动脉血压是动物最基本的生命体征之一，是临床诊断疾病的重要参考依据。目前，部分大熊猫饲养管理机构收集众多大熊猫麻醉状态下的心率和血压资料[1-2]，建立了大熊猫麻醉状态下的血压（160/90 mmHg）标准[3]。大熊猫的心率和血压数据在大熊猫参与其他必须麻醉项目时获取。麻醉会降低人体的血压和脉搏[4]。为检测心率和血压而麻醉大熊猫，不仅工作量较大，而且存在麻醉意外和风险[5]。因此，参考人体血压测定的方式，可以采用正增强训练的方法让大熊猫配合训练人员测定其血压和脉搏[6]。影响人体血压测定结果的因素较多，包括被测对象的性别、年龄、民族、职业、测定时间、运动、饮食、肥胖、精神状态等因素；气候、温度、大气压等环境因素；还包括袖带、测量体位、测量部位、测量次数等测量技术因素[7]。上述因素是否会对大熊猫在清醒状态下的血压和脉搏发挥同样的影响尚不清楚。相比麻醉方式，采用行为训练方式测定大熊猫的血压和脉搏更加便捷，且可以根据生产实际随时测定。测定时间点对大熊猫的血压和脉搏的影响尚未可知。此外，有必要探究大熊猫分布的地域是否对其血压和脉搏产生影响，以便指导不同地域大熊猫的血压和脉搏对比标准。因此，为探究每天的测量时间点和其所在地域对大熊猫血压和脉搏的影响，文章对6个省（市）11只大熊猫在同一天的同一时间点采用行为训练的方法，连续测定5 d的血压值和脉搏，以便为通过行为训练测定大熊猫血压、脉搏提供参考。1材料与方法1.1试验地点试验大熊猫来自沧州动物园（河北省沧州市）、柳州动物园（广西壮族自治区柳州市）、天津福德动物园（天津市南开区）、厦门灵玲动物王国（福建省厦门市）、南宁动物园（广西壮族自治区南宁市）和云南野生动物园（云南省昆明市）。6个动物园的地域及气候见表1。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.09.004.T001表16个动物园的地域及气候Tab.1Regionalism and climate of six animal zoos地点经度纬度海拔/m温度/℃湿度/%柳州动物园东经109°23′北纬24°15′10017.53±2.0660.00±5.00沧州动物园东经116°53′北纬38°15′1912.81±1.5050.00±4.77天津福德动物园东经117°16′北纬38°88′217.13±1.5947.00±4.76厦门灵玲动物王国东经118°2′北纬24°35′1019.62±1.6964.27±7.11南宁动物园东经108°15′北纬22°50′8022.00±4.3861.67±17.28云南野生动物园东经102°47′北纬25°5′2 10011.46±0.3483.60±3.201.2试验动物试验对象为借展在沧州动物园的大熊猫“妮小、晶运”；柳州动物园的大熊猫“蜀琳、明浜”；天津福德动物园的大熊猫“星美”；厦门灵玲动物王国的大熊猫“思筠筠、思念”；南宁动物园的大熊猫“绩美、绩兰”；云南野生动物园的大熊猫“毛竹、珍多”。试验大熊猫的基本情况见表2。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.09.004.T002表2试验大熊猫的基本情况Tab.2Information of test giant pandas呼名系谱号性别出生年月身体状况妮小966雌性2015.08健康晶运964雄性2015.08健康蜀琳666雄性2007.07健康明浜662雄性2006.12健康星美820雌性2011.08健康思筠筠962雄性2015.08健康思念961雄性2015.08健康绩美1 003雄性2016.06健康绩兰1 004雌性2016.06健康毛竹918雄性2014.07健康珍多928雄性2014.08健康1.3试验工具训练专用口哨、目标棒、食物背桶、温湿度计、鱼跃水银血压计、欧姆龙（OMRON）电子血压计（袖带规格：长度内径为57 cm、外径65.5 cm；宽度最窄为13 cm、宽17 cm）、采血架。1.4试验方法1.4.1动物训练（见图1）XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.09.004.F001图1大熊猫血压测定Fig.1Blood pressure determination of panda研究采用正增强的训练方法并遵循塑形十大原则[8]。训练人员发出指令引导大熊猫以正确的方式面向训练员坐下，并伸出左前肢抓握采血架，大熊猫做到后，给予苹果或窝头作为奖励；若做不到，暂时不给，直至做出标准动作[6]。待大熊猫抓握行为稳定后，实验员引入鱼跃水银血压计对大熊猫进行脱敏，若大熊猫接受水银血压计袖带，并不再对其发出的声音及产生的压力作出任何反应，则完成动物训练。1.4.2测定方法测量体位和手臂位置会影响血压测量值[7,9]，因此调整大熊猫抓握的采血架与心房同高。大熊猫具有极强的破坏性，采用血压计测定其肱动脉血压时，袖带容易被破坏，人员容易受伤。人体血压研究报道，同侧桡动脉和肱动脉的血压无差异[10]，且大熊猫上臂粗大，适合其绑定的袖带较少，将袖带绑定在离大熊猫掌部上4~6 cm的位置，可以有效避免训练人员被大熊猫误伤。因此，参照人体腕部血压测定方法[11-12]，所有大熊猫均测定桡动脉血压和脉搏。进行该试验前，训练人员已对大熊猫进行了长期的行为训练，已经收集该大熊猫9个月的血压数据用作其他试验。