鱼油富含ω-3系列高度不饱和脂肪酸,主要包括二十碳五烯酸(C20∶5n-3,EPA)和二十二碳六烯酸(C22∶6n-3,DHA)。在鱼类饵料中添加适量鱼油可以满足其生长所需的能量和必需脂肪酸,提高饲料利用率[1]。鱼油在维持细胞膜的流动性、增强免疫、提高抗氧化能力、减轻炎症反应以及调节脂肪代谢等方面发挥重要的作用[2],被认为是水产动物饵料中的优质脂肪源。鱼油中多不饱和脂肪酸的双键结构使其在加工、储存及投喂过程中极易发生氧化酸败,产生醛、酸等物质,对水产动物的生长速度、饲料效率、肝肠健康、体色等造成负面影响,这也是鳗鱼养殖场在夏季添加鱼油量较低的主要原因。将乳化后的鱼油包被微胶囊处理后制作成固体粉状产品,大大减少氧化发生,可以提高鱼油的利用效率[3-4]。但是,该产品在实际养殖条件下的应用研究还未见报道。因此,本试验将在循环水养殖美洲鳗鲡幼鱼条件下,探究饵料中添加不同水平鱼油微胶囊粉的效果,为鱼油在鳗鲡饵料中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验设计美洲鳗鲡幼鱼由福建锦江之曼水产科技有限公司的养殖场提供。挑选质量(40.3±0.3)kg/池和规格(68.1±3.9)P(P数为描述鳗鲡规格专用术语,为每千克鳗鲡尾数)接近的具有循环水设施的6口水泥池,随机分为3个组(对照组、MFO5组和MFO10组),分别投喂基础饵料、基础饵料+5%鱼油微胶囊粉和基础饵料+10%鱼油微胶囊粉,每组2个重复。试验期10 w。试验用基础饵料为福州欣瑞意实业有限公司生产的黑仔鳗配合饵料,其主要营养水平(干物质基础)为粗蛋白质47.44%、粗脂肪4.65%、粗灰分14.42%、水分6.32%。鱼油微胶囊粉为淡黄色粉末状物质,委托龙岩新奥生物科技有限公司生产,总脂肪含量为50%。鱼油微胶囊粉等量替换配合饵料。1.2饲养管理养殖试验在福建锦江之曼水产科技有限公司的循环水精养池中进行。每池面积为30 m2,水深0.8 m。试验开始前,对30口鳗鲡精养池进行统一管理,投喂基础饵料3个月后选别。投喂前按照料水比1∶1.3采用搅拌机(YE2132M-6,上海皓天电机有限公司)制作面团状饵料,每天5:30和17:30定时投喂。水质情况为pH值5.56~7.71,水温25~29 ℃、氨氮0.01~1.96 mg/L、亚硝酸盐0.001~0.127 mg/L。选别后的鳗池中挑选出规格和初重接近的6口池进行养殖试验,试验期间投喂量根据鳗鲡生长情况、水质变化、用药情况及天气变化等因素酌情增减,发现死鱼后及时捞出并做无害化处理;拌料时基础饵料与鱼油微胶囊粉比例为95∶5和90∶10,按照1∶1.3的料水比搅拌制作面团状饵料。1.3样品采集试验结束前禁食24 h,称取每池鳗鲡总重。随机选取5尾鱼,去除内脏用于体成分测定;随机选取5尾鱼,取背部肌肉,-20 ℃保存,用于测定肌肉脂肪酸组成。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能根据鳗鲡幼鱼初重、末重、投喂量计算增重率、饲料系数、成活率。增重率=(末重-初重)/初重×100%(1)饲料系数=投喂饵料重/(末重-初重)(2)成活率=终末鱼尾数/初始鱼尾数×100%(3)1.4.2体成分试验鱼全鱼营养成分含量采用AOAC(1995)[5]的方法测定;水分含量测定采用105 ℃烘干恒重法;粗蛋白质(CP)含量的测定采用全自动定氮仪(Kjeltec8400,FOSS公司);粗脂肪测定采用索氏提取法;粗灰分含量测定采用550 ℃马弗炉灼烧法。1.4.3肌肉脂肪酸组成参照GB/T 21514—2008《饲料中脂肪酸含量的测定》[6]方法,使用安捷伦7890气相色谱仪进行分析。仪器运行的内部环境为:前检测器50 ℃、前进样口250 ℃、柱箱250 ℃、柱流量1.25 mL/min、进样量1 μL、分流比为50∶1。具体运行方法为50 ℃、2 min;再5 ℃/min,从50 ℃上升至270 ℃;270 ℃、2 min。1.5数据统计与分析采用SPSS 22.0分析软件进行单因素方差分析(One-way ANOVA),若存在显著差异,采用Duncan's法进行多重比较,结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1鱼油微胶囊粉对美洲鳗鲡幼鱼生长性能的影响(见表1)由表1可知,MFO5组美洲鳗鲡幼鱼的饲料系数显著低于对照组(P0.05)。