胞内多糖（intracellular polysaccharides）是从真菌子实体、菌丝体中分离出的由10个以上的单糖以糖苷键连接而成的不溶于高浓度乙醇、正丁醇、乙酸乙酯及丙酮等有机溶剂的高分子聚合物[1]。胞内多糖是一种生物反应调节剂，具有抗菌、抗病毒、抗血栓、抗氧化、促进核酸和蛋白质生物合成、提高动物生产性能等功能[2]。杏鲍菇菌丝体胞内多糖可以提高动物血清酶活性和胆红素水平，降低血清白蛋白和甘油三酯含量，改善肝脏抗氧化状态，改善肝脏结构损伤，具有较好的肝保护作用[3]。在日本沼虾的饵料中添加赤芝胞内多糖，使饵料中的多糖含量达1.5 g/kg，与对照组相比，试验组日本沼虾抗菌活力、溶菌活力、酚氧化物酶、超氧化物歧化酶等活性显著升高，表明胞内多糖可以激活日本沼虾的非特异性免疫系统，增强免疫功能和抗感染能力，进而提高日本沼虾存活率[4]。松乳菌胞内多糖可以通过激活巨噬细胞、提高机体的免疫力达到抵抗病毒入侵的目的，减缓鸡胚的死亡，降低血凝效价，对新城疫病毒有一定的抑制作用，但是不能完全杀灭病毒[5]。肉鸡日粮中添加小刺猴头发酵多糖能够促进粪胆酸排泄，降低血液胆固醇水平和体内胆固醇沉积，进而改善鸡肉品质[6]。母猪日粮中添加100 mg/kg茯苓多糖能够显著提高仔猪生长性能，母猪和仔猪血清免疫和抗氧化指标也得到提升，且不影响母猪繁殖性能[7]。真菌胞内多糖作为天然高分子化合物，具有无毒、无副作物、无污染、不易产生耐药性等优点。本研究采用宏观、微观形态观察和分子生物学相结合的方法对分离自栓孔菌子实体的1株大型真菌进行鉴定。通过单因素试验筛选其菌丝体最适宜生长条件，分析其生物学特性。通过液体发酵方式获得大量菌丝体，采用微波辅助法提取菌丝体胞内多糖，以苯酚-浓硫酸比色法测定胞内多糖提取量，采用羟基自由基和超氧阴离子自由基清除法测定胞内多糖的抗氧化活性，以期为该菌株发酵生产的胞内多糖在饲料添加剂领域中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料1.1.1材料供试栓孔菌子实体于2019年8月采自广西壮族自治区来宾市兴宾区华侨投资区之江路旁绿化带树桩上。马铃薯为市售。1.1.2试剂乳酸苯酚棉兰染色液购自厦门海标科技有限公司；葡萄糖（AR）、蔗糖（AR）、羧甲基纤维素钠（CP）、磷酸二氢钾（AR）、硫酸镁（AR）、尿素（AR）、硝酸铵（AR）、硫酸铵（AR）、盐酸（AR）、氢氧化钠（AR）、丙酮（AR）、无水乙醇（AR）、硫酸亚铁（AR）、30%过氧化氢（AR）购自西陇化工股份有限公司；技术琼脂粉（BR）、蛋白胨（BR）、牛肉膏（BR）、酵母浸粉（BR）购自广东环凯微生物科技有限公司；水杨酸（AR）、可溶性淀粉（AR）、维生素C（AR）、肌醇（BR）、三羟甲基氨基甲烷（AR）、邻苯三酚（AR）购自国药集团化学试剂有限公司；维生素B6（BR）购自天津市巴斯夫化工有限公司；维生素B1（BR）、维生素B2（BR）购自天津市光复精细化工研究所；麦芽糖（AR）购自天津市致远化学试剂有限公司；糊精（AR）购自天津市北辰方正试剂厂。1.1.3培养基PDA培养基：去皮马铃薯200 g/L、葡萄糖20 g/L、琼脂20g/L、蒸馏水1 L，pH值自然，121 ℃高压湿热灭菌20 min。用于菌株分离、保藏。碳源试验培养基：碳源（葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、可溶性淀粉、糊精、羧甲基纤维素钠）20 g/L、蛋白胨2 g/L、KH2PO4 1g/L、MgSO4 0.5 g/L、维生素B1 10 mg/L、琼脂20 g/L，pH值7.0~7.2，蒸馏水1 L，121 ℃高压湿热灭菌20 min。氮源试验培养基：葡萄糖20 g/L、氮源（蛋白胨、牛肉膏、酵母浸粉、尿素、NH4NO3、(NH4)2SO4）2 g/L、KH2PO4 1 g/L、MgSO4 0.5 g/L、维生素B1 10 mg/L、琼脂20 g/L、pH值7.0~7.2，蒸馏水1 L，121 ℃高压湿热灭菌20 min。