2020年开始,我国全面禁止在动物饲料中添加促生长类的药物[1]。多糖类物质因其纯天然、几乎无残留等特性受到广泛关注,多糖可以增强动物免疫力和降低料重比。张才等[2]发现,甘草多糖可以改善肉鸡生长性能,提高蛋白质的利用率,改善肝脏代谢和血脂。马齿苋作为饲料添加剂,可以显著提高仔猪日增重,降低腹泻率[3],增强雏鸡免疫力和降低料重比[4]。山豆根多糖(Sophora subprosrate polysaccharide,SSP)是从山豆根中提取的天然活性物质,具有抗炎、抗病毒和增强机体免疫的作用,且无毒、低残留[5-7]。实验室前期发现,SSP可以增强机体免疫力,促进动物生长。本试验研究高于临床推荐剂量的SSP对罗非鱼的安全性,以期发现药物的毒副作用,综合评价药物的疗效以及在临床应用中的注意事项,为临床合理用药提供参考。1材料与方法1.1试验材料1.1.1试验药物与饵料山豆根多糖(SSP)由广西大学动物科学技术学院药理实验室分离提取,为白色粉末;易溶于水,在乙醇中几乎不溶;使用碱性酒石酸铜鉴定呈棕红色沉淀;单糖含量为9.36%;干燥失重为3.25%;重金属10 mg/kg;蛋白质检测未见浑浊;多糖含量为83.58%。基础饵料为罗非鱼膨化配合饲料,购自通威股份有限公司(粗蛋白≥28.0%、粗脂肪≥3.0%、粗纤维≤10.0%、粗灰分≤13%、赖氨酸≥1.3%、钙0.5%~2.5%、总磷0.6%~2.0%、氯化钠0.3%~1.5%、水分≤12.0%)。每15 d根据各试验组罗非鱼实际总质量3%的投喂量称取各组基础饵料,再按各试验组投料量的0.2%、0.6%、1.0%和2.0%分别称取相应的山豆根多糖,分别使用灭菌ddH2O溶解后均匀喷洒于各试验组饵料表面,辅以2%水产饲料黏合剂(主要成分为α-淀粉和纤维素)混匀,39 ℃烘干,分装,阴凉干燥保存。1.1.2试剂及仪器组织固定液(广州维格斯生物技术有限公司)、苏木素伊红染色液(Solarbio)、无水乙醇AR级和二甲苯(国药集团化学试剂有限公司)、瑞士-吉姆萨复合染色液(北京雷根生物技术有限公司)。Sysemx2100全自动血液分析仪(日本SYSMEX公司);Hltachi7180全自动生化分析仪(日本Hitachi公司);脱水机、包埋机(武汉俊杰电子有限公司);病理切片机(徕卡有限公司);组织摊片机(浙江省金华市科迪仪器设备有限公司);正置光学显微镜(日本尼康有限公司);DS-U3成像系统(日本尼康有限公司)等。1.2试验设计从广西壮族自治区水产科学研究院国家级罗非鱼良种场随机选取225尾处于快速生长期、体重为(77.90±16.07)g的吉富罗非鱼,移至广西壮族自治区水产科学研究院水族楼,随机分为5个组。基础饵料对照组,临床推荐剂量1倍、3倍、5倍和10倍的0.2%(AA组)、0.6%(BB组)、1.0%(CC组)和2.0%(DD组)山豆根多糖混饲组,每个组3个重复,每个重复15尾鱼,分别独立饲养于67 cm×67 cm×84 cm的15个圆桶内,驯养7 d后开始试验。每天分2次(10:00,18:00)进行投喂,上午投料前换水2/3,每次投喂后0.5 h回收残饵,烘干后称重,记录试验鱼的摄食情况。试验期30 d,试验期间各桶试验鱼水温为(27.5±1.5)℃,除喂食外日夜不间断增氧,每天观察并记录鱼活动情况。每天观察并记录鱼的活动情况,定时对罗非鱼进行体征测定,根据体重变化和采食情况相应地调整投喂量。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能试验开始前1 d和给试验开始后第15 d和第30 d,分别对各组罗非鱼进行体长和体重测量:称重前12 h停止投饵,称重时毛巾吸干体表水分。计算增重率、特定生长率和饲料系数。增重率(WGR)=(W1-W0)/W0×100%(1)特定生长率(SGR)=[(lnW1-lnW0)/(t1-t0)]×100%(2)饲料系数(FCR)=F/(W1-W0)(3)式中:W0为试验开始时鱼体重(g);W1为试验结束时鱼的体重(g);F为饲料摄入量(g);t为饲养时间(d)。1.3.2血液生理生化指标给药后第15 d和30 d,对罗非鱼禁食12 h,从各试验组随机抽取15尾罗非鱼放入40 μg/L的MS-222水溶液中麻醉,尾静脉采血,每条鱼的血液分为2份:1份移至含有ETDA-K2的抗凝采血管中,轻轻混匀,正置,4 h内进行全血常规生理指标测定;1份分装于无菌EP管内,制取血清,用于血清生化指标测定。