随着生猪养殖模式的规模化、集约化发展,仔猪一般在21日龄断奶。仔猪在断奶阶段会因日粮的改变、免疫获取方式的改变及环境的改变产生较为严重的断奶应激,使断奶仔猪的生长发育受阻、严重腹泻、肠道功能严重受损[1]。由于断奶仔猪肠道还未发育完整,断奶应激也会使仔猪产生严重的氧化应激[2-3]。研究发现,断奶应激会使仔猪肠道黏膜的超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性减弱及基因表达量降低,丙二醛含量增加,进而导致断奶仔猪肠道功能紊乱[4]。果寡糖属于益生元中的非消化性碳水化合物,是低聚糖[5]。果寡糖可以不被动物胃肠道内的消化酶分解,反而被动物后肠道中的乳酸杆菌、双歧杆菌等发酵,可以促进动物肠道内有益菌菌群的定植和繁殖,抑制有害菌的生长[6]。研究表明,在动物日粮中添加适量的果寡糖可以改善动物肠道健康,促进幼龄动物肠道发育,提高机体免疫力,调节脂类代谢,提高生产性能等[7-10]。目前,果寡糖已广泛应用于奶牛、羊、肉鸡、猪等养殖生产中,但其在断奶仔猪日粮中研究应用较少。因此,本试验以断奶仔猪为研究对象,探讨日粮中添加不同水平的果寡糖对其生长性能、免疫功能及肠道菌群的影响,并确定果寡糖在日粮中的最适添加剂量,以期为果寡糖合理地应用于断奶仔猪日粮中提供参考。1材料与方法1.1试验材料本试验所用果寡糖购自日本明治制果有限公司,其有效含量≥98%。1.2试验设计试验选取240头21日龄、体重相近、健康的断奶仔猪,按照单因素完全随机设计,分为4个组,每组6个重复,每个重复10头仔猪。对照组断奶仔猪饲喂玉米-豆粕型基础日粮,试验1组、试验2组、试验3组断奶仔猪分别饲喂添加0.1%、0.2%、0.3%果寡糖的基础日粮。预试期7 d,正式试验期28 d。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.011.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米62.81消化能/(MJ/kg)13.45豆粕20.00粗蛋白/%18.06麸皮5.50钙/%0.65胚芽粕5.00总磷/%0.67鱼粉1.50有效磷/%0.35豆油1.20赖氨酸/%0.95食盐0.30苏氨酸/%0.59DL-蛋氨酸0.35蛋氨酸+半胱氨酸/%0.60L-赖氨酸(98%)0.33磷酸氢钙1.16石粉0.65预混料1.20注:1.预混料为每千克日粮提供:VA 8 500 IU、VB1 12 mg、VB2(核黄素)2.85 mg、VB6 8 mg、VB12 0.10 mg、VD3 100 IU、VE 20 IU、VK3 2.8 mg、生物素0.32 mg、叶酸0.60 mg、烟酸(尼克酸)18 mg、铜40 mg、铁100 mg、锰30 mg、锌80 mg、碘0.5 mg、硒0.25 mg。2.营养水平均为计算值。1.3饲养管理试验开始前,试验猪舍利用卫可清洗消毒。所有试验仔猪在同一试验猪舍内,试验期间,让试验仔猪自由采食、自由饮水。仔猪的免疫程序严格按照猪场的日常管理进行免疫。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能试验开始第1 d和最后1 d,断奶仔猪禁食12 h,空腹称量体质量用于计算平均日增重。试验期间准确记录各组试验仔猪的采食量,用于计算平均日采食量和料重比。并观察腹泻仔猪情况,用于计算腹泻率。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=总采食量/(试验天数×仔猪头数)(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2免疫指标试验28 d,仔猪禁食12 h,采用真空采血管对仔猪前腔静脉采血15 mL。室温静止2 h,3 500 r/min离心10 min,使用移液枪将上层血清吸收于EP管中,-20 ℃保存,备用。测定仔猪血清的免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。检测步骤参照南京建成生物工程研究所生产的试剂盒说明书。1.4.3肠道菌群指标试验结束当天,每个重复随机选择2头仔猪进行屠宰,收集盲肠和回肠中内容物,放置于无菌EP管中,依据参考文献[11]的方法分析肠道菌群含量。1.5数据统计与分析试验数据采用Excel 2020统计整理,采用SPPS 22进行单因素方差分析,采用邓肯氏法进行组间多重比较,结果以平均值和总标准误表示,P0.05表示差异显著,P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1不同水平果寡糖对断奶仔猪生长性能的影响(见表2)由表2可知,试验2组仔猪末重显著高于对照组和试验1组(P0.05);试验2组和试验3组的断奶仔猪平均日增重显著高于对照组(P0.05);试验2组断奶仔猪的料重比极显著低于对照组和试验1组(P0.01);试验2组和3组断奶仔猪的腹泻率极显著低于对照组(P0.01)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.011.T002表2不同水平果寡糖对断奶仔猪生长性能的影响项目初重/kg末重/kg平均日增重/(g/d)平均日采食量/(g/d)料重比腹泻率/%对照组7.5014.05b233.93b456.311.95A5.30A试验1组7.5314.56b251.07ab466.731.86A4.61AB试验2组7.4915.64a291.07a472.341.62B2.88B试验3组7.5015.06ab270.00a470.651.74AB3.05BSEM1.632.0410.6115.750.160.68P值0.6290.0310.0480.1300.0070.0032.2不同水平果寡糖对断奶仔猪免疫指标的影响(见表3)由表3可知,试验2组和3组断奶仔猪血清IgA含量显著高于对照组和试验1组(P0.05)。