生长因子试验培养基：葡萄糖20 g/L、蛋白胨2 g/L、KH2PO4 1 g/L、MgSO4 0.5 g/L、生长因子（维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素C、肌醇）10 mg/L、琼脂20 g/L，pH值7.0~7.2，蒸馏水1 L，121 ℃高压湿热灭菌20 min。加富培养基：去皮马铃薯200 g/L、葡萄糖20 g/L、蛋白胨2 g/L、KH2PO4 1 g/L、MgSO4 0.5 g/L、维生素B1 10 mg/L、琼脂20 g/L，pH值7.0~7.2，蒸馏水1 L，121 ℃高压湿热灭菌20 min，用于菌丝体最适培养条件试验[8]。pH值试验培养基：加富培养基基础上，灭菌后使用1 mol/L HCL溶液和1 mol/L NaOH溶液调节培养基pH值至4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0。温度试验培养基：配制加富培养基，pH值7.0~7.2，接种后分别在22、25、28、31、34、37 ℃恒温培养箱中避光培养。液体种子培养基：去皮马铃薯200 g/L、葡萄糖10 g/L、蔗糖10 g/L、酵母膏2 g/L、牛肉膏2 g/L、蛋白胨2 g/L、KH2PO4 2 g/L、MgSO4 1 g/L，pH值7.0~7.2，蒸馏水1 L，121 ℃高压湿热灭菌20 min，用于液体菌种的制作[9]。液体发酵培养基：去皮马铃薯200 g/L、葡萄糖20 g/L、牛肉膏2 g/L、KH2PO4 1 g/L、MgSO4 0.5 g/L、维生素C 10 mg/L，pH值7.0，蒸馏水1 L，121 ℃高压湿热灭菌20 min，用于菌丝体液体发酵培养。1.2仪器设备DHP-9162恒温培养箱（太仓市科教器材厂）、TH2-C恒温摇床（太仓市实验设备厂）、TYAIB 024/10立式压力灭菌锅（宁波久兴医疗器械有限公司）、SW-CJ-1D洁净工作台（江苏苏洁净化设备厂）、UV-2600紫外-可见分光光度计（岛津企业管理（中国）有限公司）、TD5A-WS台式高速离心机（湖南湘仪实验仪器开发有限公司）、DK-S22电热恒温水浴锅（上海申贤恒温设备厂）、XH-MC-1实验室微波合成仪（北京翔鹄科技发展有限公司）、HC-2518R冷冻离心机（安徽中科中佳科学仪器有限公司）、2720 thermal cycler PCR仪（美国应用生物系统公司）、DYCP-31DN电泳槽（北京六一仪器厂）、DYY-5稳压电泳仪（北京六一仪器厂）、FR980凝胶成像仪（上海复日科技仪器有限公司）。1.3试验方法1.3.1菌株的分离、培养与保存采用组织分离法[10]在无菌条件下，使用75%酒精棉球对栓孔菌子实体进行表面消毒，再采用无菌水冲洗2~3次，使用无菌滤纸吸干子实体表面水分。使用灭菌的解剖刀将子实体从中部切开，使用灭菌的接种钩挑取子实体内部一小块组织迅速转移到PDA平板培养基上，置于28 ℃恒温培养箱中避光培养5 d。反复挑取菌落边缘菌丝进行纯化培养，直至获得菌丝体纯培养，挑取菌丝转接于PDA斜面培养基，28 ℃恒温培养箱中避光培养，将长满菌丝的斜面试管转移到4 ℃冰箱，避光保存备用。1.3.2菌株的形态鉴定观察分离菌株TL2019的栓孔菌子实体形态特征，记录。菌丝形态特征采用直接制片观察法[10]。在载玻片中部滴加乳酸石碳酸棉兰染色液，在无菌条件下，使用灭菌接种钩从PDA斜面试管中挑取少量菌丝置于染色液中，使用灭菌解剖针将菌丝分散开，加盖玻片，利用光学显微镜观察显微特征，拍照。1.3.3分子生物学鉴定1.3.3.1ITS序列测定使用Ezup柱式真菌基因组DNA抽提试剂盒（生工生物工程（上海）股份有限公司，产品编号：SK8259）提取菌株TL2019的DNA。ITS序列扩增引物：ITS1（5'-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3'）和ITS4（5'-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3'），预计PCR产物约600 bp。