净膛率极显著高于KB组（P0.01）。2DT组胸肌率显著高于KB组（P0.05）。YX组、1DT组、2DT组和4DT组脾脏指数均极显著高于KB组（P0.01）。1DT组和2DT组法氏囊指数极显著高于KB组（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.11.001.T005表5枣多糖对肉鸡屠宰性能和免疫器官指数影响组别屠宰率/%半净膛率/%全净膛率/%胸肌率/%腿肌率/%腹脂率/%胸腺指数脾脏指数法氏囊指数KB组89.62±1.64Ab82.08±0.33Bb64.61±1.00Bb19.06±1.05Ab12.13±0.80Ab1.39±0.061.78±0.05Aa1.26±0.02Bb1.46±0.10BbYX组92.38±1.29Aa86.07±0.55Aa68.33±0.47Aa21.32±0.41Aa13.90±0.84Aa1.42±0.032.03±0.39Aa1.59±0.08Aa1.68±0.02Aa1DT组91.22±0.32Aa84.81±1.37Aa66.98±1.11Aa20.81±1.36Aa13.07±0.89Aa1.31±0.082.17±0.04Aa1.62±0.08Aa1.80±0.09Aa2DT组92.23±0.59Aa85.80±0.57Aa67.99±1.51Aa21.60±0.41Aa14.00±0.17Aa1.29±0.052.30±0.05Aa1.64±0.05Aa1.81±0.16Aa4DT组90.54±0.44Aa83.15±0.53Bb66.61±0.44Aa20.21±1.59Aa13.24±0.90Aa1.34±0.072.07±0.33Aa1.58±0.09Aa1.64±0.06Aa试验表明，大枣多糖能够提高屠宰性能及免疫功能，2DT组效果最佳。3讨论3.1大枣多糖对肉鸡新城疫抗体效价的影响孔华等[12]试验结果表明，100 mg/kg的蝉花虫草粗多糖和新城疫弱毒苗反应可维持较高水平鸡群新城疫抗体。使用鸡新城疫灭活苗免疫60日龄左右的鸡群，发现50 mg/kg蝉花虫草粗多糖能够提高新城疫抗体水平。本试验中，大枣多糖能够激活B淋巴细胞促进抗体产生，极显著提高鸡新城疫抗体效价，与上述报道结果具有高度一致性，且以2DT组为最佳。3.2大枣多糖对肉鸡外周血淋巴细胞增殖的影响大量淋巴细胞组成的脾脏是机体重要的外周淋巴器官，大枣多糖通过提高肉仔鸡淋巴细胞增值率产生效应淋巴细胞清除非己抗原，提高机体免疫功能。李凤娇等[13]试验表明，20~320 mg/L大枣多糖可以促进小鼠体外淋巴细胞增殖，160 mg/L大枣多糖促进效果最佳。本研究表明，大枣多糖可以激活T淋巴细胞，极显著刺激鸡外周血淋巴细胞增值，以2DT组为最佳，与上述报道结果一致。3.3大枣多糖对肉鸡生长性能、屠宰性能及免疫器官指数的影响屠宰性是衡量鸡肉品质的重要指标。胸腺、法式囊和脾脏是机体的体液免疫和细胞免疫过程中重要的免疫器官。动物的中枢免疫器官的发育状态，直接决定着动物体免疫水平。林厦菁等[14]研究显示，高营养水平饲粮可以提高中速型岭南黄羽肉鸡公鸡和母鸡的平均日增重和平均日采食量，降低料重比。孙波等[15]研究结果显示，500 mg/kg黄芪多糖能够显著提高肉鸡半净膛率和胸肌率，1 000 mg/kg黄芪多糖能够显著提高肉鸡屠宰率、半净膛率、胸肌率和腿肌率。李忠浩等[16]研究发现，功能性寡糖能够极显著提高肉仔鸡免疫器官指数。本研究表明，大枣多糖可以激活T淋巴细胞，使免疫器官指数增大，提高机体免疫力，改善生长性能和屠宰性能，以2DT组最佳，与上述报道结果相似。4结论本试验结果表明，大枣多糖对鸡外周血淋巴细胞增殖有促进作用，对鸡新城疫抗体效价及生长性能、屠宰性能和免疫器官指数均有提高作用。添加大枣多糖2 g/kg浓度时效果最好。