蛋鸡产蛋后期的肠道吸收功能减弱，对钙的消化吸收能力下降会导致蛋壳品质下降，给蛋品运输和销售带来不便[1-2]。目前，抗生素在养殖业已被禁止滥用，寻找绿色饲料添加剂迫在眉睫。益生菌可以成为饲料中抗生素的替代品[3]。丁酸梭菌别名酪酸菌，是一种革兰氏阳芽孢杆菌，具有维持畜禽肠道内的微生态平衡的作用[4-6]。产蛋后期蛋鸡肠道中的产丁酸菌群的丰度随着周龄的增加而下降[7]。有研究表明，丁酸梭菌可以提高蛋鸡的产蛋性能，改善蛋品质[8]。酸化剂可加速体内ATP的合成，提高机体免疫力，改善矿质元素铁、钙、磷等利用，抑制肠道有害菌的繁殖和生长[9-10]。竹醋液及活性成分木焦油醇具有抗炎作用[11]。目前，针对丁酸梭菌和竹醋液在蛋鸡上的研究较少。因此，本试验通过研究丁酸梭菌和竹醋液混合添加对产蛋后期蛋鸡的影响，旨在为生产中利用绿色饲料添加剂提高蛋品质，增加经济效益提供参考。1材料与方法1.1试验材料丁酸梭菌购自潍坊瑞辰生物科技有限公司（批号：20201022），活菌总数≥10×108 CFU/g，实测值9.5×108 CFU/g。竹醋液购自山东德坤生物科技有限公司（批号：20201217），pH值2.5。1.2试验设计与饲养管理试验在陕西诚顺祥养殖有限公司进行。选取60周龄、体重相近的海兰褐蛋鸡480只，随机分为4组，每组3个重复，每个重复40只鸡。按照2×2双因素法设计试验，对照组蛋鸡饲喂基础日粮，试验1组蛋鸡饲喂基础日粮+0.9 g/kg丁酸梭菌，试验2组蛋鸡饲喂基础日粮+1%竹醋液，试验3组蛋鸡饲喂基础日粮+复合添加剂（0.45 g/kg丁酸梭菌+0.5%竹醋液）。基础日粮由陕西泾河石羊饲料有限公司配制，基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.13.014.T001表1基础日粮组成及营养水平（风干基础）原料组成含量/%营养水平合计100.0玉米59.8代谢能/(MJ/kg)11.25豆粕20.0粗蛋白/%16.85麸皮5.8钙/%3.50骨粉4.3总磷/%0.85石粉8.0蛋氨酸/%0.31磷酸氢钙1.6胱氨酸/%0.27食盐0.2赖氨酸/%0.97预混料0.3注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 2 025 IU、VE 19.5 mg、VD3 600 IU、VK3 0.45 mg、VB1 0.45 mg、VB2 2.33 mg、VB6 0.45 mg、VB12 0.033 8 mg、叶酸0.23 mg、烟酰胺4.5 mg、泛酸2.25 mg、铜22.5 mg、铁162 mg、锌115.5 mg、锰72 mg、碘1.5 mg、硒0.3 mg。2.营养水平均为计算值。所有试验组自由采食、饮水，蛋鸡管理条件相同，常规免疫程序接种。预试期1 w，正式试验期8 w。试验蛋鸡预试期产蛋率：对照组84.36%、试验1组88.12%、试验2组87.24%、试验3组89.02%。1.3测定指标及方法1.3.1生产性能每天18：00记录每组产蛋数、蛋重，每周记录投料量、剩料量。计算产蛋率、日采食量、料蛋比。产蛋率=每组总产蛋数/(试验天数×每组蛋鸡)×100%(1)平均蛋重=每组产蛋总重/每组中产蛋数(2)平均日采食量=(周投料量-周剩料量)/(蛋鸡总数×7)(3)料蛋比=平均日采食量/(蛋重×产蛋率)(4)1.3.2蛋品质试验第9 w的7：00，每组选取30枚鸡蛋，使用蛋壳厚度测定仪（ESTG-01，以色列ORKA）测定蛋壳厚度；全自动蛋壳强度测定仪（ST120H，山东盛泰仪器有限公司）测定蛋壳强度；蛋品质自动分析仪（EMT7300，日本Robotmation）测定蛋白高度、蛋黄色泽、哈夫单位。1.3.3肠道功能试验第9 w的7：00随机从每个重复中选取3只鸡，颈部放血后剖开腹腔，迅速取出并分离肠段，轻轻挤出肠道食糜，用生理盐水冲洗，剪下约3 cm的空肠和回肠各两段，纵向剪开，用灭菌生理盐水将其轻轻冲洗干净，使用灭菌载玻片小心刮取肠黏膜约2 g，使用灭菌锡箔纸包好，立即放入液氮速冻，运回实验室，-80 ℃冰箱冻存，待测。