PCR反应体系见表1。PCR反应条件见表2。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.021.T001表1PCR反应体系项目使用量/μL总体积25.0TL2019基因组DNA（50 mg/L）0.510×Buffer（with Mg2+）2.5dNTPs（2.5 mmol/L）1.0Taq Plus DNA聚合酶（5 U/μL）0.2引物ITS1（10 μmol/L）0.5引物ITS4（10 μmol/L）0.5ddH2O19.810.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.021.T002表2PCR反应条件反应阶段温度/℃时间/s循环次数/次预变性942400变性944530退火554530延伸726030修复延伸726000保存46000采用1％琼脂糖凝胶电泳法检测PCR扩增产物。使用SanPrep柱式DNA胶回收试剂盒纯化回收DNA目的条带，由生工生物工程（上海）股份有限公司测序。1.3.3.2序列分析将经测序得到菌株TL2019的ITS序列提交至Genebank数据库，通过BLAST在线比对进行同源性分析，并注册序列登录号。使用MAFFT 7.0软件对菌株TL2019的ITS序列以及从数据库下载的ITS序列进行多序列比对分析，使用MEGA 7.0软件采用Neighbor-joining（NJ）法构建基于ITS序列的系统发育树[11]，外类群为Lenzites tricolor、Hexagonia nitida。1.3.4生物学特性将16 mL碳源试验培养基、氮源试验培养基、生长因子试验培养基、pH值试验培养基、温度试验培养基分别倒入培养皿（φ=9 cm）中，接种直径为6 mm的菌饼倒扣于供试培养基上，放置在28 ℃培养箱中避光培养（温度试验时将培养基分别放入22、25、28、31、34、37 ℃培养箱中培养）。接种24 h后采取十字交叉法测量菌丝生长速率，每隔12 h观察菌丝体的生长状况，待任一平皿菌丝体直径长至7 cm，停止培养，测量菌落直径。每个处理8个重复[12]。菌丝生长速率=菌落直径增长度/培养天数(1)1.3.5液体发酵培养将种子液按5%（体积分数）的接种量接种于装液量为100 mL/250 mL的液体发酵培养基，置于28 ℃恒温摇床中，140 r/min培养7 d[9]。1.3.6葡萄糖标准曲线的制备采用苯酚-浓硫酸法[13]制备标准曲线。称量无水葡萄糖10 mg，使用少量蒸馏水溶解，转移至100 mL容量瓶中，加蒸馏水定容，摇匀，即得0.1 g/L的葡萄糖标准液。分别移取0、0.16、0.32、0.48、0.64、0.80、0.96 mL的标准液加入编号为0~6的7支25 mL具塞比色管中，分别加水补足至2.0 mL。依次加入5%的苯酚溶液1.0 mL、浓硫酸5.0 mL，充分摇匀后室温静置8 min，40 ℃水浴中反应15 min。以0号管为对照，依次测定1~6号管溶液在波长490 nm处的吸光度。以质量体积浓度（mg/L）为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标标准曲线。在2.0~12.0 mg/L范围内，葡萄糖质量浓度与吸光度呈良好的线性关系。拟合线性回归方程为y=0.059 2x-0.003 7，R2=0.999 3。1.3.7胞内多糖提取与提取量测定取菌丝体发酵培养物，4 000 r/min离心20 min，收集沉淀，使用70%乙醇反复洗涤沉淀物至无可溶性糖反应后，45 ℃恒温干燥箱烘干。干燥后的菌丝体粉碎，过60目筛。准确称取菌丝体粉末1.00 g，按液料比45∶1加入蒸馏水45 mL，室温浸泡10 min，置于微波合成仪器中，设定微波功率400 W，微波提取15 min[14]。