全株玉米青贮是反刍动物的重要饲料来源[1]。全株玉米青贮发酵过程极其复杂，所含微生物区系繁多，包括乳酸菌、酵母菌等。创造厌氧环境是青贮发酵成功的关键。大量研究表明，青贮添加剂能够显著提升玉米秸秆的青贮品质[2-3]。包万华等[4]报道，青贮饲料添加剂可以分为抑制性添加剂、营养性添加剂、乳酸菌、酶制剂等。乳酸菌等通过降解粗纤维结构提高发酵乳酸含量，降低pH值，达到青贮目的[5]。与单一添加青贮菌相比，不同添加剂组合能够显著提高青贮发酵品质[6]。郭海明等[7]研究表明，青贮菌、纤维分解酶等同时青贮稻秸能够更好地提升青贮品质。本试验以复合微生态制剂作为青贮添加剂，探讨发酵过程中全株玉米青贮发酵品质及营养成分的变化，为全株玉米青贮调制提供参考。1材料与方法1.1试验材料地方全株玉米秸秆（带穗）按照窖贮常规程序制作青贮。在装填过程中，按照试验设计要求，将复合微生态制剂（山东宝来利来生物工程股份有限公司生产）溶液分别喷洒于玉米秸秆上（为了保证喷洒均匀，复合微生态制剂提前使用少许水稀释成溶液），压实，封窖。复合微生态制剂由葡萄糖、乳酸片球菌、植物乳杆菌及其代谢产物组成，其中乳酸片球菌≥1.0×109 CFU/g，植物乳杆菌≥3.0×108 CFU/g。1.2试验设计试验分为3个组，分别为不含微生态制剂（对照组）、添加全株玉米鲜重0.05%（0.05%组）和0.10%复合微生态制剂（0.10%组）。每个试验组做1个窖贮池，每次取样均从3个不同窖贮池中采集样品，分别测试各个窖贮池样品指标。每次采完样品后立即封盖，使青贮饲料保持密封状态。1.3测定指标及方法分别在青贮3、6、9、12个月时采集样品。使用自制青贮取样器（专利号：ZL 201420016054.2）取样，每次采集5个点（每1层）样品。将所采集的青贮混合，采用四分法进行取样，混匀并分装于塑料封口袋中，暂存于4 ℃冰箱中，待全部样品取完测定各项指标。1.3.1发酵品质参照DB15/T 1458—2018方法测定发酵品质指标，采用电位法测定青贮饲料pH值；采用高效液相色谱法测定青贮饲料中有机酸（乳酸、乙酸、丙酸、丁酸）含量；采用比色法测定青贮饲料中氨态氮含量的方法[8]。乙酸、丙酸、丁酸气相色谱仪条件：仪器为GC-9A型气相色谱仪（日本Shimadzu）；氮气为载气，流速为80 mL/min（12.5 MPa、0.2 MPa），氢气流速为50 mL/min（11 MPa、0.05 MPa），氧气流速为800 mL/min（12 MPa、0.35 MPa），调整测定压力为氮气0.185 MPa、氢气0.05 MPa、氧气0.15 MPa；柱温140 ℃、汽化温180 ℃、量程103 g/s、衰减度23；进样量1 μL。1.3.2营养成分按照GB/T 6435—2014、GB/T 6432—2018、GB/T 6438—2007、GB/T 20806—2006、NY/T 1459—2007测定干物质（DM）、粗蛋白（CP）、粗灰分（Ash）、中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）含量[9-13]，采用蒽酮-硫酸法测定可溶性淀粉（WSC）含量[14]。1.4数据统计与分析采用Excel 2007和SPSS 21.0统计软件对试验数据进行处理和方差分析，采用Duncan氏法进行多重比较检验，试验数据均以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1复合微生态制剂对全株玉米青贮发酵品质的影响（见表1）由表1可知，复合微生态制剂能够显著降低全株玉米青贮pH值和氨态氮含量（P0.05），其中0.10%复合微生态制剂能够显著增加乳酸含量（P0.05）。全株玉米青贮3个月，乙酸、丙酸和丁酸等挥发性脂肪酸含量未发生显著变化（P0.05）；青贮6个月后，添加复合微生态制剂的试验组乙酸、丙酸和丁酸含量显著高于对照组（P0.05），且随青贮时间的延长而增加。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.15.021.T001表1复合微生态制剂对全株玉米青贮发酵品质的影响项目取样时间/月36912pH值对照组4.95±0.01a4.73±0.02a4.50±0.01a4.08±0.02a0.05%组4.16±0.04b4.00±0.02b3.89±0.01b3.77±0.01b0.10%组3.80±0.00c3.73±0.04c3.84±0.01b3.63±0.01c氨态氮/%对照组0.18±0.07a0.20±0.04a0.24±0.03a0.20±0.06a0.05%组0.06±0.01b0.05±0.08c0.08±0.04b0.07±0.03b0.10%组0.04±0.02c0.07±0.02b0.08±0.02b0.08±0.02b乳酸/(%DM)对照组3.86±0.12b3.81±0.09b3.65±0.14b3.12±0.06b0.05%组3.93±0.11ab4.05±0.14ab3.82±0.12ab3.21±0.21ab0.10%组3.99±0.12a4.11±0.10a3.89±0.26a3.24±0.10a10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