采用比色法测定空肠和回肠黏膜中总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性、总抗氧化能力（T-AOC）、还原型谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）含量；并测定空肠和回肠食糜淀粉酶、脂肪酶和糜蛋白酶的活性。1.4数据统计与分析数据采用SPSS 20.0软件进行单因素方差分析，采用Duncan氏法进行多重比较，结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1丁酸梭菌联合竹醋液对产蛋后期蛋鸡生产性能的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，各试验组料蛋比均显著降低（P0.05），日粮添加丁酸梭菌或竹醋液均能够增加蛋重，但未达到显著水平（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.13.014.T002表2丁酸梭菌联合竹醋液对产蛋后期蛋鸡生产性能的影响组别平均日采食量/g产蛋率/%料蛋比平均蛋重/g对照组132.35±10.2883.43±3.192.32±0.12a69.78±0.73试验1组131.10±10.4187.53±2.642.14±0.06b70.13±0.49试验2组131.83±10.8586.88±2.182.15±0.08b69.85±0.51试验3组132.11±9.6588.14±2.452.13±0.05b69.95±0.68注：同列数据肩标字母不同表示差异显著（P0.05），字母相同或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2丁酸梭菌联合竹醋液对产蛋后期蛋鸡蛋品质的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，试验1组和试验2组的蛋壳厚度和蛋壳强度均显著增加（P0.05），试验3组的蛋黄色泽显著优于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.13.014.T003表3丁酸梭菌联合竹醋液对产蛋后期蛋鸡蛋品质的影响组别蛋壳厚度/mm蛋壳强度/(N/m2)蛋白高度/mm哈夫单位蛋黄色泽对照组0.44±0.06b34.02±0.19b6.85±0.0878.46±0.166.70±0.04b试验1组0.43±0.04b32.75±0.26b6.45±0.0676.45±0.126.91±0.04b试验2组0.65±0.05a39.90±0.21a6.53±0.0777.54±0.157.01±0.05b试验3组0.71±0.03a40.11±0.23a6.92±0.0979.24±0.187.97±0.06a2.3丁酸梭菌联合竹醋液对产蛋后期蛋鸡肠道抗氧化性能的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，试验3组蛋鸡的回肠MDA含量显著降低（P0.05），试验1组、试验2组和试验3组蛋鸡的回肠T-AOC均显著升高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.13.014.T004表4丁酸梭菌联合竹醋液对产蛋后期蛋鸡肠道抗氧化性能的影响组别T-SOD/(U/mg prot)T-AOC/(U/mg prot)GSH/(μmol/g prot)MDA/(μmol/g