利用Sysemx2100全自动血液分析仪对抗凝全血进行以下血常规生理指标的测定:红细胞计数(RBC)、白细胞计数(WBC)、血红蛋白(HGB)、血小板计数(PLT)、血细胞比容(HCT)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞分布宽度变异系数(RDW.CV)、血小板分布宽度(PDW)、平均血小板体积(MPV)、大血小板比率(P.LCR)、淋巴细胞(LYMPH)、单核细胞(MONO)、中性粒细胞(NEUT)等。利用Hltachi7180全自动生化分析仪对罗非鱼血清进行以下血液生化指标的测定:谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)、总胆红素(TBIL)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(CHOL)、碱性磷酸酶(ALP)、球蛋白(GLO)。1.3.3脏器指数及组织切片制备试验第15 d和30 d,剖取脾脏和肝脏,生理盐水洗净血液,滤纸吸干,称重并记录。称重后10%福尔马林固定,制取组织切片后进行H.E.染色观察。脾脏指数=脾重⁄体重×100%(4)肝脏指数=肝重⁄体重×100%(5)1.4数据统计与分析采用IBM SPSS Statistics V26.0软件对数据进行单因素方差分析和LSD多重比较,结果以“平均值±标准差”表示。P0.05表示差异显著,P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1试验期临床观察试验过程中各组未见罗非鱼死亡。SSP各个剂量组罗非鱼的活动、摄食、体色、排泄等均良好,与基础饵料空白对照组的罗非鱼无显著差异。2.2山豆根多糖对罗非鱼生长性能的影响(见表1)由表1可知,与对照组相比,在0~15 d阶段,0.2% SSP组罗非鱼的FCR显著高于其他各组(P0.01);整个试验期,1.0% SSP组罗非鱼的FCR显著高于对照组和0.6% SSP组。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.014.T001表1山豆根多糖对罗非鱼生长性能的影响项目对照组0.2% SSP组0.6% SSP组1.0% SSP组2.0% SSP组0~15 dWGR/%46.80±20.5573.82±59.2352.57±34.7960.65±55.9554.69±46.78SGR/(%/d)2.61±0.912.88±1.402.62±1.192.98±2.332.84±1.85FCR0.95±0.06Bb1.28±0.10Aa0.97±0.06Bb1.08±0.06ABb1.04±0.12Bb16~30 dWGR/%42.07±25.52Aa10.59±40.89Ab37.21±35.15Aab34.15±36.72Aab40.79±44.89AabSGR/(%/d)2.18±1.180.78±2.242.06±1.541.96±1.831.62±1.69FCR0.98±0.11Bc0.99±0.03Bc1.19±0.05ABab1.34±0.08Aa1.12±0.17ABbc0~30 dWGR/%112.54±35.7280.15±60.14102.63±39.11105.18±63.83111.94±73.82SGR/(%/d)2.39±0.531.72±1.162.29±0.622.24±1.022.23±0.57FCR1.53±0.04Ab1.79±0.21Aa1.54±0.15Ab1.83±0.09Aa1.63±0.10Aab注:同行数据肩标字母相同或无字母表示差异不显著(P0.05),小写字母不同表示差异显著(P0.05),大写字母不同表示差异极显著(P0.01);表2~表5与此同。2.3山豆根多糖对罗非鱼血液生理指标和血清生化指标的影响2.3.1山豆根多糖对罗非鱼血液生理指标的影响(见表2、表3)由表2可知,在0~15 d阶段,SSP各剂量组罗非鱼的RBC均显著高于对照组(P0.05),HCT均极显著高于对照组(P0.01)。与对照组相比,1.0% SSP组罗非鱼的WBC显著升高(P0.05),0.6% SSP组极显著下降(P0.01)。0.2% SSP组罗非鱼的PLT极显著高于其他各试验组(P0.01)。