象草可以作为调制青贮饲料原料，解决季节性粗饲料不足问题[1]。2019年，我国甘蔗种植面积达139.1万hm2，总产量达10 938.8万t[2]。甘蔗梢是甘蔗收获后的主要副产物，产量巨大、含糖量高、适口性好[3-5]。甘蔗梢作为粗饲料具有较高的营养价值[6-10]。青贮是甘蔗梢有效的存贮方式[11-12]。青贮饲料可以改善饲草适口性，增加动物采食量[13]。水分含量高和可溶性碳水化合物（WSC）低的牧草单独青贮品质不佳，混合青贮能够提高WSC含量、抑制不良发酵和提高青贮发酵品质[14-15]。宋鸽等[16]报道，与稻草青贮相比，稻草和甘蔗梢混合青贮的pH值、氨态氮（NH3-N）、中性洗涤纤维（NDF）和半纤维素含量均降低。廖惠珍等[17]发现，随甘蔗梢比率升高，青贮饲料干物质回收率和乳酸含量极显著增加，pH值、乙酸和NH3-N含量极显著降低，甘蔗梢可以显著改善水葫芦青贮品质。Chen等[18]发现，增加甘蔗梢比例可以提高葛藤甘蔗梢混合青贮品质。不同混合比例对象草和甘蔗梢混合青贮发酵的影响未见报道。本试验分析不同混合比例对象草和甘蔗梢青贮饲料品质及体外干物质消化率的影响，为调制优质象草青贮及高效利用甘蔗梢提供参考。1材料与方法1.1试验材料试验象草和甘蔗梢分别取自广西水牛研究所牧草种植基地和广西南宁市横县甘蔗种植地。将两种混贮原料铡短至约2 cm，备用。青贮前象草和甘蔗梢的营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.12.022.T001表1青贮前象草和甘蔗梢的营养水平项目干物质/%粗蛋白/(% DM)有机物/(% DM)中性洗涤纤维/(% DM)酸性洗涤纤维/(% DM)象草13.7611.0586.6169.4235.17甘蔗梢24.877.3292.3473.2242.551.2试验设计采用小规模发酵法，设置5个组，每组5个重复。按象草和甘蔗鲜重比为100∶0、75∶25、50∶50、25∶75和0∶100（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组）称样、混合均匀，装入聚乙烯薄膜袋中，每袋500 g，使用真空包装机密封，避光置于常温下发酵45 d，开封取样分析。1.3测定指标及方法1.3.1发酵品质开封后每袋准确称取20 g样品，放入250 mL广口瓶，加180 mL蒸馏水，使用封口膜将瓶盖密封，4 ℃冰箱浸提24 h，2层纱布进行过滤，过滤后的青贮浸提液用于pH值及有机酸（乳酸、乙酸、丙酸及丁酸）含量的测定。采用便携式pH值计测定样品pH值。浸提液经2 000 r/min离心5 min，0.45 μm滤膜过滤，利用Agilent 1260高效液相色谱（色谱柱KC-811，检测器SPD-M10AVP，柱温50 ℃、流速1 mL/min、检测波长210 nm、进样量5 μL）测定有机酸含量[19]。采用苯酚-次氯酸钠比色法测定NH3-N含量[20]。1.3.2营养成分开封后每袋称取样品200 g，干燥箱65 ℃干燥至恒重，记录重量后粉碎，测定结合水含量，计算样品的干物质（DM）含量；粗蛋白质（CP）含量采用凯氏定氮法测定；有机物（OM）含量采用AOAC中的920.39方法测定[21]；NDF和酸性洗涤纤维（ADF）含量采用Van Soest的方法测定[22]。1.3.3体外发酵特性试验瘤胃液供体为广西水牛研究所种畜场、体重（650±50）kg、安装永久瘘管的3头母水牛。日粮为广西水牛研究所的日常饲料配方，每天饲喂两次（8：00和15：00），自由饮水。晨饲前取瘤胃液于保温瓶中，迅速带回实验室，等体积混合，4层纱布过滤至预热处理过的收集瓶，通CO2维持厌氧环境。将参照McDougll's方法配制的缓冲液（pH值6.80）与瘤胃液按体积比4∶1混合均匀[23]，制成培养液，取50 mL培养液注入含0.5 g样品的培养瓶内，通入CO2排出空气且保持厌氧环境，立即盖上胶塞和铝盖，使用专用封口钳压紧，39 ℃恒温振荡（100 r/min），培养48 h后测定产气量、pH值、挥发性脂肪酸（VFA）和体外干物质消化率，VFA含量利用气相色谱（Agilent 7890A）测定。