抗菌肽是动物机体在抵抗病原菌过程中产生的一种防御性小肽，广泛存在于各种动植物及微生物中，是天然免疫防御系统的重要组成部分，具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、促进细胞愈合和免疫调节等生物学功能[1-3]。抗菌肽作为动物饲料添加剂，能够抑制动物肠道内有害微生物的生长，改善动物的肠道功能，促进营养物质消化吸收，提高动物生长性能，具有抗菌谱广、分子量小、不产生耐药性、稳定性好、无环境污染等优点，是理想的抗菌剂之一[4-6]。抗菌肽在养猪生产中的研究与应用主要集中在提高仔猪生长性能和改善育肥猪肉品质方面[7-8]，对仔猪腹泻率、抗氧化和免疫功能的研究报道较少。因此，本研究探讨日粮中添加不同剂量抗菌肽对断奶仔猪生长性能、腹泻率、抗氧化性和免疫功能的影响，为抗菌肽在仔猪养殖中的合理利用提供参考。1材料与方法1.1试验材料与试验动物抗菌肽购自洛阳欧科拜克生物技术股份有限公司。120头30日龄、体重（7.24±0.21）kg、健康“杜×长×大”三元杂交仔猪由江苏通利猪场提供。1.2试剂盒超氧化物歧化酶（SOD）采用WST-1法测定，总抗氧化能力（T-AOC）采用ABTS法测定，谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）采用比色法测定，丙二醛（MDA）采用TBA法测定，猪免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、白介素-2（IL-2）、白介素-4（IL-4）采用ELISA法测定。上述试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。1.3试验设计与饲养管理试验选择120头30日龄仔猪，随机分为A、B、C、D组，每组3个重复，每个重复10头仔猪。预试期7 d，正式试验期28 d。预试期内，所有仔猪均饲喂基础日粮。正式试验期内，A、B、C、D组分别在基础日粮中添加0、0.1%、0.5%、1.0%的抗菌肽。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.010.T001表1基础日粮组成及营养水平（风干基础）原料组成含量/%营养水平合计100.0玉米56.0消化能/(MJ/kg)14.44小麦粉15.0粗蛋白/%18.21豆粕20.0粗脂肪/%4.29鱼粉4.0钙/%0.79大豆油2.0总磷/%0.56磷酸氢钙1.0石粉0.5食盐0.5预混料1.0注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 15 000 IU、VD3 3 000 IU、VB1 15 mg、VB2 5.0 mg、烟酸50 mg、D-泛酸20 mg、叶酸2.0 mg、Fe 100 mg、Cu 50 mg、Zn 60 mg、Mn 10 mg、I 0.3 mg、Se 0.3 mg。2.消化能为计算值，其余为实测值。整个试验过程中，所有仔猪均自由采食与饮水。定期消毒，保持环境卫生。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能分别称量仔猪的初重和末重，计算平均日增重。记录每个重复的饲料消耗量，计算平均日采食量。根据平均日采食量和平均日增重计算料重比。平均日增重=(末重-初重)试验天数(1)平均日采食量=饲料消耗量/(每组仔猪数×试验天数)(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2腹泻率每日观察试验仔猪的腹泻情况，计算腹泻率。腹泻率=(腹泻头数×腹泻天数)/(试验头数×试验天数)×100%(4)1.4.3抗氧化指标试验结束后，利用一次性5.0 mL注射器依次对每头试验仔猪采集血液4.0 mL，常规方法分离血清。利用SOD、T-AOC、GSH-Px、MDA测定试剂盒依次测定血清中的T-AOC、SOD、GSH-Px活性及MDA含量。1.4.4免疫指标利用IgG、IgA、IgM、IL-2、IL-4 ELISA检测试剂盒依次测定血清中的IgG、IgA、IgM、IL-2、IL-4含量。1.5数据统计与分析试验数据采用SPSS 17.0软件进行单因素方差分析，采用Duncan氏法进行多重比较，结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1抗菌肽对断奶仔猪生长性能的影响（见表2）由表2可知，B组仔猪的末重、平均日增重、平均日采食量显著高于A组（P0.05）。