0.6%和1.0% SSP组罗非鱼的PDW显著高于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.014.T002表2山豆根多糖对罗非鱼血液生理指标的影响(0~15 d)项目对照组0.2% SSP组0.6% SSP组1.0% SSP组2.0% SSP组WBC/(×109/L)4.38±2.21Ab7.62±5.65Aab3.26±2.34Bd8.19±5.21Aa5.65±2.79AabRBC/(×1012/L)1.63±0.31Ab1.82±0.27Aa1.75±0.26Aa1.89±0.24Aa1.79±0.22AaHGB/(g/L)64.42±8.0666.73±5.7869.15±4.6367.40±6.2364.73±3.95HCT/%28.78±4.12Bb31.87±3.48Aa31.77±3.58Aa33.37±3.14Aa31.11±1.73AaMCV/fL178.08±10.36177.36±11.33182.66±11.10177.29±9.56174.50±11.69MCH/pg40.48±7.7141.62±15.1840.22±5.7335.93±3.8942.35±19.19MCHC/(g/L)226.00±30.56232.82±77.47219.31±19.81202.73±15.13243.00±112.62PLT/(×109/L)4.09±1.81Bb8.60±3.34Aa4.54±1.51Bb4.79±1.63Bb4.00±1.60BbRDW.CV/%13.24±3.1714.67±2.2313.53±2.7113.08±2.7813.65±3.46PDW/fL8.20±1.88Ab9.97±2.94Aab10.43±1.83Aa10.69±2.19Aa9.89±3.18AabMPV/fL10.68±0.9610.74±0.5510.33±1.1210.64±1.209.76±1.90P.LCR/%30.72±7.5931.56±4.8128.83±6.7332.21±8.5530.49±8.13由表3可知,第16~30 d阶段,0.6%和2.0% SSP组罗非鱼的WBC显著低于对照组(P0.05)。0.6% SSP组罗非鱼的HGB、MCV极显著低于其他各组(P0.01),MCH显著低于其他各组(P0.05),HCT显著低于1.0% SSP组和对照组(P0.05),MPV极显著高于其他各组(P0.01)。2.0% SSP组罗非鱼的RDW.CV显著低于其他各组(P0.05)。而0.6% SSP组罗非鱼的PLT显著高于1.0%和2.0% SSP组(P0.05)。0.2% SSP组罗非鱼的P.LCR显著低于其他组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.014.T003表3山豆根多糖对罗非鱼血液生理指标的影响(16~30 d)项目对照组0.2% SSP组0.6% SSP组1.0% SSP组2.0% SSP组WBC/(109/L)7.23±2.76Aa5.34±3.69Aab3.20±1.05Ab5.07±2.31Aab3.98±1.15AbLYMPH/%80.32±16.81Aa78.42±14.81Aa82.38±14.14Aa63.90±19.21Ab76.47±11.95AaMONO/%12.60±5.3814.40±9.1415.06±2.6914.13±6.0913.49±6.82NEUT/%15.40±11.87Aabc30.50±16.86Aa14.45±2.83Ab29.56±8.13Aa15.68±4.38AabcRBC/(1012/L)1.91±0.231.73±0.371.80±0.231.91±0.251.83±0.29HGB/(g/L)66.71±5.94Aa65.67±5.66Aa59.09±9.18Bb69.62±6.51Aa68.70±4.69AaHCT/%34.03±3.39Aa29.90±6.89Aab28.36±4.03Ab33.37±3.89Aa31.37±4.82AabMCV/fL178.74±6.22Aa172.61±11.02Aa157.88±11.42Bb175.42±10.99Aa171.45±6.97AaMCH/pg35.09±1.76Aa40.47±13.90Aa32.90±3.10Ab36