提取液经减压抽滤后，得抽滤液，采用sevage法除蛋白，3 800 r/min离心10 min，得上清液，加入3倍体积的无水乙醇溶液，4 ℃醇沉16 h，4 000 r/min离心15min，收集沉淀，依次加入无水乙醇、丙酮洗涤沉淀去除色素，沉淀使用蒸馏水溶解，定容于100 mL容量瓶中，即得菌丝体胞内多糖待测液。取0.4 mL待测液于25 mL比色管中，按“1.3.6”项方法测定吸光度值，计算胞内多糖提取量。胞内多糖提取量(mg/g)=(C×V×N)/(M×1 000)(2)式中：C为供试品多糖浓度（mg/L）；V为待测液定容体积（mL）；N为稀释倍数；M为菌丝体粉末质量（g）。1.3.8胞内多糖抗氧化性1.3.8.1羟基自由基清除能力测定参照张鹏等[15]方法，略做调整。取不同浓度的胞内多糖溶液2.0 mL置于10 mL具塞刻度试管中，依次分别加入10 mmol/L FeSO4溶液1.0 mL、10 mmol/L水杨酸-乙醇溶液1.0 mL、10 mmol/L H2O2溶液1.0 mL，置于37 ℃水浴，保温反应30 min，测定510 nm波长处吸光度，记为A1；使用1.0 mL蒸馏水代替1.0 mL H2O2溶液，按上述操作方法测定吸光度，记为A2；使用1.0 mL蒸馏水代替不同浓度的胞内多糖溶液，按上述方法测定吸光度，记为A3。以同浓度的VC溶液为阳性对照。计算胞内多糖对羟基自由基的清除率。羟基自由基清除率=[1-(A1-A2/A3)]×100%(3)1.3.8.2超氧阴离子自由基清除能力测定参照刘婷婷等[16]方法，略作改动。向10 mL具塞刻度试管中加入50 mmol/L、pH值8.2的Tris-HCl缓冲液4.5 mL，将试管放入25 ℃的恒温水浴中预热20 min。分别加入预热至25 ℃的25 mmol/L的邻苯三酚溶液0.4 mL和1 mL不同浓度的胞内多糖溶液，摇匀，置于25 ℃恒温水浴中保温，4 min后加入8 mmol/L的盐酸溶液1.0 mL终止反应，在波长320 nm处测定吸光度，记为A1。以蒸馏水代替多糖样品作为空白对照，按上述操作测定吸光度，记为A0。以同浓度的VC溶液为阳性对照。计算胞内多糖对超氧阴历子自由基的清除率。超氧阴离子自由基清除率=(A0-A1/A0)×100%(4)1.4数据统计与分析采用Excel 2010软件整理试验数据；采用SPSS 19.0软件中“单因素ANOVA”程序进行方差分析，采用Duncan氏法进行多重比较，P0.05表示差异显著，P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1TL2019的形态鉴定（见图1）菌株TL2019的子实体形态见图1（a）。子实体较大，一年生，单生或叠生，新鲜时无嗅、无味，硬木栓质至木栓质，干后重量明显减轻。菌盖半圆形至贝壳形，长可达4.5~6.3 cm，宽6.3~8.4 cm，基部厚3.8 cm；菌盖表面干后奶油色至灰色至黄褐色、光滑无环纹、基部有不规则的疣突；边缘圆钝、厚；孔口表面奶油色至浅黄褐色、有折光；孔口圆形至多角形，每毫米1.5~1.8个；管壁薄、全缘。菌肉白色，软木栓质，有明显或模糊的同心环纹，可达3.4 cm；菌管白色，软木栓质，长可达6 mm。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.021.F001图1菌株TL2019形态特征菌株TL2019纯培养菌落形态见图1（b）。该菌株可在PDA平板上生长，28 ℃培养12 d后直径约85 mm。菌丝浓密，生长前期至后期均为白色，菌落会产生芳香气味。菌丝体显微观察发现，菌株TL2019菌丝显微形态见图1（c），菌丝很少分枝，为无隔菌丝，未观察到锁状联合及分生孢子。2.2基于ITS序列的系统发育分析（见图2、图3）由图2可知，扩增得到基因片段凝胶电泳条带单一、明亮，与Marker条带比较发现，目的基因片段约为500~600 bp，目的条带经回收、测序得到长度为582 bp的ITS序列。