C组、D组的末重、平均日增重、平均日采食量显著高于A组、B组（P0.05），C组、D组的料重比显著低于A组、B组（P0.05）。C组与D组仔猪的各指标差异均不显著（P0.05）。结果表明，随着断奶仔猪日粮中抗菌肽添加剂量的增加，仔猪的生长性能逐步提高，但0.5%和1.0%添加剂量之间无显著差异。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.010.T002表2抗菌肽对断奶仔猪生长性能的影响组别初重/kg末重/kg平均日增重/g平均日采食量/g料重比A组7.24±0.2117.55±0.41a294.57±5.24a497.87±8.97a1.69±0.03bB组7.26±0.2018.19±0.44b312.29±5.74b518.54±9.12b1.66±0.03bC组7.22±0.2518.76±0.43c329.71±5.84c534.47±9.75c1.62±0.03aD组7.25±0.2118.89±0.40c332.57±5.81c536.74±9.65c1.61±0.03a注：同列数据肩标字母不同表示差异显著（P0.05），字母相同或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2抗菌肽对断奶仔猪腹泻率的影响（见表3）由表3可知，随着断奶仔猪日粮中抗菌肽添加剂量的增加，断奶仔猪的腹泻率显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.010.T003表3抗菌肽对断奶仔猪腹泻率的影响组别腹泻率A组10.86±0.98dB组6.57±0.57cC组2.57±0.14bD组2.04±0.12a%2.3抗菌肽对断奶仔猪血清抗氧化指标的影响（见表4）由表4可知，与A组相比，B组仔猪的血清SOD活性显著升高（P0.05），MDA含量显著降低（P＜0.05）。C组、D组仔猪的血清SOD活性、T-AOC显著高于A组、B组（P0.05）。C组、D组仔猪的血清MDA含量显著低于A组（P0.05）。C组与D组仔猪的各项抗氧化指标差异均不显著（P0.05）。结果表明，随着断奶仔猪日粮中抗菌肽添加剂量的增加，仔猪的抗氧化功能逐步改善，但0.5%和1.0%抗菌肽添加剂量之间无显著差异。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.010.T004表4抗菌肽对断奶仔猪血清抗氧化指标的影响组别SOD/(U/mL)T-AOC/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)MDA/(μmol/L)A组63.52±1.55a6.98±0.35a541.25±10.21a4.21±0.29cB组65.24±1.61b7.21±0.36a546.65±11.25ab3.80±0.28bC组67.34±1.66c7.87±0.41b555.54±10.39bc3.61±0.24abD组67.98±1.54c7.97±0.39b559.85±10.54c3.42±0.28a2.4抗菌肽对断奶仔猪血清免疫指标的影响（见表5）由表5可知，与A组相比，B组仔猪的血清IgG含量显著升高（P0.05），C组、D组仔猪的血清IgG、IgA、IL-2含量均显著升高（P0.05）。C组与D组仔猪的各项免疫指标差异均不显著（P0.05）。结果表明，随着断奶仔猪日粮中抗菌肽添加剂量的增加，仔猪的免疫功能逐步改善，但0.5%和1.0%抗菌肽添加剂量之间无显著差异。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.010.T005表5抗菌肽对断奶仔猪血清免疫指标的影响组别IgG/(g/L)IgA/(g/L)IgM/(g/L)IL-2/(ng/L)IL-4/(ng/L)A组11.25±0.75a4.11±0.42a1.64±0.18154.78±4.11a214.58±7.65B组13.21±0.84b4.32±0.44ab1.71±0.20156.54±4.22ab216.35±8.14C组14.15±0.79c4.62±0.39bc1.75±0.19159.74±4.18b217.54±7.89D组14.45±0.71c4.75±0.41c1.77±0.18160.87±4.35b217.48±8.253讨论3.1抗菌肽对断奶仔猪生长性能的影响动物肠道对营养物质的消化吸收与肠道的健康状况密切相关，而动物肠道的形态、肠道内有害菌的丰度、肠道的渗透压等均会影响动物肠道的健康状况。