prot)空肠回肠空肠回肠空肠回肠空肠回肠对照组41.11±3.2045.14±4.297.87±0.848.09±0.12b52.66±4.1625.96±2.183.54±0.384.22±0.06a试验1组46.75±4.1952.51±4.217.91±0.949.53±0.28a59.21±5.2123.52±2.203.51±0.453.50±0.03a试验2组46.12±5.2151.95±5.237.95±0.919.38±0.11a58.95±4.2323.18±2.223.49±0.293.61±0.05a试验3组48.22±4.2452.65±4.268.02±0.869.68±0.24a58.46±4.4524.16±2.233.45±0.313.21±0.06b2.4丁酸梭菌联合竹醋液对产蛋后期蛋鸡消化酶的影响（见表5）由表5可知，与对照组相比，试验1组、试验2组和试验3组蛋鸡的回肠脂肪酶活性显著升高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.13.014.T005表5丁酸梭菌联合竹醋液对产蛋后期蛋鸡消化酶的影响组别淀粉酶脂肪酶糜蛋白酶空肠回肠空肠回肠空肠回肠对照组901.52±14.43576.53±12.56129.26±10.5597.27±9.05b7.40±0.196.41±0.19试验1组944.16±15.76665.16±13.38123.08±10.39129.74±9.02a7.56±0.027.11±0.29试验2组951.25±11.29678.51±12.13133.02±10.11132.41±9.24a7.62±0.047.24±0.31试验3组961.37±12.11683.24±12.24139.84±10.32137.65±10.01a7.68±0.057.33±0.34U/mg3讨论3.1丁酸梭菌联合竹醋液对产蛋后期蛋鸡生产性能的影响蛋鸡生产性能由环境、品种和营养等多种因素决定。本试验结果显示，产蛋后期蛋鸡日粮中添加丁酸梭菌或竹醋液均能够增加蛋重，但未达到显著水平，可能与蛋鸡老龄化有关。丁酸梭菌可以对畜禽的肠道健康和脂质代谢产生积极影响。竹醋液可以降低消化道pH值，改变肠道菌群结构，增加消化酶活性，进而增加营养物质的利用率。本试验中，日粮中添加丁酸梭菌或竹醋液以及两者复合添加剂后，料蛋比均显著降低，可能与两者均能够改善肠道消化功能，提高饲料利用率有关。3.2丁酸梭菌联合竹醋液对产蛋后期蛋鸡蛋品质的影响小麦、大豆和玉米等籽实饲料叶黄素含量较低，会导致高龄（40周龄后）蛋鸡蛋壳质量变差，蛋黄色泽变浅[12-13]。研究表明，添加中草药添加剂可以改变蛋黄色泽和蛋壳质量[14]。本试验结果显示，日粮添加0.45 g/kg丁酸梭菌+0.5%竹醋液的试验组蛋黄色泽最好。可能因为蛋黄的颜色源自胡萝卜素，丁酸梭菌和竹醋液具有良好的抗氧化性，可以清除机体内的多种自由基，防止鸡蛋中的胡萝卜素被氧化，从而提高蛋黄色泽。蛋壳质量、蛋壳强度和哈夫单位与鸡蛋的新鲜程度和破壳率有关，是衡量蛋品质的重要指标[15]。本研究中，与对照组相比，日粮添加1%竹醋液或0.45 g/kg丁酸梭菌+0.5%竹醋液后，蛋壳厚度和蛋壳强度均显著增加，可能与蛋鸡肠道环境和功能被丁酸梭菌和竹醋液，改善肠道钙的吸收提高有关。3.3丁酸梭菌联合竹醋液对产蛋后期蛋鸡肠道功能的影响肠道直接与日粮中的各成分接触，容易发生氧化应激而损伤肠道上皮细胞，直接影响肠道功能的发挥[16]。日粮添加丁酸梭菌可以改善动物肠道形态结构，有利于增大食糜与小肠绒毛的接触面积，促进饲料养分的吸收[17]。此外，日粮添加丁酸梭菌还可提高动物的肠道抗氧化性能[18]。本研究中，与对照组相比，日粮添加0.45 g/kg丁酸梭菌+0.5%竹醋液组蛋鸡的回肠MDA含量显著降低，回肠T-AOC显著升高。说明两者均可能有助于提高产蛋后期的肠道抗氧化性能。小肠的消化酶能够将大分子养分降解成小分子化合物，从而使养分顺利穿过肠黏膜被吸收。研究表明，添加丁酸梭菌可以提高肉鸡空肠淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶的活性[19]。本试验中，添加丁酸梭菌和竹醋液均能够提高蛋鸡回肠脂肪酶的活性。脂肪酶能够将甘油三酯降解为游离脂肪酸和甘油一酯，从而有助于饲料中脂肪的吸收[20]，提高蛋鸡对日粮养分的利用率。4结论日粮添加丁酸梭菌联合竹醋液可以有效提高产蛋后期蛋鸡生产性能，改善蛋品质和肠道功能。