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.021.F002图2菌株TL2019的ITS序列PCR扩增产物电泳图经PCR扩增和序列测定，获得长度为582 bp的菌株TL2019 ITS序列片段，将序列测序结果输入Genebank数据库进行BLAST比对。通过同源性分析可知，菌株TL2019 ITS序列与栓孔菌属（Trametes）的多种真菌有较高的同源性。选取栓孔菌属内与菌株TL2019同源性较高的7种真菌，共13条序列。以Lenzites tricolor和Hexagonia nitida的ITS序列为外类群，使用MAFFT 7.0软件进行多序列比对分析，使用MEGA 7.0软件采用NJ法构建系统发育树。由图3可知，菌株TL2019与Trametes lactinea（MT611189、MK764880）在同一分枝上，同源性为100%，结合子实体和菌株的宏观特征以及菌株显微特征，将菌株TL2019鉴定为1株奶油栓孔菌（Trametes lactinea），从GenBank数据库获得的登录号为MW704364。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.021.F003图3基于ITS序列采用NJ法构建的菌株TL2019系统发育树2.3生物学特性2.3.1不同碳源对TL2019菌丝体生长的影响（见表3）由表3可知，在碳源试验中，菌丝在添加不同碳源培养基中，除羧甲基纤维素钠组外均能生长，葡萄糖组菌丝生长速率最快，麦芽糖次之。不同碳源培养基上菌丝生长速度依次为葡萄糖麦芽糖糊精蔗糖淀粉羧甲基纤维素钠。综合菌丝长势、菌丝生长速率，菌株菌丝培养的最适碳源为葡萄糖，其次为麦芽糖。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.021.T003表3不同碳源对TL2019菌丝体生长的影响碳源菌丝生长速率/(mm/d)菌丝长势葡萄糖7.53±0.13Aa+++麦芽糖7.27±0.17Bb+++糊精5.06±0.22Cc++蔗糖4.24±0.09Dd++可溶性淀粉4.07±0.21Dd+羧甲基纤维素钠——注：1.+、++、+++表示菌丝长势依次增强；—表示菌丝不生长。2.同列数据肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05），不同大写字母表示差异极显著（P0.01），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.3.2不同氮源对TL2019菌丝体生长的影响（见表4）由表4可知，在氮源试验中，菌丝在添加不同氮源的培养基中，除尿素组外均能生长均生长，牛肉膏组菌丝生长速度最佳，硝酸铵次之。不同氮源培养基上菌丝生长速度依次为牛肉膏硝酸铵蛋白胨硫酸铵酵母浸粉对照尿素。综合菌丝长势、菌丝生长速率，菌丝培养的最适氮源为牛肉膏，其次为硝酸铵。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.021.T004表4不同氮源对TL2019菌丝体生长的影响氮源菌丝生长速率/(mm/d)菌丝长势牛肉膏8.45±0.19Aa+++硝酸铵7.82±0.12Bb++蛋白胨7.61±0.11Cc+++硫酸铵7.54±0.07Cc++酵母浸粉6.44±0.28Dd++尿素——2.3.3不同生长因子对TL2019菌丝体生长的影响（见表5）由表5可知，在不同生长因子试验中，菌丝在各培养基中均生长良好，其中维生素C组菌丝生长速率最佳。不同生长因子培养基上菌丝生长速度接近，依次为维生素C维生素B2维生素B6维生素B1肌醇。综合菌丝长势、菌丝生长速率，菌丝培养的最适生长因子为维生素C，其次为维生素B2。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.021.T005表5不同生长因子对TL2019菌丝体生长的影响生长因子菌丝生长速率/(mm/d)菌丝长势维生素C9.02±0.12Aa+++维生素B28.38±0.23Bb++维生素B67.85±0.18Cc++维生素B17.53±0.14Dd+++肌醇7.26±0.21De++2.3.4不同pH值对TL2019菌丝体生长的影响（见表6）由表6可知，在pH值试验中，菌丝在pH值6.0~8.0条件下均能生长，其中pH值7.0长势最佳，pH值6.0、8.0次之，其他条件不生长。