饲料中的抗菌肽进入动物肠道后能够富集在空肠和回肠中，通过刺激空肠和回肠上皮细胞的增殖促进绒毛生长，改善动物肠道的形态[9]。抗菌肽能够抑制有害微生物的生长，改善动物的肠道微生物菌群平衡，从而促进肠道对营养物质的消化吸收，改善动物生长性能。梁秀丽等[7]研究发现，初生仔猪日粮中添加10 g/kg抗菌肽能够促进仔猪小肠形态发育，改善盲肠微生物菌群，提高仔猪生长性能。在本研究中，断奶仔猪日粮中添加0.5%和1.0%抗菌肽均能够显著提高断奶仔猪的末重、平均日增重、平均日采食量，降低料重比，改善断奶仔猪的生长性能，与梁秀丽等[7]的研究结果一致。但受到抗菌肽来源、纯度、活性以及猪的品种、日龄、饲养管理水平等方面差异的影响，不同试验确定的抗菌肽添加剂量存在较大差异。本研究的条件下，断奶仔猪基础日粮中添加0.5%和1.0%抗菌肽均能够显著改善仔猪的生长性能，且0.5%和1.0%添加剂量的作用效果在统计学上无显著差异。综合考虑到抗菌肽的添加成本，选择0.5%作为使用剂量。3.2抗菌肽对断奶仔猪腹泻率的影响仔猪腹泻是养猪生产中的常见病和多发病。仔猪在断奶前后，消化系统尚未发育成熟，整体消化功能比较弱。断奶过程中饮食结构、饲养环境等急剧改变造成的应激，极易引发断奶仔猪肠道微生物菌群紊乱，导致断奶仔猪腹泻，严重时还会导致断奶仔猪死亡[10]。抗菌肽进入动物肠道后能够抑制肠道内有害细菌的增殖，促进有益菌的生长繁殖，通过控制有益菌与有害菌的数量来调节肠道内微生物菌落平衡，保障肠道健康，从而减少腹泻的发生[11-12]。本研究中，断奶仔猪日粮中添加0.1%、0.5%和1.0%抗菌肽均能够显著降低断奶仔猪的腹泻率，且随着抗菌肽添加剂量的逐步增加，断奶仔猪的腹泻率迅速下降，表明抗菌肽能够增强断奶仔猪的肠道消化功能，降低仔猪腹泻率。本研究的试验结果与上述研究结果一致。3.3抗菌肽对断奶仔猪抗氧化功能的影响动物机体的抗氧化能力与动物机体的健康状况密切相关，当动物机体的组织器官受到损伤或处于病理状态，体内会产生大量的羟基自由基和脂质过氧化产物，动物机体的抗氧化系统会发生系列应对反应，直接影响血清中的抗氧化指标[13]。T-AOC综合反映动物机体的整体抗氧化能力。SOD、GSH-Px能够特异性抑制羟基自由基的形成，对动物机体发挥抗氧化能力具有重要作用。血清中SOD和GSH-Px活性高表明动物机体的抗氧化能力强。MDA是氧化反应产生的脂质过氧化终产物，其含量反映动物机体的脂质过氧化损伤程度。血清中MDA含量低表明动物机体的抗氧化能力强[14]。本研究中，断奶仔猪日粮中添加0.1%抗菌肽能够显著提高血清中SOD活性，降低血清中MDA含量；添加0.5%和1.0%抗菌肽均能够显著提高血清中T-AOC、SOD、GSH-Px活性，降低血清中MDA含量。随着抗菌肽添加剂量的增加，仔猪血清中的T-AOC、SOD、GSH-Px活性逐渐增强，MDA含量逐渐降低，表明抗菌肽能够提高断奶仔猪的抗氧化能力。3.4抗菌肽对断奶仔猪免疫功能的影响免疫球蛋白（Ig）是一类由浆细胞产生的具有抗体活性的球蛋白，其在动物机体的体液免疫反应中发挥独特作用[15]。IgM最早生成，但持续时间较短；IgG含量最高，在动物机体抗感染过程中发挥决定性作用；IgA主要存在于黏膜免疫反应中。细胞因子是由免疫细胞产生的一类高活性小分子多肽，其可以在介导机体免疫应答和炎症反应中发挥独特作用[16]。IL-2能够刺激T细胞生长、增殖、分化，是重要的免疫增强因子；IL-4能够促进B细胞分裂增殖，增强TC细胞和巨噬细胞活性。本研究中，断奶仔猪日粮中添加0.1%抗菌肽能够显著提高血清中IgG含量；添加0.5%和1.0%抗菌肽均能够显著提高血清中IgG、IgA、IL-2含量。随着抗菌肽添加剂量的增加，仔猪血清中的IgG、IgA、IL-2含量逐渐增加，表明抗菌肽能够提高断奶仔猪的抗感染力和机体免疫力。4结论断奶仔猪基础日粮中添加0.5%和1.0%抗菌肽均能够显著改善断奶仔猪的生长性能、腹泻率、抗氧化性和免疫功能。最适添加剂量为0.5%。