仔猪断奶后消化道形态结构和免疫机能发生退行性变化，消化酶活性降低，肠道微生物区系紊乱，营养物质消化吸收不良，生长发育缓慢、抗病力下降、发病率升高，严重影响养猪的经济效益[1]。研究表明，微生物添加剂对断奶仔猪具有良好的效果，可以提高生长发育速度和健康水平[2-4]。本试验研究不同微生物添加剂对断奶仔猪生长性能、血清生化指标及免疫力的影响，为复合微生物添加剂在猪生产的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料复合微生物添加剂A由酿酒酵母、地衣芽孢杆菌、乳酸片球菌按照1∶1∶1比例混合组成，活菌总数≥1.0×1010 CFU/g；复合微生物添加剂B由植物乳杆菌、双歧杆菌、屎肠球菌按照1∶1∶1比例混合组成，活菌总数≥9.0×109 CFU/g。试验用菌购自济南金雨源生物技术有限公司。1.2试验设计试验在平凉市崆峒区泰丰养猪场进行，选择体重相近的断奶仔猪120头，随机平均分为5组（每组设置3个重复，8头仔猪为1个重复）。对照组仔猪饲喂基础日粮，试验1组在基础日粮中添加0.5%复合微生物添加剂A，试验2组在基础日粮中添加1.0%复合微生物添加剂A，试验3组在基础日粮中添加0.5%复合微生物添加剂B，试验4组在基础日粮中添加1.0%复合微生物添加剂B。基础日粮组成及营养水平见表1。预试期5 d，正式试验期30 d。每天饲喂2次，自由采食，自由饮水。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.13.010.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米62.00消化能/(MJ/kg)14.11豆粕26.00粗蛋白/%19.04鱼粉2.50赖氨酸/%1.23乳清粉2.50（蛋+胱）氨酸/%0.67豆油2.00钙/%0.62磷酸氢钙0.80总磷/%0.55石粉0.50有效磷0.41食盐0.30预混料3.40注：预混料购自帝斯曼维生素（湖南）有限公司。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能分别在试验前、试验第30 d对每组猪空腹称重，参照赵峰等[5]的方法计算日均采食量、日均增重、料重比和腹泻率。1.3.2血清生化指标试验第30 d，每组随机挑选6头仔猪进行采血，2 500 r/min离心8 min。分离的血清送至甘肃医学院附属医院进行生化指标（总蛋白、白蛋白、球蛋白、尿素氮、葡萄糖、碱性磷酸酶）测定。1.3.3免疫指标血清中免疫球蛋白（IgA、IgG和IgM）含量均采用江莱生物科技有限公司试剂盒测定。1.4数据统计与分析数据采用SPSS 19.0软件和Duncan氏法进行差异显著性分析，结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1复合微生物添加剂对断奶仔猪生长性能的影响（见表2）由表2可知，试验前各组断奶仔猪初重基本接近，试验后各试验组断奶仔猪的末重、日均采食量、日均增重与对照组相比均呈升高趋势，而料重比和腹泻率均呈现降低趋势。试验2、3和4组平均日增重显著高于对照组（P0.05）；与对照组相比，试验3组和4组腹泻率显著下降（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.13.010.T002表2复合微生物添加剂对断奶仔猪生长性能的影响组别初重/kg末重/kg日均采食量/(g/d)日均增重/(g/d)料重比腹泻率/%对照组8.53±0.6418.13±0.79593.72±27.96319.97±20.04b1.86±0.097.68±0.89a试验1组8.50±0.3918.55±0.63605.64±18.79335.01±17.07b1.81±0.156.45±0.27a试验2组8.47±0.6118.76±1.05610.79±31