凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）具有生长速度快、对水环境变化适应能力强、耐高密度养殖、抗病力强等特点，其养殖产量占我国对虾养殖产量的70%[1-2]。随着集约化水产养殖业迅猛发展，水产饲料的数量、品种和产量迅速增加[3]，对鱼粉的需求量大幅度增加[4]。近年来，全球鱼粉的供需问题日益突出，积极寻找其他合适蛋白源替代鱼粉成为当前研究热点[5-6]。植物蛋白源具有种类多、来源广、营养价值高、价格低廉的优势，可以替代饲料中的鱼粉[7-9]。研究表明，豆粕在饲料中的添加量受限，需要对豆粕进行改良提升其价值[10]。带皮豆粕的粗蛋白质含量约45.62%，去皮豆粕的粗蛋白质含量约47.53%。去皮豆粕的蛋白、氨基酸含量和代谢能均比带皮豆粕高[11]。去皮豆粕已在鸡、鸭、猪等中广泛应用[12]，也被应用于水产动物[13-14]。本试验使用不同含量的去皮豆粕替代等蛋白水平的鱼粉，探讨对凡纳滨对虾生长及体组成的影响，为降低虾配合饲料成本提供参考。1材料与方法1.1试验设计以进口蒸汽鱼粉（粗蛋白68.2%）和去皮豆粕（粗蛋白46.1%）作为蛋白源，鱼油和大豆卵磷脂作为脂肪源，高筋面粉为碳水化合物来源，配制6种等氮等能的日粮。分别使用去皮豆粕替代0、14%、28%、42%、56%和70%的鱼粉蛋白。日粮组成及营养水平见表1，日粮氨基酸组成见表2。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.13.001.T001表1日粮组成及营养水平（干物质基础）项目0组14%组28%组42%组56%组70%组原料组成/%进口蒸汽鱼粉53.045.638.231.023.316.0去皮豆粕011.523.035.047.058.0高筋面粉32.527.923.117.712.79.0乌贼膏3.03.03.03.03.03.0虾壳粉4.04.04.04.04.04.0啤酒酵母3.03.03.03.03.03.0大豆卵磷脂1.01.01.01.01.01.0鱼油0.51.01.72.33.03.0预混料2.02.02.02.02.02.0磷酸二氢钙1.01.01.01.01.01.0合计100.0100.0100.0100.0100.0100.0营养水平/%粗蛋白42.842.642.542.742.742.7粗脂肪8.48.38.38.38.38.2注：1.每千克预混料为日粮提供：VA 400 000 IU、VD 200 000 IU、VE 3.0 g、VK 1.0 g、VB1 0.5 g、VB2 1.5 g、VB6 0.8 g、VB12 0.002 g、泛酸钙2.5 g、烟酸4.0 g、生物素0.008 g、肌醇15.0 g、叶酸0.25 g、VC磷酸酯50.0 g、氯化胆碱150 g、MgSO4·H2O 3.0 g、MgCl2 22.5 g、Met·Cu 0.75 g、ZnSO4·H2O 2.5 g、FeSO4·H2O 0.25 g、MnSO4·H2O 45 g、Met·Co 0.062 5 g、Na2SeO3(1%) 0.09 g、Ca(IO3)2(1%) 1.5 g、KCl 9.0 g。2.营养水平均为计算值。%10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.13.001.T002表2日粮氨基酸组成（干物质基础）项目0组14%组28%组42%组56%组70%组必需氨基酸赖氨酸（Lys）2.892.772.632.522.242.37蛋氨酸（Met）1.051.010.860.770.690.59异亮氨酸（Ile）1.741.791.771.791.811.81亮氨酸（Leu）3.033.073.093.103.113.10苯丙氨酸（Phe）1.731.781.831.871.861.92缬氨酸（Val）2.072.072.042.022.031.99组氨酸（His）1.021.000.991.000.981.00苏氨酸（Thr）1.701.681.691.671.671.63精氨酸（Arg）2.302.412.452.552.592.74半胱氨酸（Cys）