鸡蛋是优质蛋白质供给品之一，鸡蛋的安全、营养是消费者和科研人员共同关注的热点。目前，国家已明令禁止饲料中使用抗生素。使用中草药添加剂能够改善鸡蛋品质，提高畜禽免疫力，是我国畜牧业可持续发展的重要举措[1-2]。在鸡饲料中添加银杏叶粉或桑叶粉可以显著促进鸡的生长发育，改善生产性能及蛋品质[3-4]。杜仲叶具有资源丰富、绿色、可再生等特点，能够补肝肾、强筋骨[5]。日粮中添加杜仲叶粉能够显著改善鸡的生产性能和肉品质，增强免疫力，提高产蛋率[6-8]。杜仲叶粉（提取物）具有提高肉鸡胴体品质、改善血液生化指标、降低鸡肝脏重等作用[9-11]。但是，在日粮中直接添加杜仲叶粉对蛋品质的研究相对较少。本试验研究杜仲叶粉对湖北贡鸡生产性能及蛋品质的影响，确定杜仲叶粉在蛋鸡饲粮中的最适添加量，为杜仲叶粉在蛋鸡生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料杜仲叶粉由国家林业和草原局泡桐研究开发中心提供。秋后采集，晒干，粉碎（过40目筛）处理，打包封存。经分析测定[11]，杜仲叶的常规营养成分（风干基础）为干物质（DM）89.36%、总能（GE）19.57 MJ/kg、粗蛋白（CP）12.36%、钙（Ca）2.03%、磷（P）0.05%。1.2试验设计试验于中国林业科学研究院经济林研究开发中心原阳基地进行。试验选取产蛋率、体重相近，健康状态良好的240日龄湖北贡鸡1 000只，随机分为5组，每组5个重复，每个重复40只蛋鸡。T0组（对照组）蛋鸡饲喂玉米-豆粕型基础日粮。试验T1、T2、T3和T4组蛋鸡分别饲喂添加含2.5%、5.0%、7.5%、10.0%杜仲叶粉的基础日粮。按鸡场常规管理模式进行管理，每日饲喂2次（8：00、16：00），自由采食、饮水。预试期2 w，正式试验期10 w。按照我国《鸡饲养标准》（NY/T 33—2004）要求配制玉米-豆粕型基础日粮。试验日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.15.012.T001表1基础日粮组成及营养水平（风干基础）原料组成含量/%营养水平合计100.0玉米63.0代谢能/(MJ/kg)11.15豆粕24.0干物质/%89.36沸石粉8.0粗蛋白/%12.36预混料5.0钙/%2.03磷/%0.05注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 700~1 000 IU、VD 1 000~1 500 IU、VE 20 mg、VK 10 mg、VB1 200 mg、VB2 6 mg、VB12 4 mg、泛酸40 mg、烟酸25 mg、胆碱600 mg、叶酸1 mg、生物素2 mg、铁60 mg、铜9 mg、锌80 mg、锰100 mg、碘200 mg、硒0.4 mg。2.营养水平中代谢能为计算值，其余均为实测值。1.3测定指标及方法1.3.1生产性能从正试试验期开始，以天为单位记录每重复产蛋数，产蛋率按每组试验鸡指数进行计算。分别在第2、4、6、8和10 w各处理每重复随机选取4枚当日产蛋。使用电子天平（精确至0.01 g）称量蛋重。1.3.2蛋品质使用电子天平（精确至0.01 g）称量蛋黄重；使用游标卡尺测量鸡蛋纵、横径；使用螺旋测微器分别测量蛋的钝端、中间和锐端3个部位蛋壳厚度（取平均值）；采用排水法测定鸡蛋体积。计算蛋黄指数和蛋形指数。蛋黄比重=蛋黄重/蛋重(1)蛋形指数=纵径/横径(2)在饲喂第10 w，每重复随机抽取5枚蛋，采用高效液相色谱（具体方法参照GB/T 22220—2008）测定蛋黄胆固醇（cholesterol）含量[12]；采用SKD-2000全自动蛋白质测定仪测定蛋清蛋白质含量；采用FT40索氏提取仪测定蛋黄粗脂肪（crude fat）含量；采用毛细管气相色谱法测定蛋黄中α-亚麻酸（α-linolenic acid，ALA）含量[13]，设置3次重复，每个重复5枚蛋，混合5枚蛋黄（蛋清）。