随着我国养殖业集约化程度不断提高，抗生素类促生长添加剂长期使用，导致动物免疫力下降、应激反应加大、肠道菌群失调，影响动物的生产性能的同时，畜产品药物残留超标[1-3]。2020年7月1日开始，我国全面停止生产除中药外的促生长药物添加剂[4]。中药作为饲料添加剂具有多种优点。使用新生产工艺将中药的有效成分提取出来可以制成液体或固体剂型。与普通的粉碎相比，中药提取物具有效成分含量高、生物利用度高、使用量小、适口性好等优点[5-7]。博落回具有抗病毒、抗菌消炎、增强免疫力等多种功效，提取物以异喹啉类生物碱为主，包括血根碱、白屈菜红碱等。临床中以应用博落回制剂、博落回散、博落回注射液为主[8-10]。目前，博落回被广泛应用在肉鸡、猪的养殖生产中，但在肉牛养殖过程中应用比较少。本研究以斯坦犊牛为研究对象，研究博落回对其生长性能、养分表观消化率、血清生化指标及免疫机能的影响，为博落回提取物在肉牛养殖中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料博落回提取物购自北京生泰尔生物科技公司，主要成分为：血根碱（C20H14NO4+），含量少于0.17%；白屈菜红碱（C21H18NO4+），含量不少于0.225%。总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆固醇（TC）、尿素氮（BUN）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白A（IgA）和细胞因子白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-6（IL-6）EELISA试剂盒，均购自南京建成生物工程研究所。1.2试验动物体重（150±5）kg的荷斯坦犊牛80头，由肃南裕固族自治县皇城镇奶牛养殖基地提供，试验于2020年7~10月进行。1.3试验设计试验采用单因素随机设计，选择健康、体重（150±5）kg的荷斯坦犊牛80头，随机分为4组，每组20个重复，每头犊牛为1个重复。分别为基础饲料组（1组），200（2组）、400（3组）、800 mg/kg（4组）博落回提取物添加组。预试期7 d，正式试验期56 d。每头犊牛为1个重复，单独饲喂，按照奶牛养殖基地饲养管理标准进行饲养试验与管理。参照NRC（2012）推荐的肉牛饲养标准配制日粮，基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.15.007.T001表1基础日粮组成与营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00粗饲料60.00代谢能/(MJ/kg)12.45玉米30.80粗蛋白质/%15.26麦麸2.00中性洗涤纤维/%41.34豆粕2.00钙/%1.12棉粕3.60磷%0.74预混料1.60注：1.每千克预混料为日粮提供：ZnSO4·H2O 0.036 g、MgO 0.076 g、FeSO4·H2O 0.053 g、MnSO4·H2O 0.043 g、NaSeO3 0.031 g、CaCO3 4.570 g、CaHPO4 5.170 g、VA 2 484 IU、VD3 496.8 IU、VE 0.828 IU、VK 30.23 mg、VB1 0.092 mg、VB2 0.69 mg、VB12 1.38 μg、烟酸1.62 mg、泛酸钙1.15 mg、叶酸0.023 mg。2.营养水平均为实测值。1.4测定指标及方法1.4.1生产性能在奶牛养殖基地选择初始体重相近的健康（150±5）kg的荷斯坦犊牛进行饲养试验。试验第1 d和试验最后1 d测量犊牛体重，记录犊牛每日采食量，用于计算平均日增重、平均日采食量及料重比。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=每头牛试验期内采食量/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2养分表观消化率参照文献[10]，采集粪便样品并进行处理，将处理好的样品送至甘肃农业大学动物营养实验室检测中心检测粪便中营养物质消化率。表观消化率=1-[(粪中养分含量×饲粮中酸不溶灰分含量)/(饲粮中养分含量×粪中酸不溶灰分含量)]×100%(4)1.4.3血清指标在试验结束（56 d），每组选择10头犊牛，颈静脉采集血液，离心分离血清，测定TP、ALB、ALT、AST、BUN等生化指标；按照试剂盒说明书测定免疫球蛋白（IgG、IgM、IgA）和细胞因子（IL-2、IL-6）的含量。1.5数据统计与分析采用SPSS 18.0软件进行单因素方差分析（One-way ANOVA），采用Duncan氏法进行均值比较,结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1博落回提取物对犊牛生长性能的影响（见表2）由表2可知，试验组犊牛的采食量均高于1组（P0.05）；与1组相比，400、800 mg/kg博落回提取物添加组犊牛的平均日增重显著提高（P0.05）；料重比显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.15.007.T002表2博落回提取物对犊牛生长性能的影响组别初重/kg末重/kg平均日增重/kg平均采食量/kg料重比1组150.74±5.21192.18±4.410.74±0.21b7.32±0.259.89±0.23a2组150.61±5.11195.97±6.110.81±0.11ab7.48±0.269.23±0.34ab3组150.48±5.13199.20±5.730.87±0.23a7.59±0.368.27±0.45b4组150.55±5.22198.15±5.620.85±0.12a7.62±0.368.96±0.34b注：同列数据肩标相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05），不同字母表示差异显著（P0.05）；下表同。