0.130.170.150.150.190.17非必需氨基酸丝氨酸（Ser）1.671.721.791.841.921.94谷氨酸（Glu）6.426.426.546.656.786.87甘氨酸（Gly）2.532.402.312.202.142.00丙氨酸（Ala）2.602.482.382.282.192.05天冬氨酸（Asp）3.663.773.954.124.234.30脯氨酸（Pro）1.971.911.981.831.841.95%所有饲料原料粉碎后过80目筛，使用V型混合机混合均匀后用华南理工大学生产SLX-80型挤压机制成粒径为1.0 mm的饲料颗粒，60 ℃烘干，-20 ℃冰箱备用。1.2饲养管理养殖试验在室内流水养殖系统中进行，每桶（300 L）进水量为1.5 L/min。试验用虾苗在养殖系统中暂养10 d，期间投喂商品饲料。试验开始前禁食24 h，选取630尾/初重（1.18±0.01）g的凡纳滨对虾幼虾，分为6组，每组3个重复，每个重复35尾。共使用18个水族箱，每个水族箱放养35尾。试验期10 w。每天投喂4次，其投喂时间分别为6：00、10：30、18：00、22：00，日投喂率约为对虾体重的6%，并根据对虾每周体重变化及各组摄食情况调整投喂量，若有剩料通过虹吸法收集扣除。养殖期间控制水温（28.0±1.0）℃、盐度26.5‰~28.0‰、溶氧约7 mg/L。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能养殖试验结束后，禁食12 h，分别称量每桶对虾总重,并记录对虾个数，计算每桶凡纳滨对虾的平均体重。计算增重率（WGR）、特定生长率（SGR）、饲料系数（FCR）和蛋白质效率（PER）。WGR=(Wt-W0)/W0×100% (1)SGR=(lnWt-lnW0)/t×100% (2)FCR=I/(Wt-W0) (3)PER=(Wt-W0)/(I×P)×100% (4)式中：Wt和W0分别为终末和初始均重（g）；t为试验时间（d）；I为投喂重量（g）；P为饲料中蛋白质含量（%）。1.3.2体常规和体组织氨基酸每桶选取7~10尾对虾用于体常规分析和体组织氨基酸分析。鱼体和饲料常规成分分析均采用AOAC[15]的方法。其中，水分的测定采用105 ℃烘干恒重法（24 h）；粗蛋白的测定采用凯氏定氮法；粗脂肪的测定采用索氏抽提法；粗灰分的测定采用箱式电阻炉550 ℃灼烧法（16 h）。总氨基酸的测定采用6 N HCl水解法（24 h），采用日立L-8800型氨基酸自动分析仪分析。1.4数据统计与分析数据采用SPSS 11.0软件进行单因素方差分析（ANOVA），采用Tukey's检验进行多重比较分析，结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1去皮豆粕替代鱼粉对凡纳滨对虾生长性能的影响（见表3）由表3可知，各处理组凡纳滨对虾成活率均在90%以上。对照组对虾的增重率和特定生长率最高。与对照组相比，当替代水平达到或超过56%，增重率、特定生长率显著降低，饲料系数显著升高（P0.05）。14%组对虾的饲料系数最低，56%和70%组对虾的饲料系数显著高于对照组（P0.05）。各处理组蛋白质效率随替代水平的增大，呈先升高后下降的趋势，在14%组达到最高。与对照组相比，70%组对虾的蛋白质效率显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.13.001.T003表3去皮豆粕替代鱼粉对凡纳滨对虾生长性能的影响组别初重/g末重/g增重率/%特定生长率/(%/d)投喂重量/g饲料系数蛋白质效率/%成活率/%对照组38.33±1.76296.33±13.68bcd756.00±30.92a3.07±0.03c329.97±6.13b1.28±0.07ab1.82±0.05bc90.50±5.9514%组40.00±1.00329.33±8.41d740.50±22.25a3.04±0.02c343.50±0c1.19±0.07a1.98±0.06c98.10±5.9528%组41.33±0.67310.33±0.33cd707.30±60.51