与对照组相比,MFO5和MFO10组末重分别提高5.7%和6.5%,增重率分别提高11.8%和13.5%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.015.T001表1鱼油微胶囊粉对美洲鳗鲡幼鱼生长性能的影响组别初重/(kg/池)末重/(kg/池)增重率/%投料量/(kg/池)饲料系数成活率/%对照组40.45±0.6488.13±0.67117.90±5.0968.47±1.081.44±0.06b99.82±0.05MFO5组40.20±0.1493.18±1.31131.79±4.0769.84±4.451.31±0.05a99.84±0.03MFO10组40.15±0.2193.90±2.47133.86±4.9375.24±4.701.39±0.03ab99.91±0.03注:同列数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。2.2鱼油微胶囊粉对美洲鳗鲡幼鱼体成分的影响(见表2)由表2可知,与对照组相比,MFO10组鳗鲡幼鱼的水分含量显著降低(P0.05),粗蛋白含量显著升高(P0.05);MFO5组和MFO10组鳗鲡幼鱼的粗脂肪含量显著上升(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.015.T002表2鱼油微胶囊粉对美洲鳗鲡幼鱼体成分的影响组别水分粗蛋白粗脂肪灰分对照组75.20±0.16b16.09±0.04a7.02±0.08a2.49±0.02MFO5组73.86±0.70ab16.47±0.50ab10.03±0.45b2.49±0.13MFO10组72.98±0.25a17.34±0.59b10.49±0.61b2.43±0.14%2.3鱼油微胶囊粉对美洲鳗鲡幼鱼肌肉脂肪酸组成的影响(见表3)由表3可知,对于饱和脂肪酸(SFA),MFO10组鳗鲡幼鱼的C8∶0、C16∶0和ΣSFA比例最低,显著低于对照组(P0.05);C10∶0、C12∶0、C15∶0、C17∶0比例最高,显著高于对照组(P0.05);鱼油微胶囊粉对其他SFA比例无显著影响(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.015.T003表3鱼油微胶囊粉对美洲鳗鲡幼鱼肌肉脂肪酸组成的影响项目对照组MFO5组MFO10组C8∶00.010±0.003b0.012±0.002b0.002±0.000aC10∶00.005±0.001a0.006±0.001b0.008±0.000cC12∶00.070±0.002a0.084±0.001b0.084±0.001bC14∶03.827±0.1744.038±0.0803.876±0.034C15∶00.151±0.013a0.183±0.003b0.184±0.002bC16∶023.527±0.172b23.305±0.096b22.184±0.496aC17∶00.072±0.007a0.097±0.002b0.126±0.005cC18∶02.944±0.0783.095±0.0243.066±0.108C20∶00.102±0.0120.109±0.0040.113±0.009C22∶00.018±0.0010.019±0.0010.019±0.001ΣSFA30.727±0.270b30.948±0.162b29.662±0.626aC14∶10.175±0.010c0.149±0.004b0.133±0.005aC16∶19.642±0.120c9.093±0.078b8.575±0.072aC17∶10.163±0.004a0.227±0.036b0.260±0.004bC18∶143.266±1.366b40.867±0.582a39.813±0.691aC20∶11.937±0.0621.826±0.0921.913±0.024C22∶10.304±0.014a0.347±0.018b0.392±0.003cΣMUFA55.487±1.186b52.509±0.567a51.085±0.643aC18∶24.392±0.308a5.024±0.171b5.322±0.105bC18∶30.417±0.022a2.172±0.037b3.671±0.019cC20∶20.255±0.0220.248±0.0190.251±0.015C20∶30.096±0.0200.114±0.0190.110±0.005C20∶40.426±0.0240.441±0.0080.456±0.015C20∶51.612±0.069a1.827±0.108b2.160±0.042cC22∶30.100±0.0110.099±0.0030.102±0.004C22∶40.115±0.0110.122±0.0030.123±0.005C22∶51.096±0.083a1.129±0.033a1.235±0.004bC22∶65.278±0.4535.366±0.1975.824±0.042ΣPUFA13.786±1.002a16.542±0.508b19.253±0.040c注:同行数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05)。