.80±3.79Aa38.82±10.43AaMCHC/(g/L)196.43±5.91236.00±88.78208.18±10.51209.46±15.18208.00±8.41PLT/(109/L)4.14±1.46Aab3.89±2.26Aab5.33±2.65Aa3.33±1.50Ab2.78±0.83AbRDW.CV/%12.76±0.98Aa13.06±1.89Aa12.99±1.57Aa13.63±2.41Aa11.85±1.27AbPDW/fL10.13±2.959.21±1.8810.42±2.829.35±2.128.14±2.96MPV/fL10.80±0.76Bb9.64±0.97Bb11.25±0.64Aa10.13±1.04Bb10.03±1.23BbP.LCR/%32.86±6.52Aab25.81±5.75Ac34.90±4.71Aa29.73±6.39Aab27.95±9.32Ab2.3.2山豆根多糖对罗非鱼血清生化指标的影响(见表4、表5)由表4可知,第0~15 d阶段,SSP各剂量组罗非鱼血清中GLO、CREA与SSP剂量升高而递增,其中0.2% SSP组显著低于其他各组(P0.05)。罗非鱼血清ALT、ALP活性随SSP剂量升高而递增,但SSP各剂量组的ALT活性均极显著低于对照组(P0.01),ALP活性均极显著高于空白对照组(P0.01)。SSP各剂量组的AST活性均极显著低于对照组(P0.01)。0.6% SSP组的罗非鱼血清TG含量显著低于其他各组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.014.T004表4山豆根多糖对罗非鱼血清生化指标的影响(0~15 d)项目对照组0.2% SSP组0.6% SSP组1.0% SSP组2.0% SSP组TBIL/(mg/L)5.1±2.34.5±2.24.3±2.73.3±2.44.2 ±2.0TP/(g/L)43.14±5.1940.37±5.1241.05±3.8643.26±5.2444.78±7.13ALB/(g/L)12.26±2.9811.31±2.5411.39±2.2112.30±2.8412.93±2.90GLO/(g/L)30.88±2.92Aa29.06±2.92Ab29.65±2.03Aa30.96±2.90Aa31.85±4.43AaALT/(IU/L)53.82±15.33Aa29.45±7.06De31.29±6.01Cc37.00±7.40BCbc40.82±9.04BCbdAST/(IU/L)195.67±151.98Aa50.56±20.96Bb61.42±16.12Bb54.22±15.00Bb61.75±21.14BbALP/(IU/L)18.33±6.61Bc21.00±4.64Ab21.29±3.60Ab24.23±6.75Aab27.33±11.36AaBUN/(mmol/L)0.38±0.120.57±0.160.51±0.123.79±12.440.55±0.08CREA/(mol/L)6.50±4.14Aa5.18±1.33Ab7.00±3.51Aa7.14±3.53Aa8.83±4.99AaCHOL/(mmol/L)4.03±0.624.54±0.884.05±0.594.13±0.754.27±0.96TG/(mmol/L)3.29±1.93Aa4.64±2.04Aa3.21±1.39Ab3.43±1.65Aa3.62±1.93Aa由表5可知,第16~30 d阶段,0.2%和1.0% SSP组罗非鱼血清GLO含量显著低于对照组(P0.05)。SSP各剂量组的罗非鱼血清BUN含量均极显著高于对照组(P0.01),CREA与对照组差异不显著(P0.05),其中2.0% SSP组极显著高于0.6%和1.0% SSP组(P0.01)。