ab2.98±0.06bc336.10±0bc1.25±0.01ab1.87±0.01bc93.30±5.9542%组41.67±1.86289.67±5.78abc649.40±42.81bc2.87±0.05abc333.63±2.47bc1.35±0.06bc1.75±0.04ab93.30±9.1856%组41.33±1.20270.67±7.67ab610.20±23.36c2.80±0.03ab317.70±0a1.39±0.07cd1.69±0.05ab92.40±5.9570%组40.33±1.76256.67±5.04a573.00±76.20c2.72±0.09a315.23±2.62a1.46±0.03d1.60±0.02a95.20±5.95注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2去皮豆粕替代鱼粉对凡纳滨对虾体组成的影响（见表4、表5）由表4可知，与对照组相比，70%鱼粉替代组凡纳滨对虾体组织肌肉常规成分粗蛋白含量显著降低（P0.05）。各处理组对虾体组织水分、粗脂肪、粗灰分含量无显著差异（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.13.001.T004表4饲料中去皮豆粕替代鱼粉对凡纳滨对虾体组成的影响组别水分粗蛋白粗脂肪粗灰分对照组75.70±0.0518.40±0.24ab2.41±0.543.29±0.1214%组74.70±0.5818.70±0.33a2.00±0.463.32±0.0428%组75.10±0.0118.20±0.37abc1.85±0.163.38±0.1142%组75.50±0.4517.90±0.25bc1.71±0.093.33±0.0556%组75.60±0.8117.90±0.45bc1.83±0.133.25±0.0870%组75.20±0.2417.60±0.40c1.80±0.023.39±0.16%由表5可知，各组对虾组织肌肉中各氨基酸组成无显著差异（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.13.001.T005表5饲料中去皮豆粕替代鱼粉对凡纳滨对虾氨基酸组成的影响项目对照组14%组28%组42%组56%组70%组必需氨基酸赖氨酸（Lys）4.80±0.435.15±0.834.85±0.274.74±0.524.92±0.294.75±0.12蛋氨酸（Met）1.48±0.171.56±0.381.51±0.061.49±0.221.50±0.121.50±0.03异亮氨酸（Ile）2.56±0.222.76±0.492.57±0.162.55±0.272.58±0.152.55±0.07亮氨酸（Leu）4.52±0.434.96±0.994.53±0.224.59±0.594.58±0.254.54±0.26苯丙氨酸（Phe）2.78±0.232.90±0.422.77±0.162.74±0.262.85±0.202.76±0.09缬氨酸（Val）2.93±0.243.02±0.412.87±0.162.86±0.252.95±0.172.86±0.07组氨酸（His）1.66±0.221.69±0.291.61±0.101.60±0.221.67±0.131.60±0.03苏氨酸（Thr）2.48±0.232.55±0.362.44±0.122.43±0.262.48±0.162.42±0.06精氨酸（Arg）5.50±0.525.43±0.265.59±0.475.48±0.095.31±0.535.44±0.18半胱氨酸（Cys）0.21±0.030.26±0.050.24±0.020.22±0.040.23±0.020.23±0.01非必需氨基酸丝氨酸（Ser）2.53±0.232.59±0.372.50±0.112.49±0.262.52±0.182.47±0.09谷氨酸（Glu）9.43±1.069.86±1.539.37±0.479.38±1.059.57±0.539.28±0.28甘氨酸（Gly）5.77±0.855.73±0.775.