1.4数据统计与分析数据采用Excel软件整理，采用SAS 9.2统计软件进行单因素方差分析，并用Tukey法对数据进行多重比较，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同混合比例对象草与甘蔗梢混合青贮发酵品质的影响（见表2）由表2可知，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组青贮的pH值显著低于Ⅰ组（P0.05），Ⅳ和Ⅴ组pH值显著低于Ⅱ和Ⅲ组（P0.05）。Ⅳ和Ⅴ组青贮的乳酸含量显著高于其他各组（P0.05）。Ⅴ组青贮的乙酸含量显著低于其他各组（P0.05）。各组青贮均未检测到丙酸。在象草与甘蔗梢混贮饲料中加入一定比例的甘蔗梢后未检测到丁酸。Ⅰ组青贮的NH3-N含量显著高于其他各组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.12.022.T002表2不同混合比例对象草与甘蔗梢混合青贮发酵品质的影响项目pH值乳酸/(g/kg DM)乙酸/(g/kg DM)丙酸/(g/kg DM)丁酸/(g/kg DM)NH3-N/(g/kg DM)Ⅰ组5.33a5.49c21.09aND11.663.46aⅡ组5.14b10.65c17.33aNDND2.79bⅢ组4.62c31.94b16.79aNDND2.23cⅣ组4.25d38.58a16.38aNDND1.93dⅤ组4.09d42.00a11.55bNDND1.61eSEM0.1861.7091.5180.0000.2500.077P值0.0010.0010.0110.0000.0010.001注：1.同列数据肩标字母不同表示差异显著（P0.05），字母相同或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.ND表示未检测到结果。2.2不同混合比例对象草与甘蔗梢混合青贮营养成分的影响（见表3）由表3可知，随着甘蔗梢比例增加，各组青贮的DM含量显著增加（P0.05），各组CP含量显著降低（P0.05）。Ⅳ和Ⅴ组青贮的OM含量显著高于其他各组（P0.05），Ⅴ组青贮的NDF含量显著高于Ⅰ组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.12.022.T003表3不同混合比例对象草与甘蔗梢混合青贮营养成分的影响项目DM/%CP/(% DM)OM/(% DM)NDF/(% DM)ADF/(% DM)Ⅰ组12.06e8.82a85.18d65.12b31.90Ⅱ组15.06d8.24b86.91c65.44ab34.13Ⅲ组17.31c8.20b90.45b66.10ab37.44Ⅳ组20.04b7.75c91.54a67.77ab37.48Ⅴ组21.36a6.61d91.60a68.06a37.92SEM0.2520.1300.1110.8442.208P值0.0010.0010.0010.0720.2582.3不同混合比例对象草与甘蔗梢混合青贮体外发酵参数的影响（见表4）由表4可知，Ⅳ组青贮的产气量显著高于其他各组（P0.05），Ⅲ组青贮的产气量显著高于Ⅰ和Ⅴ组（P0.05）。Ⅰ和Ⅱ组青贮的pH值显著低于其他各组（P0.05）。Ⅱ、Ⅲ和Ⅴ组青贮的总VFA含量显著高于Ⅰ组（P0.05）。Ⅱ、Ⅲ和Ⅴ组青贮的乙酸含量显著高于Ⅰ组（P0.05）。Ⅱ和Ⅲ组青贮的丙酸含量显著高于Ⅰ组（P0.05）。Ⅱ和Ⅲ组青贮的丁酸含量显著高于Ⅰ组（P0.05）。