.15.021.T002项目取样时间/月36912乙酸/(mmol/L)对照组2.66±0.575.43±0.58b13.08±0.58b14.61±0.58b0.05%组2.62±0.5722.35±0.58a43.19±0.90a50.66±1.23a0.10%组2.60±0.5721.71±0.58a46.55±0.58a51.25±0.58a丙酸/(mmol/L)对照组0±00±0c0±0c0±0c0.05%组0±01.66±0.58b2.22±0.29b2.41±0.32b0.10%组0±02.63±0.58a2.72±0.58a2.94±0.58a丁酸/(mmol/L)对照组0±00.31±0.06c0.88±0.06b0.74±0.06b0.05%组0±04.56±0.58b10.38±0.73a14.26±0.47a0.10%组2.83±0.5711.44±0.58a11.93±0.58a15.51±0.58a注：同一指标同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2复合微生态制剂对全株玉米青贮营养成分的影响（见表2）由表2可知，复合微生态制剂对全株玉米青贮饲料的DM和Ash含量均无显著影响（P0.05）；全株玉米青贮6个月与12个月，复合微生态制剂组CP含量显著高于对照组（P0.05）；复合微生态制剂的试验组WSC含量显著高于对照组（P0.05）；全株玉米青贮12个月，0.10%添加组NDF含量显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.15.021.T003表2复合微生态制剂对全株玉米青贮营养成分的影响项目取样时间/月36912CP对照组8.72±0.218.07±0.03c8.20±0.04b7.53±0.05c0.05%组8.78±0.439.10±0.03b8.61±0.09ab8.09±0.00b0.10%组8.90±0.3110.66±0.08a9.09±0.01a9.49±0.03aDM（鲜重基础）对照组35.42±0.4534.08±0.0135.07±0.0333.11±0.210.05%组35.77±0.6134.24±0.0635.19±0.0633.31±0.110.10%组36.38±0.7834.41±0.0835.28±0.1333.26±0.18Ash对照组7.94±0.616.46±0.396.90±0.536.56±0.630.05%组7.37±0.416.06±0.716.56±0.826.91±0.660.10%组7.34±0.817.90±0.927.45±0.727.46±0.51WSC对照组1.73±0.01c2.31±0.02c1.80±0.03c2.09±0.03c0.05%组2.26±0.01b3.13±0.00b2.37±0.06b2.44±0.01b0.10%组3.62±0.08a5.17±0.03a2.93±0.07a2.90±0.10aNDF对照组44.81±0.8047.98±0.8943.26±0.2045.26±0.87a0.05%组44.06±0.2646.71±0.6943.18±0.6143.21±0.05ab0.10%组45.96±1.2246.23±0.8344.89±0.8342.06±0.13bADF对照组22.07±0.4723.68±0.3224.27±0.7123.26±0.200.05%组22.82±1.0022.41±0.9023.05±0.3122.58±0.260.10%组22.61±0.6323.11±0.3324.94±0.2323.51±0.79%3讨论优质的青贮饲料适口性好、鲜嫩汁液、消化率高。刘桂要等[15]研究发现，与玉米秸秆相比，全株玉米青贮的水分、CP和NDF含量升高，但CF、ADF、酸不溶灰分含量降低，营养物质的利用率明显提高。评价青贮饲料的质量，既要考虑感官指标和理化指标（DM、CP、NDF、ADF），又要考虑干物质消化率和pH值、WSC、有机酸、氨态氮含量等发酵指标[16]。pH值小于4.2，乳酸含量大于60%以及挥发性脂肪酸中乙酸、丙酸、丁酸含量分别小于20%、10%、1%的饲料为优质青贮饲料[17]。优质饲料中，WSC含量在原料中不低于鲜重的1.0%~1.5%[18]。氨态氮反映青贮发酵品质，其值越低越好[19]。孙贵宾等[20]研究发现，复合益生菌和纤维素酶的联合添加有效地提高了全株玉米青贮的品质。尉小强等[21]利用在全株青贮玉米中添加乳酸菌制剂对玉米青贮发酵微生物数量、有氧稳定性及青贮发酵品质影响进行研究，发现添加乳酸菌制剂均可以有效改善玉米青贮的发酵品质。李金俐等[22]研究发现，添加布氏乳杆菌可以提高乙酸含量，改善青贮饲料的品质，提高全株玉米青贮的有氧稳定性。本研究发现，复合微生态制剂能够提高全株玉米青贮饲料乳酸和挥发性脂肪酸含量，降低pH值，改善发酵品质，并且能够增加粗蛋白和可溶性碳水化合物含量，提高饲料营养价值。程光民等[23]研究发现，单一添加乳酸菌青贮玉米秸秆，其营养价值和感官指标无不良影响。4结论本试验条件下，添加复合微生态制剂能够改善青贮全株玉米发酵品质，提高营养价值，且以0.10%添加效果最佳。