1.4数据统计与分析利用Microsoft Excel 2016进行数据统计分析，利用SPSS 20.0进行单因素方差分析（One-way ANOVA），采用Duncan氏法进行多重比较，数据以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著，P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1杜仲叶粉对湖北贡鸡生产性能的影响（见表2、表3）由表2可知，在第8周时，日粮添加不同剂量杜仲叶粉的蛋鸡产蛋率均显著高于对照组（P0.05），其中添加7.5%杜仲叶粉极显著高于对照组（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.15.012.T002表2杜仲叶粉对湖北贡鸡日均产蛋率的影响组别2 w4 w6 w8 w10 wT0组17.74±1.3620.54±0.8129.88±0.6736.13±0.83Bb34.40±1.67T1组18.06±1.0830.32±0.5932.50±4.9647.02±2.37ABab43.60±4.09T2组16.32±1.6526.29±1.3635.57±2.5447.80±1.65ABab47.90±2.81T3组20.59±0.2532.24±1.0842.59±2.6957.92±1.87Aa54.41±3.82T4组17.09±1.6229.34±0.8443.99±3.1650.76±12.7ABa53.07±0.76注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05），不同大写字母表示差异极显著（P0.01），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。%由表3可知，日粮中添加不同剂量的杜仲叶粉对湖北贡鸡鸡蛋的平均蛋重均无显著影响（P0.05），平均蛋重随周龄的增加呈现逐渐增加的趋势，均在饲喂8 w周时最重。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.15.012.T003表3杜仲叶粉对湖北贡鸡平均蛋重的影响组别2 w4 w6 w8 w10 wT0组41.02±3.7840.07±1.2842.11±2.2450.96±3.7750.07±4.82T1组42.53±1.7037.67±2.8045.71±2.7750.53±3.1649.36±4.40T2组39.10±2.4341.54±4.3143.71±2.5851.75±5.2144.19±2.06T3组39.39±2.5539.73±3.3742.99±2.4951.33±2.9848.61±4.06T4组39.82±3.4241.68±3.3645.09±2.2048.14±2.5147.60±3.73g2.2杜仲叶粉对湖北贡鸡蛋品质的影响（见表4~表8）由表4可知，日粮中添加不同剂量的杜仲叶粉对湖北贡鸡的鸡蛋体积无显著影响（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.15.012.T004表4杜仲叶粉对湖北贡鸡鸡蛋平均体积的影响组别2 w4 w6 w8 w10 wT0组37.90±3.5837.42±1.2638.79±2.6147.49±3.1346.37±3.12T1组36.90±3.4137.70±1.3138.50±2.7447.10±3.0546.50±5.00T2组37.50±3.3936.70±4.3240.30±1.4848.50±4.9543.30±1.30T3组36.70±3.2736.52±1.9240.90±3.2148.21±2.9544.90±4.28T4组36.00±2.7837.50±3.5441.50±2.1444.70±1.9243.30±4.44cm3由表5可知，日粮中添加不同剂量的杜仲叶粉对湖北贡鸡的蛋壳厚度无显著影响（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.15.012.T005表5杜仲叶粉对湖北贡鸡蛋壳厚度的影响组别2 w4 w6 w8 w10 