1.0%和2.0% SSP组的罗非鱼血清CHOL含量显著低于对照组(P0.05);2.0% SSP组的TG含量显著低于其他各组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.014.T005表5山豆根多糖对罗非鱼血清生化指标的影响(16~30 d)项目对照组0.2% SSP组0.6% SSP组1.0% SSP组2.0% SSP组TBIL/(mg/L)5.5±2.85.6±3.24.4±2.74.4±2.24.3±1.9TP/(g/L)45.53±8.9241.18±5.2642.75±4.7541.65±5.4141.50±6.49ALB/(g/L)12.94±3.4811.74±2.8312.27±2.7112.09±2.9711.43±3.11GLO/(g/L)32.58±5.58Aa29.22±2.84Ab30.47±2.95Aab29.56±2.80Ab30.08±3.55AabALT/(IU/L)28.92±13.5537.75±24.7936.36±14.9138.43±7.8634.64±8.51AST/(IU/L)48.33±19.7459.18±45.8460.85±44.1777.21±44.0674.90±44.84ALP/(IU/L)25.40±6.6030.36±13.1928.60±14.0725.58±9.8927.92±8.85BUN/(mmol/L)0.39±0.12Bc0.53±0.24Aab0.45±0.10Ab0.47±0.12Aab0.58±0.14AaCREA/(mol/L)3.00±1.33ABb3.75±4.81ABb2.57±1.79Bb2.92±2.07Bb6.64±4.63AaCHOL/(mmol/L)5.14±1.40Aa4.49±0.99Aab4.37±0.99Aab3.99±1.33Ab4.03±1.60AbTG/(mmol/L)5.44±3.51Aa4.77±3.05Aa4.25±2.62Aa3.55±2.62Aa2.63±1.80Ab2.4山豆根多糖对罗非鱼免疫器官指数的影响(见表6)由表6可知,SSP混饲组罗非鱼的肝脏指数在0~15 d和16~30 d两个阶段,均呈现随剂量的增加先升高再降低的趋势,但与对照组差异不显著(P0.05)。SSP混饲组罗非鱼在第0~15 d阶段,0.6% SSP组罗非鱼的脾脏指数显著低于1.0% SSP组(P0.05),但与对照组差异不显著(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.014.T006表6山豆根多糖对罗非鱼免疫器官指数的影响组别肝脏指数脾脏指数0~15 d16~30 d0~15 d16~30 d对照组2.40±0.502.44±0.390.17±0.07Aab0.21±0.070.2% SSP组2.54±0.462.40±0.300.15±0.05Aab0.20±0.060.6% SSP组2.78±0.512.78±0.790.15±0.07Ab0.22±0.111.0% SSP组2.45±0.592.51±0.510.20±0.07Aa0.20±0.062.0% SSP组2.51±0.712.39±0.600.15±0.07Aab0.18±0.08注:同列数据肩标字母相同或无字母表示差异不显著(P0.05),小写字母不同表示差异显著(P0.05),大写字母不同表示差异极显著(P0.01)。%2.5山豆根多糖对罗非鱼肝组织形态结构的影响(见图1)剖检未发现各组罗非鱼脏器有明显病变。由图1可知,对照组的正常肝组织细胞结构清晰且排列有序,细胞轮廓清楚,呈不规则多边形,细胞核深染为蓝紫色于细胞中心或一侧,细胞质均匀且颗粒明显(图1a)。0.2%、0.6%和2.0% SSP组的肝组织出现肝细胞轻微水肿,空泡变性,个别细胞核偏移(图1b、1、图1e),1.0% SSP组罗非鱼肝组织病变最为严重,出现严重的组织水肿现象,大量的肝细胞发生空泡变性,细胞核严重偏移,少量细胞核萎缩甚至消失,细胞膜尚存,而细胞质消失,可见中央静脉充血等病理现象(图1d)。图1罗非鱼肝脏组织显微结构10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.014.F1a1(a)对照组肝脏切片10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.014.F1a2(b)0.2% SSP组肝脏切片10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.014.F1a3(c)0.6%SSP组肝脏切片10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.014.F1a4(d)1.0% SSP组肝脏切片10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.014.F1a5(e)2.0% SSP组肝脏切片注:1.N为细胞核;CM为细胞膜;NM为细胞核偏移;VD为空泡变性。