训练人员和实验人员具有丰富的血压数据测量经验。每次试验开始前，训练人员会在室内对大熊猫进行5~10 min的基本训练，使试验对象情绪和状态稳定；测量前训练大熊猫自然抓握采血架，然后将欧姆龙（OMRON）电子血压计的袖带缠绕于大熊猫前臂，调整袖带松紧程度后，点击电子血压计开关，记录收缩压、舒张压和脉搏值，记录完成毕后，重复再测2次[12-13]。1.4.3测量时间各点位的试验个体只有2个，为减少系统误差，试验对同一大熊猫连续测定5 d的血压值和脉搏，并记录测定时环境的温湿度。训练人员在每天9：00~9：30、13：00~13：30和17：00~17：30各记录3次血压和脉搏数据。1.5数据统计与分析为探究同一地域不同测定时间点大熊猫的收缩压、舒张压和脉搏的影响，以大熊猫清醒状态下的收缩压、舒张压、脉搏为因变量，同一地域不同测定时间点为因子，采用单因素方差进行分析，大熊猫在同一地域不同测定时间点的收缩压、舒张压、脉搏之间的差异使用Tukey检验分析。此外，对温度和湿度与收缩压、舒张压、脉搏进行皮尔森（Pearson）相关分析。数据采用SPSS 22.0进行分析，结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著，P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1大熊猫所在的地域和测定时间点对大熊猫血压和脉搏的影响（见表3）由表3可知，通过行为训练测定大熊猫在清醒状态下的收缩压最小值为74.00 mmHg，最大值为236.00 mmHg，平均值为160.43 mmHg。大熊猫所在的地域与测定的时间点对其收缩压无互作效应（P0.05），测定的时间点不会影响其收缩压（P0.05），但不同地域的大熊猫测得的收缩压不同（P0.01）。Tukey检验显示，大熊猫所在地域对收缩压的影响表现为：云南柳州=天津厦门沧州＝南宁。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.09.004.T003表3大熊猫所在的地域和测定时间点对大熊猫血压和脉搏的影响Tab.3Influence of regionalism and time point on the giant panda's blood pressure and pulse项目收缩压/mmHg舒张压/mmHg脉搏/（次/min）地域柳州（n=2）169.40±13.04a96.11±12.04ab70.61±7.06a沧州（n=2）140.42±17.13b99.19±12.83a71.32±6.97a天津（n=1）166.58±6.49a96.22±11.79ab77.64±4.94b厦门（n=2）150.33±20.19c89.16±14.64b64.16±5.44c南宁（n=2）136.52±26.28b94.06±28.24ab76.54±15.35b云南（n=2）202.38±18.72d126.54±14.06c77.21±8.95bP值000时间点早上（n=11）159.90±31.0099.50±20.9368.92±7.14a中午（n=11）159.75±30.71101.13±23.2472.82±10.10b下午（n=11）161.63±27.43101.10±19.0775.72±11.84cP值0.5780.4790地域×时间点P值0.4720.3850.002平均值160.43±29.71100.58±21.1272.48±10.25注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。通过行为训练测定大熊猫在清醒状态下的舒张压最小值为31.00 mmHg，最大值为182.00 mmHg，平均值为100.58 mmHg。大熊猫所在的地域与测定的时间对舒张压的影响与收缩压相同。Tukey检验显示，大熊猫所在地域对舒张压的影响表现为：云南沧州=柳州=天津厦门。通过行为训练测定大熊猫在清醒状态下的脉搏最小值为41.00次/min，最大值为145.00次/min，平均值为 72.48 次/min。大熊猫所在的地域与测定的时间点对其脉搏次数有互作效应（P0.01），大熊猫所在的地域（P0.01）与测定的时间点（P0.01）均极显著影响其脉搏次数。2.2同一地域不同测定时间点对大熊猫血压和脉搏的影响（见表4）由表4可知，大熊猫在同一地域不同测定时间点的收缩压差异不显著（P0.05）。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.09.004.T004表4同一地域不同测定时间点对大熊猫血压和脉搏的影响Tab.4Influence of time point on the giant panda's blood pressure and pulse at the same