wT0组0.36±0.050.52±0.110.36±0.050.46±0.050.42±0.04T1组0.39±0.040.44±0.110.36±0.050.47±0.060.40±0.03T2组0.35±0.050.52±0.080.36±0.050.46±0.080.40±0.06T3组0.36±0.090.52±0.130.34±0.050.47±0.050.46±0.09T4组0.34±0.050.48±0.080.38±0.080.48±0.040.40±0.04mm由表6可知，日粮中添加不同剂量的杜仲叶粉对湖北贡鸡的蛋型指数无显著影响（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.15.012.T006表6杜仲叶粉对湖北贡鸡蛋形指数的影响组别2 w4 w6 w8 w10 wT0组1.36±0.031.34±0.041.39±0.081.34±0.031.36±0.04T1组1.39±0.061.34±0.041.37±0.061.39±0.041.39±0.09T2组1.35±0.061.32±0.051.37±0.061.37±0.041.33±0.03T3组1.29±0.061.34±0.061.36±0.081.39±0.051.35±0.04T4组1.28±0.041.38±0.071.27±0.081.40±0.111.34±0.07由表7可知，日粮中添加不同剂量的杜仲叶粉对湖北贡鸡鸡蛋的蛋黄重无显著影响（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.15.012.T007表7杜仲叶粉对湖北贡鸡蛋黄重的影响组别2 w4 w6 w8 w10 wT0组11.47±1.5111.34±0.9911.34±0.9911.34±0.9911.34±0.99T1组12.23±1.1911.32±0.8711.32±0.8711.32±0.8711.32±0.87T2组10.87±0.1812.28±1.4812.28±1.4812.28±1.4812.28±1.48T3组11.21±0.2911.95±0.5111.95±0.5111.95±0.5111.95±0.51T4组10.96±1.7812.23±1.1612.23±1.1612.23±1.1612.23±1.16g由表8可知，日粮中添加不同剂量的杜仲叶粉对湖北贡鸡鸡蛋的蛋黄比重无显著影响（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.15.012.T008表8杜仲叶粉对湖北贡鸡蛋黄比重的影响组别2 w4 w6 w8 w10 wT0组0.28±0.020.28±0.020.33±0.030.32±0.020.29±0.01T1组0.28±0.030.30±0.030.32±0.040.31±0.010.32±0.01T2组0.27±0.020.31±0.020.33±0.040.32±0.020.31±0.02T3组0.28±0.020.30±0.030.31±0.020.31±0.020.32±0.02T4组0.27±0.040.29±0.030.31±0.010.32±0.050.32±0.01%2.3杜仲叶粉对鸡蛋内在组分的影响（见图1）由图1（a）可知，各组在饲喂10周后，T3、T4组鸡蛋的蛋清蛋白质含量显著高于对照组（P0.05）。结果表明，日粮添加7.5%~10.0%的杜仲叶粉可以提高鸡蛋蛋清中蛋白质含量。由图1（b）可知，T2、T3组鸡蛋的蛋黄粗脂肪含量显著低于对照组（P0.05）。结果表明，日粮添加5.0%~7.5%的杜仲叶粉具有降低蛋黄粗脂肪的作用。由图1（c）可知，T2、T3和T4组蛋黄α-亚麻酸含量显著高于T0和T1组（P0.05）。结果表明，日粮中杜仲叶粉的添加量达5%时，蛋黄α-亚麻酸含量显著升高。由图1（d）可知，T2、T3和T4组鸡蛋的蛋黄胆固醇含量显著低于对照组（P0.05）。结果表明，日粮中杜仲叶粉的添加量达5%时，蛋黄胆固醇含量显著降低。