2.2博落回提取物对犊牛养分表观消化率的影响（见表3）由表3可知，200、400、800 mg/kg博落回提取物添加组的干物质、钙、磷营养物质的表观消化率均高于1组（对照组）（P0.05）；与1组相比，400、800 mg/kg博落回提取物添加组的粗蛋白质、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维的表观消化率显著提高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.15.007.T003表3博落回提取物对犊牛养分表观消化率的影响组别干物质粗蛋白质中性洗涤纤维酸性洗涤纤维钙磷1组60.13±4.1254.34±2.32b56.28±2.52b38.45±3.45b40.22±3.3239.82±2.332组61.22±2.4356.15±3.33ab61.12±3.33ab39.38±3.32ab41.32±3.4342.28±2.333组64.11±4.1263.61±2.28a64.57±3.52a43.51±3.52a44.42±2.4543.12±2.344组64.13±3.2262.53±2.43a63.37±3.62a43.49±2.22a44.52±2.4243.33±2.33/%2.3博落回提取物对犊牛血清生化指标的影响（见表4）由表4可知，与1组相比，400、800 mg/kg博落回提取物添加组的血清TP含量显著升高（P0.05）；血清AST活性、BUN含量显著降低（P0.05）；200、400、800 mg/kg博落回提取物添加组犊牛的血清中ALT活性低于1组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.15.007.T004表4博落回提取物对犊牛血清生化指标的影响组别TP/(g/L)ALB/(g/L)ALT/(U/L)AST/(U/L)BUN/(mmol/L)1组43.15±2.22b17.32±2.519.37±1.14131.25±6.26a0.82±0.25a2组46.33±2.12ab18.43±2.328.81±1.24113.35±5.17ab0.79±0.26ab3组51.52±2.16a20.31±4.128.68±1.32112.48±5.34b0.66±0.15b4组51.41±1.38a21.39±3.338.54±1.14113.42±5.33b0.67±0.54b2.4博落回提取物对犊牛免疫指标的影响（见表5）由表5可知，200、400、800 mg/kg博落回提取物添加组犊牛的血清IgM、IL-6含量高于1组（P0.05）；与1组相比，400、800 mg/kg博落回提取物添加组犊牛的血清IgG、IgA、IL-2含量显著提高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.15.007.T005表5博落回提取物对犊牛免疫指标的影响组别IgG/(g/L)IgA/(g/L)IgM/(g/L)IL-2/(μg/L)IL-6/(μg/L)1组1.21±0.31b1.32±1.21b1.24±0.218.29±1.13b6.26±1.232组1.35±0.13ab1.42±1.21ab1.27±0.128.62±1.24ab6.48±1.223组1.48±0.28a1.51±1.15a1.32±0.249.73±1.37a6.57±1.134组1.45±0.21a1.49±1.12a1.33±0.469.62±1.36a6.82±1.223讨论3.1博落回提取物对犊牛生长性能的影响博落回提取物是由博落回提取经过加工制成的散剂，具有改善动物消化功能、促进营养物质的吸收、抑制肠道有害菌生长、改善动物生产性能的作用[11-13]。杜莉等[14]报道，在日粮中添加博落回提取物可以显著改善仔猪的生长性能和哺乳期母猪生产性能。柴毛毛等[4]研究表明，利用博落回提取物替代抗生素可以显著改善肉鸡的生长性能。本研究中，200、400、800 mg/kg博落回提取物添加可以改善犊牛的生长性能，以400、800 mg/kg博落回提取物添加效果较好。添加博落回提取物可以促进消化酶合成与分泌，改善动物肠道的内环境，促进营养物质在犊牛肠道内的消化与吸收，提高饲料中营养物质的利用率，进而改善犊牛的生长性能。3.2博落回提取物对犊牛养分表观消化率的影响饲料中各种营养物质不均衡会严重影响饲料中其他营养物质的利用率，增加养殖成本[15-16]。因此，营养物质的养分表观消化率是评价动物在养殖过程中对饲料中营养物质可利用性的重要指标之一。本试验研究表明，400、800 mg/kg博落回提取物添加组的粗蛋白质、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维的表观消化率显著高于1组。博落回提取物中的活性物质可以有效改善肠道的内环境，减少肠道疾病的发生，可以提高饲料中的营养物质在肠道内的消化与吸收，提高养分表观消化率。3.3博落回提取物对犊牛血清生化指标的影响血清生化指标的变化与动物生长、代谢相关。TP和ALB由肝脏合成，可以反映机体蛋白的代谢水平；ALT和AST活性的变化与肝脏的损伤有关；BUN与肾脏的代谢有关[17-18]。本试验研究表明，200、400、800 mg/kg博落回提取物可以改善血清生化指标，提高血清中TP含量，降低AST活性和BUN含量，有效改善肝、肾的代谢水平，以400、800 mg/kg博落回提取物添加效果较好。博落回提取物所含的活性物质，可以调节体内的物质代谢水平，提高肝脏中TP和ALB的合成与分泌，降低其ALT、AST活性和BUN含量，改善肝、肾脏的代谢水平。具体作用机理尚未明确，有待进一步研究。3.4博落回提取物对犊牛免疫机能的影响在动物体内，体液免疫由免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）介导，动物机体抗感染免疫中以体液免疫为主[17-18]。免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）含量的在免疫中起着重要的作用。IgG与动物机体的抗感染免疫有关；IgA肠道与动物机体的黏膜免疫有关[19-20]。动物体内的细胞免疫是由多种细胞因子介导的，其中IL-2主要能刺激T淋巴细胞增殖和调节B淋巴细胞活性，促进动物体内抗体产生；细胞因子IL-6可以同时介导体液免疫和细胞免疫，且在免疫中起到重要作用[21-22]。本试验研究表明，400、800 mg/kg博落回提取物添加组的犊牛的血清中IgG、IgA、IL-2含量显著高于1组，说明400、800 mg/kg博落回提取物添加可以增强犊牛的免疫机能。博落回提取物所含活性物质可以激活犊牛的免疫系统，促进犊牛体内的免疫球蛋和细胞因子的合成与分泌，提高其体液免疫和细胞免疫，进而提高其机体的免疫机能。4结论添加400、800 mg/kg博落回提取物可以改善荷斯坦犊牛生长性能，提高养分表观消化率，改善血清生化指标，增强免疫机能。从经济角度考虑，400 mg/kg添加较适宜。