regionalism项目收缩压/mmHg舒张压/mmHg脉搏/（次/min）柳州（n=2）早上173.47±10.6595.77±13.8871.63±6.60a中午166.63±13.6194.23±11.1467.27±5.41b下午168.10±14.0198.33±10.9272.93±7.88aP值0.1010.4160.004沧州（n=2）早上139.30±16.2898.30±11.6766.47±7.52a中午137.57±17.83101.83±14.9672.87±5.21b下午144.40±17.0897.43±11.5774.63±5.22bP值0.2780.3760天津（n=1）早上164.53±6.3891.87±15.7574.00±4.49a中午166.33±6.5299.53±10.9779.60±4.52b下午168.87±6.2597.27±5.9579.33±3.83bP值0.1870.1900.001厦门（n=2）早上153.10±27.0392.33±18.2661.83±3.99a中午148.40±15.3888±13.962.77±5.5a下午149.50±16.4687.13±10.7367.87±4.77bP值0.6460.3410南宁（n=2）早上131.93±26.3192.10±27.0971.40±7.46中午137.13±27.6891.57±32.8579.30±14.38下午140.50±24.9498.50±24.5778.93±20.48P值0.4500.5760.078云南（n=2）早上199.37±22.47122.80±15.6170.70±4.24a中午205.73±19.39130.80±11.9378.50±6.06b下午202.03±13.20126.03±13.6682.43±10.85bP值0.4220.0840大熊猫在同一地域内不同测定时间点的舒张压无显著差异（P0.05）。大熊猫在同一地域内，除南宁外（P0.05），不同测定时间点的脉搏次数也存在显著差异（P0.05）。Tukey检验显示，在柳州的大熊猫脉搏次数表现为：早上=下午中午，在云南的大熊猫脉搏次数表现为：中午=下午早上，在沧州、天津和云南的大熊猫脉搏次数表现为：中午=下午早上。2.3环境温湿度与大熊猫清醒状态下的收缩压、舒张压、脉搏的相关性相关性检验分析发现，温度与收缩压（r=-0.394，P0.01)、舒张压（r=-0.404，P0.01）之间，呈极显著中等程度负相关；湿度与收缩压（r=0.457，P0.01)、舒张压（r=0.318，P0.01）之间，呈极显著中等程度正相关。3讨论3.1大熊猫所在的地域对大熊猫血压的影响动脉血压指动脉中血液对单位面积血管壁的侧压力，心室收缩射血时，动脉血压急速上升，形成收缩压；随心室射血停止，动脉血压下降，形成舒张压；收缩压与舒张压之间的差值为脉压。本研究发现，通过采用行为训练测定大熊猫所得的收缩压和舒张压表现出地域差异，其原因可能有以下几点：（1）不同地域的环境温湿度、气候、气压等存在差异。影响人类血压结果的因素有年龄、性别、职业、测定时间[14]、运动、气候、温度、大气压和民族等[7]。各民族间血压的差异主要因为民族生活的地域不同[15]。环境温湿度能够通过影响血管的收缩与扩张而影响血压，环境温度降低时，人体末梢血管收缩，血压升高；环境温度升高时，人体外周血管扩张，血压下降[7]。本研究也发现，舒张压和收缩压与温度呈负相关，与湿度呈正相关，该结果与人体血压研究结果一致[16]。不同地域的温度、湿度在大熊猫测定血压时有差异。（2）不同地域的环境氧含量存在差异。据人类血压研究报道，不同地域的海拔可以影响环境中的氧含量，低氧环境可以导致肺动脉高压、体循环微血管静脉变宽、微血管囊状扩张数量增多、血流减慢，从而使血压下降[17]，还可以使肾动脉收缩、肾缺血，致使肾小球旁器细胞变性，肾素活性下降、血管紧张素转换酶及醛固酮分泌降低，从而使血压降低[18]。通过行为训练测定大熊猫的收缩压和舒张压表现出地域差异，因而在生产实际中需要对各地域的大熊猫建立当地的血压对比标准，从而减少因所处地域的不同而对血压出现误判。3.2大熊猫所在的地域和测定的时间点对脉搏的影响本研究发现，不同地域不同测定时间点所测的脉搏次数均不同，且大熊猫脉搏次数较高的地域其舒张压相对较高，其原因可能是不同地域不同测定时间点的环境温湿度和不同地域的海拔等综合影响了脉搏的测定结果。脉搏是由大量血液进入动脉而使动脉压力变大、管径扩张、在体表较浅处形成的动脉扩张。因此，影响心率、心排血量的因素均可影响脉搏。环境温度与哺乳动物的心率关系复杂。环境温度降低，心率降低；环境温度升高，心率加快；心率还会因环境温度升降的速度而有所差异[19]。此外，脉搏会随海拔升高而加快[20]。本研究发现，在血压测定期间各地域的海拔高度、环境平均温度以及同一地域同一天不同时间点的平均温度都存在差异。因此，环境温度可能通过影响心率等因素影响脉搏。3.3最佳测定时间点本研究发现，有5个地域的大熊猫其脉搏次数在9：00~9：30最少，可能因为其活动高峰主要集中在白天[21-23]。早上大熊猫活动量较少，环境温度较低，因而其心率和脉搏次数相对较低。从大熊猫的脉搏次数可以发现各地域（沧州动物园、天津福德动物园和云南野生动物园）被测大熊猫的脉搏普遍表现为：中午=下午早上。因此，在每天的13：00~13：30和17：00~17：30测定大熊猫血压值和脉搏较为合理。4结论训练人员采用正增强的训练方法长期且大规模的测定大熊猫血压和脉搏值是可行的。在生产实际中，大熊猫饲养管理人员应根据大熊猫所在地域建立当地的血压和脉搏对比标准，并且大熊猫血压值和脉搏每天的测定时间点尽量安排在13：00~13：30和17：00~17：30。