图1杜仲叶粉对鸡蛋内在组分的影响注：不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母表示差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.15.012.F1a1（a）蛋清蛋白质10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.15.012.F1a2（b）蛋黄粗脂肪10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.15.012.F1a3（c）蛋黄α-亚麻酸10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.15.012.F1a4（d）蛋黄胆固醇3讨论3.1杜仲叶粉对湖北贡鸡生产性能的影响杜仲的活性成分应用于畜禽生产可以促生长，提高免疫力的功能，改善畜禽产品品质，提高养殖经济效益[14-15]。黄林等[16]在1日龄黄羽肉鸡基础日粮中添加不同比例的杜仲提取物，发现300 mg/kg杜仲提取物能够显著提高黄羽肉鸡的生产性能，改善肠道形态。张琳杰等[17]研究发现，添加杜仲叶提取物能调节蛋鸡脂肪代谢，改善饲料报酬和蛋品质。本试验中，各试验组产蛋率比对照组均有所提高，且以试验T3组（添加7.5%杜仲粉）效果最佳，与上述试验结果一致。结果表明，添加杜仲叶粉可以提高鸡的生产性能。原因可能是在鸡日粮中添加的杜仲叶粉富含绿原酸等活性成分，有助于改善鸡肠道菌群结构、增强免疫力，进而提高生产效率和产蛋品质[18]。3.2杜仲叶粉对鸡蛋外在品质的影响产蛋性能和蛋品质是重要的评价指标[19]。产蛋性能包括平均蛋重、产蛋率、蛋品质等；蛋品质主要通过蛋壳厚度、蛋形指数、体积、蛋黄重量及比重来评价[20-21]。本研究中，日粮添加不同水平的杜仲叶粉对鸡蛋的平均重量、体积、蛋壳厚度、蛋形指数、蛋黄重及蛋黄比重均未产生显著影响，但可以显著提高日产蛋率。李凤龙等[22]将杜仲叶发酵粉添加在蛋鸡日粮中，发现蛋鸡的全期产蛋率显著高于对照组。刘青翠等[23]、毛亚芳等[11]、张瑞仙[24]研究认为，杜仲叶粉（提取物）能够显著提高蛋产率，对蛋形指数、蛋重、蛋壳厚度、蛋黄重及比例无显著影响，与本试验结果一致。蛋品质受遗传、年龄、营养水平、环境因素等因素影响[25-26]。本试验正式试验期较短，未对蛋重、体积、蛋形指数产生显著影响[11,23]。3.3杜仲叶粉对鸡蛋内在组分的影响蛋清蛋白质、蛋黄中粗脂肪、不饱和脂肪酸和胆固醇含量是评价鸡蛋组分中营养价值的重要参数[27-28]。蛋清蛋白质是鸡蛋的主要营养成分[29]。日粮中添加不同剂量的杜仲叶粉可以提高蛋清蛋白质含量[7,11,23-24]，与本研究结果一致。陈玉敏等[9]研究发现，添加不同水平杜仲叶提取物能够在一定程度上降低AA鸡的肌肉粗脂肪含量。张青红[30]研究发现，添加2.5%和7.0%杜仲叶粉可以显著降低青鱼肌肉粗脂肪含量。本研究中也观察到相类似的结果，与对照组相比，杜仲叶粉添加水平在5.0%~7.5%时，蛋黄粗脂肪的含量显著降低。α-亚麻酸为人体必需的多不饱和脂肪酸[31-32]。唐艾嘉[33]研究表明，添加15%杜仲叶的玉米青贮可以提高动物体内α-亚麻酸含量。王翔等[34]发现，杜仲叶α-亚麻酸含量为55.5%（以脂肪计），母鸡有能力将日粮中的多不饱和脂肪酸沉积到蛋黄中，改善鸡蛋品质[35-36]。有研究表明，鸡蛋中的α-亚麻酸含量随日粮亚麻籽添加水平的增加而有所提升，与本试验结果类似[37]。原因可能与杜仲叶片中的α-亚麻酸被母鸡摄食后在蛋黄中富集有关[38]。鸡蛋中富含的胆固醇摄入过多会引起高血脂、高血压、冠心病等[27,39]。鸡蛋源胆固醇比其他食品源胆固醇更易导致人体血清胆固醇水平的提高，因而有必要对鸡蛋中胆固醇含量进行分析[40]。本研究中，日粮中添加杜仲叶粉可以降低蛋黄中胆固醇含量；随添加水平的增加，胆固醇下降趋势明显，可能因为杜仲叶中含有的绿原酸抑制脂质的吸收转化、抑制肠道胆固醇的吸收和减少肝脏胆固醇的合成，进而降低蛋黄中胆固醇的含量[23,41]。张瑞仙[24]、李凤龙等[22]、周岩等[42]研究认为，杜仲叶可以提高蛋鸡产蛋率，增强机体免疫力，改善蛋鸡体内胆固醇代谢，降低蛋黄中胆固醇含量，提高不饱和脂肪酸含量，改善蛋黄风味前体物质组成，与本试验结果一致。4结论日粮中添加杜仲叶粉可以显著提高湖北贡鸡日产蛋率。杜仲叶粉可以显著提高蛋清蛋白质和蛋黄α-亚麻酸含量，降低蛋黄中胆固醇和粗脂肪含量，改善鸡蛋品质。在鸡饲养中杜仲叶粉推荐添加量为7.5%。