%对于单不饱和脂肪酸(MUFA)(除C21∶1外),MFO10组的C14∶1、C16∶1、C18∶1和ΣMUFA比例最低,均显著低于对照组(P0.05);C17∶1、C22∶1比例最高,均显著高于对照组(P0.05)。对于多不饱和脂肪酸(PUFA),MFO10组鳗鲡幼鱼的C18∶2、C18∶3、C20∶5、C22∶5比例最高,显著高于对照组(P0.05);鱼油微胶囊粉对其他PUFA比例无显著影响(P0.05)。3讨论3.1鱼油微胶囊粉对美洲鳗鲡幼鱼生长性能的影响在本试验中,不同处理组的美洲鳗鲡幼鱼末重和增重率无显著差异,与鲤鱼(Cyprinus carpio)[7]、红鲫鱼(Carassius auratus red variety)[8]饵料中添加鱼油的研究结果一致。但是,试验组鳗鲡幼鱼的末重和增重率随着鱼油微胶囊粉添加水平的增加而升高,与黄鳝(Monopterus albus zuiew)[9]、鳡幼鱼(Elopichthys bambusa)[10]、胭脂鱼(Myxocyprinus asiaticus)[11]、大菱鲆(Scophthalms maximusl)[12]饵料中添加鱼油的报道结果类似。上述研究中,不同试验添加鱼油后生长性能方面的差异可能与试验鱼的种类、鱼油添加水平、营养需求和试验条件有关。本试验中,每个处理组的重复数较少可能是添加鱼油微胶囊粉显著改善生长性能的一个原因。此外,添加鱼油微胶囊粉降低了鳗鲡配合饵料的CP水平,MFO5组降低2.4%、MFO10组降低4.7%,但幼鱼生长性能未降低,且有一定程度的提高,说明试验中美洲鳗鲡配合饵料的粗蛋白质含量可能存在过量的情况。此外,添加鱼油微胶囊粉可以为鱼体生长提供充足的能量,使蛋白质的分解供能减少,体蛋白合成增多,这种“脂肪节约蛋白”效应在快速生长的幼鱼阶段尤其显著[12]。虽然MFO5组和MFO10组美洲鳗鲡的增重接近,但MFO10组投料量较高,有可能该组饵料的营养不能满足需求,只能通过提高摄食量来补充营养。因此,建议鱼油微胶囊粉在美洲鳗鲡幼鱼饵料中的添加量不超过5%。3.2鱼油微胶囊粉对美洲鳗鲡幼鱼体成分的影响在本试验中,美洲鳗鲡幼鱼全鱼中的粗脂肪含量随鱼油微胶囊粉添加水平的增加而上升,在大菱鲆[13]、眼斑拟石首鱼(Sciaenops ocellatus)[14]、黄姑鱼(Nibea albiflora Richardson)[15]、异育银鲫(Carassius auratus gibelio)[16]及大口黑鲈(Micropterus salmoides)[17]饵料添加鱼油的研究中有类似结果,说明饵料中的脂肪来源及含量会直接影响其在体内的沉积。美洲鳗鲡幼鱼全鱼粗蛋白水平显著增加的原因可能是饵料中添加鱼油增加了可消化能,满足鱼体对能量的需求,使蛋白质分解供能的比例降低,提高蛋白质的利用率。研究表明,鱼油中富含的ω-3脂肪酸,可以增强蛋白质合成相关信号通路,促进蛋白质在肌肉等其他组织中的沉积[18],与在大菱鲆[13]、淡水黑鲷(Hephaestus fuliginosus)[19]中的结果类似。美洲鳗鲡幼鱼肌肉水分含量降低的结果与胭脂鱼[11]和梭鱼(Chelon haematocheilus)[20]中的报道一致,这可能因为与蛋白质相比较,脂肪所含水分较少,动物体脂肪含量相对升高可导致鱼体水分降低[12]。3.3鱼油微胶囊粉对美洲鳗鲡幼鱼脂肪酸组成的影响研究表明,鱼体脂肪酸的组成与饵料密切相关[21]。鱼油微胶囊粉富含PUFA,尤其是ω-3系列的DHA、EPA和亚麻酸。随着鱼油微胶囊粉添加水平的提高,肌肉中ΣPUFA、EPA和亚麻酸显著增加,与其他鱼类以鱼油作为脂肪源的试验中有关脂肪酸组成的报道相似[14,22-23]。吉富罗非鱼(Oreochromis niloticus)[24]和杂交鲟幼鱼(Acipenser baerii Brandt ♀ × A. schrenckii Brandt ♂)[25]的研究中,鱼油水平增加,肌肉DHA含量升高,与本试验结果不同。一般认为,亚麻酸在Δ6去饱和酶、延长酶催化后进行β-氧化转化为DHA和EPA,可能美洲鳗鲡幼鱼将亚麻酸转化为DHA的能力有限,使肌肉中DHA的含量无显著变化[26]。此外,较高的亚油酸可能对亚麻酸转化成DHA产生抑制作用[27]。美洲鳗鲡幼鱼肌肉中ΣSFA和ΣMUFA显著降低与吉富罗非鱼[24]投喂高鱼油水平饵料后肌肉脂肪酸组成变化的结果一致;而添加鱼油对杂交鲟幼鱼全鱼[25]、大菱鲆肝脏[12]和大菱鲆肌肉[28]中ΣSFA和ΣMUFA含量无显著影响。美洲鳗鲡幼鱼肌肉中主要的SFA、MUFA分别是C16∶0和C18∶1,与以往的研究结果一致[29-30]。4结论本试验条件下,美洲鳗鲡幼鱼配合饵料中添加鱼油微胶囊粉具有一定的促生长效果,可提高全鱼的粗蛋白和粗脂肪水平,尤其增加肌肉中多不饱和脂肪酸的比例,改善全鱼及肌肉品质。
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