3讨论3.1山豆根多糖对罗非鱼生长性能的影响本试验中,SSP混饲在前期能够促进其生长,在0~15 d阶段,0.2% SSP的1倍剂量组的促生长效果最佳,饲料系数FCR最高;进入16~30 d,0.2% SSP组的FCR又降低至正常水平,SSP各剂量组罗非鱼的FCR随剂量升高而增加,而WGR和SGR低于空白组,这一结果与许霄霄[8]、刘康等[9]研究结果类似。原因是常规罗非鱼饲料中糖类物质的最适添加量为34%~41%[10],而本试验在常规饵料的基础上直接添加高剂量的SSP,过多的糖分进入罗非鱼体内可能会以热量的形式大量散失掉,不利于罗非鱼的生长发育。所以,若要以山豆根多糖作为罗非鱼的促生长剂,只能在前期少量的添加,临床最佳剂量为按饲料质量的0.2%添加。3.2山豆根多糖对罗非鱼血液生理指标的影响血液生理指标能够反映鱼类当下的营养、健康状况[11]。本试验中,不同剂量的SSP对各项血液生理指标存在不同程度的影响,可以使血液中RBC、WBC、PLT先升高后降低,HGB、MCV和RDW.CV在后期急剧下降,其中0.6% SSP组的HGB和HCT显著低于空白组。原因可能是前期的SSP被罗非鱼快速吸收消化,机体的造血能力提升;后期过高的糖分造成的营养胁迫,增加了脏器的负荷,抑制了机体造血机能,具体原因还有待进一步研究。3.3山豆根多糖对罗非鱼血清生化指标的影响GLO可以反映鱼类肝脏的代谢与疾病情况。吴宏玉[12]研究表明,高糖饲料会增加罗非鱼的肝胆负荷,使GLO含量升高。本试验结果显示,除0.2% SSP组GLO显著低于空白组GLO外(P0.05),其余剂量组GLO与对照组GLO差异不显著。研究表明,高剂量的山豆根多糖不会增加罗非鱼的肝胆负荷。ALT和AST在体内的活性可以反映肝脏内氨基酸代谢的强度,从而推断肝脏的生理状态。吴凡等[13]和李鸣霄等[14]研究发现,高糖饲料会造成吉富罗非鱼的肝损伤,使ALT和AST活性显著升高。本试验中,15 d时,各试验组ALT和AST活性均极显著低于对照;30 d时,各SSP剂量组罗非鱼ALT和AST活性高于对照组。结果表明,高剂量的SSP在短时间内未对罗非鱼肝脏造成损伤。动物的快速生长阶段,血清中ALP活性会显著升高[15]。本试验中,15 d时,药物组罗非鱼血清中的ALP活性与SSP剂量成正比,且SSP各剂量组极显著高于对照组,后期SSP各剂量组ALP活性又逐渐恢复至正常水平。研究表明,SSP前期能够通过提高罗非鱼体内的ALP活性,以促进其快速生长。CREA与BUN含量升高表明肾脏异常[16]。本试验中,第15 d,SSP各剂量组罗非鱼血清中的CREA与SSP剂量成正比,除0.2% SSP剂量组显著低于对照组外,其余剂量组与对照组差异不显著,30 d时SSP各剂量组CREA与对照差异不显著。SSP各剂量组罗非鱼血清中的BUN在第15 d与对照组并无差异,到30 d时SSP各剂量组BUN极显著高于对照组。研究表明,高剂量的SSP在前期能够改善罗非鱼的肾功能,但长期摄入高剂量的SSP可能会对肾脏造成损伤。CHOL和TG含量升高会导致一系列代谢及内分泌异常的疾病[17-18]。本试验中,前期0.6% SSP组的血清TG含量显著降低,后期2.0% SSP组效果最佳。高剂量的SSP在试验后期能够显著降低罗非鱼血清CHOL含量,以1.0%和2.0% SSP组效果最佳。研究表明,高剂量SSP能够在一定程度上降低罗非鱼的血脂,维持机体正常脂代谢。3.4山豆根多糖对罗非鱼肝脏组织的影响脏器指数可以反映脏器功能,推断药物的药效及毒副作用[19]。本试验中,高剂量的SSP有增加罗非鱼肝脏、脾脏指数的趋势,但与对照组差异不显著。同时,长期过多地摄入SSP会增加肝脏的负荷,可能会降低肝功能。肝细胞是组成肝脏最主要的细胞。本试验中,1.0% SSP组肝组织出现严重的空泡化,而2.0% SSP组肝细胞核偏移严重,可能因为长期摄食高剂量的SSP饲料会对罗非鱼肝组织造成肝脏损伤。4结论山豆根多糖混饲对吉富罗非鱼的靶动物安全试验结果表明,以投料量的0.2%作为临床推荐剂量,在该剂量的3倍以内应用到罗非鱼上是安全无毒的。

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