与对照组相比,试验组断奶仔猪血清IgG含量显著升高(P0.05),试验2组和3组断奶仔猪的血清TNF-α含量显著降低(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.011.T003表3不同水平果寡糖对断奶仔猪免疫指标的影响项目IgA/(g/L)IgM/(g/L)IgG/(g/L)IL-6/(ng/L)IL-10/(ng/L)TNF-α/(ng/L)对照组1.43b0.462.12c46.51146.06245.70a试验1组1.50b0.502.97b44.08143.52207.31ab试验2组1.61a0.523.70a43.50140.87185.88b试验3组1.57a0.533.64a45.73136.05190.64bSEM0.310.051.372.734.775.62P值0.0200.1630.0160.6310.7900.0112.3不同水平果寡糖对断奶仔猪肠道菌群的影响(见表4)由表4可知,仔猪日粮添加果寡糖对仔猪盲肠中的乳酸杆菌、双歧杆菌、芽孢杆菌及大肠杆菌数量无显著影响(P0.05)。试验2组和试验3组仔猪回肠中的乳酸杆菌数量显著高于对照组(P0.05);试验2组仔猪回肠中的双歧杆菌数量显著高于对照组(P0.05);果寡糖组仔猪回肠中大肠杆菌数量显著低于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.011.T004表4不同水平果寡糖对断奶仔猪肠道菌群的影响项目乳酸杆菌双歧杆菌芽孢杆菌大肠杆菌盲肠对照组7.867.6410.479.51试验1组7.937.8610.509.46试验2组8.028.0710.559.44试验3组7.978.0310.539.40SEM0.350.240.400.25P值0.6290.5300.8020.721回肠对照组7.47b7.06b10.189.27a试验1组7.88ab7.37ab10.248.50b试验2组8.27a7.90a10.307.86c试验3组8.19a7.42ab10.327.90cSEM0.330.270.440.41P值0.0180.0490.7200.039lg CFU/g3讨论仔猪断奶时会产生严重的断奶应激,引起仔猪腹泻,生长发育缓慢,需要在断奶日粮中添加一些功能性的饲料添加剂来缓解断奶应激。近年来,益生菌、益生元类成为替抗的研究热点,也取得了一定效果。本试验中,0.2%果寡糖组的仔猪末重显著高于对照组和0.1%果寡糖组,0.3%组有比对照组提高的趋势;0.2%和0.3%果寡糖组的断奶仔猪平均日增重显著高于对照组,0.1%果寡糖组有比对照组提高的趋势;0.2%果寡糖组断奶仔猪的料重比极显著低于对照组和0.1%果寡糖组;0.2%和0.3%果寡糖组的断奶仔猪的腹泻率极显著降低。结果表明,果寡糖具有很好地促生长功能。卢军霞等[7]研究表明,0.5%的果寡糖可以显著降低仔猪的腹泻率,降低料重比,提高饲料转化率。果寡糖在蛋鸡的研究中也得到类似效果,在蛋鸡日粮中添加0.2%的果寡糖可以显著降低蛋鸡的料重比,且料蛋比随果寡糖含量的增加呈二次曲线变化[12]。本试验结果与上述研究类似。果寡糖提高动物生长性能或生产性能的原因可能是果寡糖能够维持动物肠道肠黏膜的完整性,进而提高机体对粗蛋白质的利用率,并减少能量损失[13]。动物机体内的免疫球蛋白含量可以反映机体的体液免疫功能。IgA可以抑制病原微生物在动物呼吸道上皮附着[14];IgG具有激活补体(C3、C4)、中和毒素的功能[15];IgM在机体抗感染初期起主要作用,可以溶解消除病原体[16]。本试验结果表明,0.2%和0.3%果寡糖组的仔猪IgA含量显著高于对照组和0.1%果寡糖组;试验组的断奶仔猪IgG含量显著高于对照组;0.2%和0.3%果寡糖组断奶仔猪的TNF-α含量显著低于对照组,结果表明,果寡糖可以显著增强机体的免疫功能。游金明等[17]研究表明,仔猪日粮添加0.1%和0.2%甘露寡糖可以显著增强机体的免疫力。柒启恩等[18]研究发现,在围产期母猪日粮添加30 mg/kg壳寡糖可以显著提高母猪血清中IgA和IgG含量。果寡糖提高动物机体免疫力可能与其能够有效抑制有害菌的繁殖、提高有益菌数量有关。果寡糖可以调节肠道菌群结构,改善肠道健康,进而增强机体的抗病力及免疫力。断奶仔猪健康的生长发育与肠道健康有关,与肠道菌群有着密切的关系。在本试验中,果寡糖显著提高断奶仔猪回肠中的乳酸菌和双歧杆菌的数量,并且降低大肠杆菌的数量。结果表明,果寡糖可以显著改善仔猪肠道健康。李梦云等[19]研究发现,0.3%果寡糖可以显著减少妊娠母猪大肠杆菌的繁殖,并且有提高粪便中乳酸杆菌含量的趋势。周建民等[10]研究表明,果寡糖可以改善蛋鸡肠道形态结构,提高蛋鸡对营养物质的消化吸收利用。卢军霞等[7]研究表明,在断奶仔猪日粮添加0.5%果寡糖可以显著提高仔猪回肠中乳酸菌的含量。本试验结果与上述研究结果类似。在断奶仔猪日粮中添加适量的果寡糖可以改变其肠道菌群结构,改善肠道健康。4结论断奶仔猪日粮中添加一定剂量的果寡糖可以改善仔猪的生长性能,增强机体免疫力,改善肠道健康。果寡糖的最适添加量为0.2%。

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