.45343.14±14.98a1.78±0.115.23±0.48a试验3组8.55±0.4719.15±1.17614.95±36.32353.42±22.93a1.74±0.074.31±0.22b试验4组8.43±0.7319.17±0.92620.10±23.04357.88±20.87a1.73±0.163.77±0.49b注：同列数据肩标字母不同表示差异显著（P0.05），字母相同或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2复合微生物添加剂对断奶仔猪血清生化指标的影响（见表3）由表3可知，各试验组断奶仔猪血清中总蛋白、白蛋白、球蛋白、葡萄糖含量和碱性磷酸酶活性比对照组表现出不同程度的提高，尿素氮含量逐渐下降。试验3、4组断奶仔猪血清白蛋白和球蛋白含量显著高于对照组（P0.05）；与对照组相比，试验3、4组断奶仔猪血清尿素氮含量显著降低（P0.05）。试验2、3、4组断奶仔猪血清葡萄糖含量和碱性磷酸酶活性显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.13.010.T003表3复合微生物添加剂对断奶仔猪血清生化指标的影响组别总蛋白/(g/L)白蛋白/(g/L)球蛋白/(g/L)尿素氮/(mmol/L)葡萄糖/(mmol/L)碱性磷酸酶/(U/L)对照组50.19±3.7025.60±2.83b21.46±2.14b5.91±0.89a4.29±0.44b197.96±22.47b试验1组51.43±3.7626.72±2.25b22.16±3.60b5.74±0.65a4.50±0.48b209.38±16.62b试验2组52.24±2.8327.19±1.99b22.37±2.91b5.56±0.72a4.61±0.42a215.36±15.80a试验3组52.78±4.0227.43±2.54a23.01±2.96a5.39±0.75b4.74±0.30a221.81±26.63a试验4组53.12±4.7728.05±3.20a23.34±4.78a5.28±0.61b4.87±0.49a229.26±24.64a2.3复合微生物添加剂对断奶仔猪免疫功能的影响（见表4）由表4可知，试验结束后各试验组断奶仔猪血清中IgA、IgG和IgM水平均呈现上升趋势。试验2、3、4组断奶仔猪血清中IgA和IgG含量显著高于对照组（P0.05）；试验3组和试验4组断奶仔猪血清中IgM含量显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.13.010.T004表4复合微生物添加剂对断奶仔猪免疫功能的影响组别IgAIgGIgM对照组1.05±0.08b8.75±0.56b1.09±0.12b试验1组1.13±0.10b9.51±0.50b1.14±0.20b试验2组1.26±0.09a9.85±0.69a1.16±0.12b试验3组1.35±0.11a10.23±0.44a1.21±0.11a试验4组1.46±0.11a10.45±0.52a1.25±0.10ag/L3讨论3.1复合微生物添加剂对断奶仔猪生长性能的影响仔猪断奶后引起的应激不良反应，对仔猪生长发育和健康不利。研究发现，酿酒酵母能够促进猪小肠发育，改善肠道形态结构和营养物质消化吸收[6-7]；地衣芽孢杆菌能够提高仔猪消化酶活性[8]，促进肠道微生物平衡[9]。乳酸菌对肠道微生态平衡和日粮营养代谢有益[10]。植物乳杆菌具有维持肠道健康和微生物区系稳定的功能，提高饲料消化率[11-12]。双歧杆菌可以调节肠道生理，对仔猪生长性能有积极影响[13]。屎肠球菌能减少氧化应激，维护肠道黏膜屏障[14]，遏制致病微生物生长，提高养分消化率[15]。孙占田等[16]在断奶仔猪基础日粮中添加复合益生素，生长性能明显高于对照组、腹泻率明显低于对照组。