79±0.175.41±0.565.67±0.525.61±0.39丙氨酸（Ala）4.08±0.374.18±0.673.85±0.223.86±0.333.99±0.253.81±0.17天冬氨酸（Asp）6.51±0.616.82±1.036.55±0.286.45±0.796.65±0.466.45±0.14脯氨酸（Pro）3.07±0.453.07±0.603.03±0.073.14±0.613.31±0.163.25±0.16%DM3讨论3.1去皮豆粕替代鱼粉对凡纳滨对虾生长性能的影响本试验中，各试验组对虾成活率均在90%以上，凡纳滨对虾在整个试验过程中健康状况良好。一定量的豆粕替代鱼粉对凡纳滨对虾的生长性能无显著影响[16-18]。Elkin等[19]发现，使用豆粕替代饲料中39.6%的鱼粉蛋白不会影响凡纳滨对虾的生长。闫洋洋[20]发现，豆粕可以替代50%的鱼粉蛋白不会对凡纳滨对虾生长性造成负面影响，然而替代水平过高会导致凡纳滨对虾WGR、SGR显著降低。Cummins等[21]研究表明，豆粕替代鱼粉水平超过52.5%会为凡纳滨对虾的生长指标带来负面影响。杨奇慧等[22]使用植物蛋白复合物替代凡纳滨对虾饲料中的鱼粉，发现随着豆粕、花生粕和玉米蛋白粉替代鱼粉蛋白水平的升高，凡纳滨对虾WGR、SGR显著降低，FCR显著升高。本试验中，随着去皮豆粕替代鱼粉的水平升高，凡纳滨对虾增重率、特定生长率与对照组相比呈不断降低趋势，而饲料系数则呈先升高后降低趋势。更高替代组对虾增重率和特定生长率显著降低，饲料系数显著升高。邵建春[23]研究发现，豆粕可以作为凡纳滨对虾替代饲料中鱼粉的蛋白源，但替代水平超过40%时会给凡纳滨对虾的生长造成潜在负面影响。随着豆粕替代水平升高，对虾等水产动物生长抑制，一方面可能与豆粕相比较于鱼粉对动物的适口性较差有关，豆粕中含有大量的抗营养因子，如胰蛋白酶抑制因子会抑制动物生长、降低动物对营养物质的消化吸收和利用效率，对动物肠道健康产生不良影响[24]；另一方面豆粕相较鱼粉在氨基酸平衡方面较差[25-26]。本试验中，随着豆粕替代水平的增加，饲料中蛋氨酸和赖氨酸含量明显降低，可能会影响对虾对必需氨基酸的需求量[27-28]。丁李等[29]研究发现，在氨基酸不平衡的情况下，豆粕替代50%和100%鱼粉会显著降低牛蛙的生长性能。方卫东等[30]研究发现，补充赖氨酸和蛋氨酸后，饲料中豆粕替代80%的鱼粉不会影响牛蛙的生长性。何大庆等[31]利用美国去皮豆粕替代部分鱼粉，发现鱼粉含量从27.0%降至10.8%不会对凡纳滨对虾生长造成显著影响。本研究中，鱼粉含量低于38.2%时，凡纳滨对虾生长显著下降，可能与其基础饲料配方不同有关。何大庆等[31]研究中，对照组中作为蛋白源的不仅有27.0%的进口鱼粉，还有2.0%的进口肉骨粉、27.8%的花生麸以及5.0%的豆粕和2.0%的蛋白粉，而本试验对照组配方作为蛋白源的仅有53.0%的进口蒸汽鱼粉。本研究中，14%替代组蛋白质效率获得最高值，说明在凡纳滨对虾饲料中适当使用去皮豆粕替代鱼粉可以提高凡纳滨对虾的蛋白质利用率。上述研究结果表明，使用去皮豆粕替代约28%鱼粉比较适宜。3.2去皮豆粕替代鱼粉对凡纳滨对虾体成分的影响本研究结果表明，不同水平去皮豆粕替代鱼粉对凡纳滨对虾体组成水分、粗脂肪、粗灰分和体组织氨基酸含量均无显著影响。而凡纳滨对虾体蛋白和体脂肪含量随着去皮豆粕替代量升高呈现下降趋势，替代水平超过70%时体组织蛋白含量显著降低。本试验中，凡纳滨对虾体蛋白降低可能因为去皮豆粕赖氨酸和蛋氨酸含量低，随着替代水平的升高，饲料氨基酸严重失衡[32]。吴钊等[33]、陈乃松等[34]分别在大黄鱼和大口黑鲈利用豆粕替代鱼粉的研究中发现，体蛋白含量随着替代水平升高有下降趋势，但体脂肪有上升趋势，与本试验研究结果不一致。闫晓波等[35]在多鳞鱚上使用去皮豆粕替代鱼粉，发现高水平豆粕替代会降低体组织蛋白含量。但在异育银鲫[36]、鲷鱼[37]、胭脂鱼[38]等养殖动物上却得到不同的研究结果。因此，植物蛋白替代鱼粉对养殖动物体组织成分影响的具体机制还有待进一步研究。4结论以生长、饲料系数和蛋白质效率为评价指标，凡纳滨对虾配合饲料中去皮豆粕替代等量鱼粉蛋白的最适添加量为28%。