Ⅴ组青贮的NH3-N含量显著低于Ⅲ组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.12.022.T004表4不同混合比例对象草与甘蔗梢混合青贮体外发酵参数的影响项目体外干物质消化率/%产气量/(mL/g)pH值总VFA/(mmol/L)乙酸/(mmol/L)丙酸/(mmol/L)丁酸/(mmol/L)NH3-N/(mg/L)Ⅰ组38.1927.55cd6.88d16.58b8.30c6.08b2.20b103.84abⅡ组39.7233.66bc6.96c21.74a11.75a7.16a2.83a110.60abⅢ组41.1136.52b7.11a21.25a11.20ab7.17a2.88a112.17aⅣ组42.1546.54a7.03b19.12ab9.71bc6.78ab2.62ab101.53abⅤ组40.8023.46d7.09ab20.28a11.07ab6.76ab2.45ab97.07bSEM2.0382.5440.0190.8990.5060.2760.1484.545P值0.7050.0010.0010.0090.0020.0970.0430.1463讨论3.1不同混合比例对象草与甘蔗梢混合青贮发酵品质的影响混合青贮可以使原料间养分互补，饲料营养更加均衡[24]。足够的乳酸能够降低青贮饲料pH值，获得较高青贮品质。调制青贮饲料时，应保证乳酸菌快速、大量生长繁殖。可溶性糖分可以使乳酸菌快速生长和繁殖[25-26]。混合青贮时可以混合可溶性碳水化合物含量较高的饲草来提高青贮品质。本试验中，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组青贮的pH值显著低于Ⅰ组；Ⅳ和Ⅴ组青贮的乳酸含量显著高于其他各组；Ⅴ组青贮的乙酸含量显著低于其他各组；加入一定比例的甘蔗梢后未检测到丁酸；Ⅰ组青贮的NH3-N含量显著高于其他各组。结果表明，随着甘蔗梢比例升高，混贮料的pH值、乙酸和NH3-N含量呈降低趋势、乳酸呈升高趋势，可能因为调制混合比例的象草与甘蔗梢混合青贮时，提高甘蔗梢比例增加可溶性糖分的含量，为乳酸菌生长繁殖提供有利条件，促进乳酸发酵，降低pH值，抑制有害微生物的生长，降低其他杂菌对发酵饲料养分的消耗，提高象草甘蔗梢混合青贮的发酵品质[18,27-28]。3.2不同混合比例对象草与甘蔗梢混合青贮营养成分的影响宋鸽等[16]研究发现，与稻草青贮相比，稻草和甘蔗梢混合青贮的pH值、NH3-N、NDF和半纤维素均降低，干物质回收率和WSC均显著升高。许兰娇等[29]研究发现，混合青贮饲料的营养价值随象草比例增加而显著提高，苎麻和象草以2∶8混合青贮时，NDF、ADF和NH3-N/TN含量较低，CP和乳酸含量较高。陈鑫珠等[30]研究葛藤和甘蔗梢不同比例混合对青贮品质的影响，发现随着甘蔗梢比例升高，青贮料的DM、pH值、NH3-N、乙酸和丙酸含量下降，NDF、ADF和半纤维素含量升高。本试验中，随着甘蔗梢比例增多，混贮料的DM、OM、NDF和ADF含量呈现上升趋势，说明甘蔗梢比例增多可以在一定程度上提升混合青贮饲料的营养价值。3.3不同混合比例对象草与甘蔗梢混合青贮体外发酵参数的影响动物对饲料营养物质消化率越高，该饲料提供的可消化营养物质越多，营养价值越高[31]。体外干物质消化率可以体现发酵体系中瘤胃微生物对饲料的降解程度，体外发酵产气的底物主要是WCS，可以反映瘤胃微生物利用底物情况，体现饲料营养价值[32-33]。本试验中，混贮料的体外干物质消化率、体外产气量随着甘蔗梢比例增多而提高，其中最高的为Ⅳ组，可见象草与甘蔗梢比例为25∶75时混合青贮发酵品质和营养价值最好。pH值是评价瘤胃发酵状况最重要的指标之一。pH值正常是动物摄取的日粮能够在瘤胃中降解利用的前提。吴征敏等[34]研究发现，象草与皇竹草组合后pH值和NH3-N含量均在正常范围内，说明象草与皇竹草组合在体外瘤胃中可正常发酵。本试验中，各组体外培养瘤胃pH值变化均维持在正常范围内（5.5~7.5），表明象草与甘蔗梢混合青贮饲料在体外瘤胃发酵水平良好。饲料中碳水化合物经瘤胃微生物降解发酵后形成VFA（主要包括乙酸、丙酸和丁酸等）、CO2、CH4等产物[35]。VFA可以为动物提供能源物质，参与各种代谢活动，反映瘤胃发酵水平[36]。本试验中，Ⅱ、Ⅲ和Ⅴ组总VFA和乙酸显著高于Ⅰ组，Ⅱ和Ⅲ组的丙酸和丁酸含量显著高于Ⅰ组，原因可能是在象草中加入一定比例甘蔗梢可以提高青贮饲料发酵品质和营养价值。4结论本试验条件下，调制象草甘蔗梢混合青贮可以改善象草青贮品质，提升营养价值和体外干物质消化率。象草和甘蔗鲜重比25∶75混合发酵效果最优。