王杰等[17]添加复合益生菌和纤维寡糖可改善仔猪断奶后的腹泻情况，提高饲料利用效率。本研究将上述6种益生菌分别混合制成复合微生物添加剂A和B拌料饲喂断奶仔猪，对生产性能均有不同程度的提高作用，进一步证实复合微生物添加剂的作用效果。黄其田等[3]用3种不同复合微生态制剂饲喂断奶仔猪，复合微生态制剂c的作用效果比复合微生态制剂a、b更佳。谢大识等[18]分别在断奶仔猪基础日粮中添加不同剂量复合微生态制剂，结果400 mg/kg作用效果最好。本研究发现，复合微生物添加剂B改善断奶仔猪生长性能效果优于复合微生物添加剂A，1.0%添加剂量作用效果优于0.5%。结果表明，不同微生物添加剂组成和使用剂量对仔猪生长性能效果不同，与上述研究结果相符。3.2复合微生物添加剂对断奶仔猪血清生化指标的影响血清生化指标可以反映机体新陈代谢变化和功能状态[19]。血清总蛋白分为白蛋白和球蛋白两类，与蛋白质代谢和免疫功能有关。尿素氮和葡萄糖为血清代谢产物，可评估机体营养状况。尿素氮含量反映蛋白质代谢状况，蛋白质代谢良好时，尿素氮含量降低[20]。葡萄糖反映能量代谢状况。碱性磷酸酶活性可反映营养物质的代谢能力。重组酿酒酵母显著提高断奶仔猪碱性磷酸酶活性及mRNA转录水平[21]。地衣芽孢杆菌能提高断奶仔猪血清球蛋白[22]、白蛋白含量和碱性磷酸酶活性，降低尿素氮含量[23]。乳酸片球菌使生长猪血清中总蛋白、球蛋白含量提高，尿素氮含量降低[24]。复合双歧杆菌使肉羊血清总蛋白和白蛋白含量提高，尿素氮含量降低[25]。粪肠球菌和植物乳杆菌可以明显提高断奶仔猪血液中总蛋白和球蛋白含量[26-27]。一些学者开展了复合微生物添加剂对断奶仔猪血清生化指标影响研究，黄金华等[28]和金三俊等[19]报道，复合益生菌制剂可以显著提高或不同程度提高断奶仔猪血清总蛋白、白蛋白、球蛋白、血糖含量和碱性磷酸酶活性，降低白蛋白/球蛋白比值和尿素氮含量，与本试验结果类似，表明使用复合微生物添加剂可改善断奶仔猪血清生化指标和健康状况，提高抗病力，加强新陈代谢，缓解应激反应。但是，孙宏等[29]研究发现，复合微生态菌剂对断奶仔猪血清生化指标影响不明显，与本研究结果不同，可能与菌剂组成、应用水平和饲料组成等因素不同有关，原因值得探讨。3.3复合微生物添加剂对断奶仔猪免疫功能的影响免疫球蛋白能特异性地结合细菌或病毒，调理吞噬结合的病原体，使其丧失致病作用[4,30]，因此仔猪血清中的免疫球蛋白水平与免疫功能密切相关，是反映抗病力高低的重要指标之一[31]。仔猪免疫系统发育还不成熟，断奶应激可引起仔猪免疫功能障碍，抗病力下降。试验表明，有些微生物是良好的免疫激活剂，能够刺激断奶仔猪免疫器官发育，增强机体非特异性防御机能，提高免疫球蛋白含量，从而增强免疫功能[32]。酿酒酵母发酵液能够提高小肠黏膜免疫球蛋白含量[6]。地衣芽孢杆菌和乳酸片球菌分别能够提高断奶仔猪和生长猪血清IgA和IgG含量[22,24]。屎肠球菌使断奶仔猪IgG含量明显降低，IgA和IgM含量明显升高[33]。植物乳杆菌能提高断奶仔猪、母猪和仔猪血清IgA、IgG和IgM含量[34-35]。有关复合微生物添加剂对断奶仔猪免疫功能影响研究报道资料较多。谢全喜等[36]、刘庆雨等[37]、陈国福等[38]和谢大识等[18]研究发现，复合微生物制剂能显著提高断奶仔猪血清中IgA、IgG和IgM含量。本试验在断奶仔猪饲料中分别添加0.5%和1.0%复合微生物添加剂A和B，能够不同程度地提高血清中IgA、IgG和IgM含量，其中添加0.5%和1.0%复合微生物添加剂B组与对照组差异显著，1.0%复合微生物添加剂组对免疫球蛋白的效果优于0.5%复合微生物添加剂组。试验表明，复合微生物添加剂能够刺激免疫应答反应，增强断奶仔猪免疫力和抗病力，且存在剂量效应，与上述研究报道结果一致。4结论在日粮中分别添加0.5%和1.0%复合微生物添加剂A和B，可以提高断奶仔猪生长性能，调节生化指标，改善免疫功能，降低发病率。添加1.0%复合微生物添加剂B作用效果最好。