在不同pH值条件下菌丝生长速度依次为7.06.08.09.0=5.0=4.0。综合菌丝长势、菌丝生长速度，菌丝培养的最适pH值为7.0，菌丝对pH值较为敏感.10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.021.T006表6不同pH值对TL2019菌丝体生长的影响pH值菌丝生长速率/(mm/d)菌丝长势7.07.68±0.14Aa+++6.05.28±0.21Bb++8.03.45±0.19Cc+9.0——5.0——4.0——2.3.5不同培养温度对TL2019菌丝体生长的影响（见表7）由表7可知，在不同培养温度试验中，菌丝在22~37 ℃条件下均能生长，其中28 ℃时生长最佳，25 ℃次之，22 ℃长势较弱。在22~37℃条件下，菌丝生长速度依次为28 ℃25 ℃31 ℃34 ℃37 ℃22 ℃。综合菌丝长势、菌丝生长速度，菌丝培养的最适温度为28 ℃。菌丝的生长对温度比较敏感，高温和低温都会降低菌丝体的生长速度。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.021.T007表7不同温度对TL2019菌丝体生长的影响温度/℃菌丝生长速率/(mm/d)菌丝长势287.48±0.13Aa+++256.12±0.17Bb+++315.45±0.13Cc++344.83±0.21Dd++374.59±0.11De++223.75±0.09Ef+2.4胞内多糖提取量测定菌株TL2019经液体发酵培养7 d后，采用微波辅助法提取菌丝体胞内多糖，并采用苯酚-浓硫酸法测定胞内多糖提取量。结果表明，胞内多糖提取量为13.32 mg/g。2.5胞内多糖抗氧化性2.5.1胞内多糖对羟基自由基的清除能力（见图4）由图4可知，羟基自由基清除率与胞内多糖质量体积浓度（0.2~1.2 g/L）呈正相关，当浓度为1.2 g/L时，清除率最高为86.73%。经拟合得到回归方程为y=79.256x-0.557 3，R2=0.970 9，计算得胞内多糖的IC50=0.64 g/L。结果表明，胞内多糖具有一定的羟基自由基清除能力，但效果稍弱于阳性对照VC。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.021.F004图4胞内多糖对羟基自由基的清除能力2.5.2胞内多糖对超氧阴离子自由基的清除能力（见图5）由图5可知，超氧阴离子自由基清除率与胞内多糖质量体积浓度（0.1~0.7 g/L）呈正相关，当浓度为0.7 g/L时，清除率最高为89.64%。经拟合得到回归方程为y=138.32x-6.442 9，R2=0.987 9，计算得到胞内多糖的IC50=0.41 g/L。结果表明，胞内多糖具有一定的超氧阴离子自由基清除能力，但效果稍弱于阳性对照VC。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.14.021.F005图5胞内多糖对超氧阴离子自由基的清除能力3结论本研究采用传统的形态分类方法结合分子生物学方法鉴定菌株TL2019为1株奶油纤孔菌（Trametes Lactinea）。通过单因素试验确定菌丝生长的最适条件为碳源为葡萄糖，氮源为牛肉膏，生长因子为VC，pH值7.0，生长温度28 ℃，初步探明了菌株TL2019的生物学特性。菌株TL2019经液体摇瓶发酵培养7 d后，经微波辅助法提取菌丝体胞内多糖，采用苯酚-浓硫酸法测定胞内多糖提取量为13.32 mg/g。经抗氧化试验测定，菌株TL2019菌丝体胞内多糖对羟基自由基和超氧阴离子自由基有一定的清除效果，IC50值分别为0.64、0.41 g/L。本研究结果为深入开发利用该真菌资源提供参考。