拟穴青蟹（Scylla paramamosain）喜食鱼、虾、蟹和贝类等海洋生物。长期使用天然生物饵料会破坏生物资源多样性。生物饵料是病原菌的主要携带者，使拟穴青蟹易滋生病菌，造成大批量死亡[1-3]。为了减少海洋资源破坏和拟穴青蟹养殖病虫害等问题、促进拟穴青蟹增产增收，有必要研究拟穴青蟹人工配合饲料配方[4]。人工配合饲料已广泛应用于军曹鱼（Rachycentron canadum）[5]、大黄鱼（Larimichthys crocea）[6]和点带石斑（Epinepheluscoioides）[7-8]等海水养殖鱼类，具有改善生长性能、提高养殖成活率的效果、应对病虫害感染、缓解和降低对养殖水环境污染的作用[9-10]。目前，对青蟹营养需求的研究主要集中于幼体阶段[11-18]。在青蟹养成中，黄伟卿等[19]发现，采用37%鳀鱼、37%鱼粉、10%水、7%复合多维、5%脱壳素和4%石花粉组成的饲料配方能够有效加快青蟹的脱壳周期，促进青蟹的生长发育。黑水虻（Hermetia illucens L.）具有极高的营养价值，粗蛋白含量约42.1%，是优质的蛋白质饲料替代源[20]。目前，黑水虻已成为虹鳟（Oncorhynchus mykiss）等多种水生动物的饲料蛋白替代源[21-30]，具有提高动物生长性能、摄免疫等能力。但黑水虻在甲壳动物的研究中鲜见报道。本试验探究不同比例的黑水虻虫粉替代鱼粉对拟穴青蟹的生长性能、成活率及养殖水环境的影响，为拟穴青蟹人工配合饲料的研究提供参考。1材料与方法1.1试验材料黑水虻虫粉购自河南恩赛姆生物科技有限公司。拟穴青蟹挑选活力好、正常摄食、无伤残的海捕野生蟹，平均体重（57.1±2.5）g、壳长（3.68±0.21）cm。1.2试验设计试验选择540只拟穴青蟹，随机分为6个组，每组3个重复，每个重复30只拟穴青蟹。将拟穴青蟹养殖于养殖盒（规格：36 cm×26 cm×27 cm）中。基础配方及制备方法参照黄伟卿等[19]的研究。试验组分别采用黑水虻虫粉替代饲料中25%（C25）、50%（C50）、75%（C75）和100%（C100）的鱼粉，以饲喂基础配方（C0）及完全使用生物饵料（鲜杂鱼、缢蛏、花蛤混合投喂）（CK）为对照组。试验期60 d。1.3饲养管理养殖环境水温控制在24~28 ℃，日变化量不超过2 ℃；盐度为18‰~23‰，日变化量不超过5；pH值维持在7.9~8.2。根据青蟹的摄食特点，每日17：00~18：00进行投喂，日投喂量为体重的3%~5%；每日按时换水，清理残留饵料、粪便及死蟹，日换水量为总水量的15%。1.4测定指标及方法养殖60 d后，统计每组拟穴青蟹成活数量，并将每组剩余拟穴青蟹体表的水分擦干，利用电子天平（精确度0.1 g）逐一称重，利用游标卡尺（精确度0.01 cm）测量甲壳长，主要监测指标为氨氮和活性磷酸盐。样品采集、贮存、运输、前处理分析均按海洋监测规范[31]进行。计算平均壳长绝对增加率、平均体重绝对增加率、养殖成活率（SR）、脱壳周期（T）。平均壳长绝对增加率(cm/d)=(L2-L1)/(t2-t1) (1)平均体重绝对增加率(g/d)=(m2-m1)/(t2-t1) (2)养殖成活率=N/n×100% (3)脱壳周期=t00-t0 (4)式中：N为试验终拟穴青蟹存活数；n为试验初拟穴青蟹数量；m2为末重，m1为初重；L2为试验终甲壳长；L1为试验始甲壳长；t2为试验终时间，t1为试验始时间；t00为本次脱壳时间；t0为上一次脱壳时间。1.5数据统计与分析采用SPSS 17.0软件进行数据统计分析，采用Duncan氏法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1黑水虻虫粉对拟穴青蟹养殖成活率和脱壳周期的影响（见表1）由表1可知，C50组拟穴青蟹的成活率显著高于CK组（P0.05）；C25组拟穴青蟹的养殖成活率显著高于CK组（P0.05），显著低于C0组（P0.05）；C75组和C100组拟穴青蟹的养殖成活率均显著低于C0组（P0.05）。C50组与C25组拟穴青蟹的平均蜕壳周期均显著低于CK组与C0组（P0.05）；C100组拟穴青蟹的平均脱壳周期显著高于对照组CK（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.16.011.T001表1黑水虻虫粉对拟穴青蟹成活率和脱壳周期的影响组别成活率/%脱壳周期/dC25组65.5±1.6b26.0±2.0cC50组75.0±4.8a25.5±2.5cC75组25.5±1.8c28.5±3.0bcC100组30.0±2.5c31.5±3.5aC0组70.0±2.5a29.0±2.5bCK组40.0±2.8c29.5±3.5b注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2黑水虻虫粉对拟穴青蟹生长性能的影响（见表2）由表2可知，C50组拟穴青蟹的平均体重绝对增加率显著高于其他各组（P0.05），C100组的平均体重绝对增加率显著低于其他各组（P0.05）。C50组、C75组拟穴青蟹的平均壳长增加率显著高于CK组（P0.05），低于C0组（P0.05）。C100组的平均壳长增加率显著低于C0组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.16.011.T002表2黑水虻虫粉对拟穴青蟹生长性能的影响组别平均壳长增加率/(cm/d)平均体重绝对增加率/(g/d)C25组0.091±0.010c1.452±0.050bcC50组0.096±0.010ab1.594±0.080aC75组0.094±0.011ab1.410±0.080bcC100组0.085±0.010d1.129±0.040eC0组0.098±0.015a1.485±0.050bCK组0.089±0.015cd1.323±0.050d2.3黑水虻虫粉对青蟹养殖水体氨氮和活性磷酸盐含量的影响（见表3、表4）由表3可知，CK组养殖水体中氨氮含量呈线性递增趋势；其他组氨氮含量在18 d后呈线性递增趋势，至第54 d趋向稳定；试验组氨氮含量维持在0.05~0.15 mg/L。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.16.011.T003表3黑水虻虫粉对水体中氨氮含量的影响组别6 d12 d18 d24 d30 d36 d42 d48 d54 d60 dC25组0.050.060.070.070.080.100.110.120.130.13C50组0.050.060.070.080.080.090.100.110.120.12C75组0.060.080.080.100.110.120.130.140.150.15C100组0.060.070.090.090.110.120.130.140.140.15C0组0.050.060.070.090.100.110.130.140.150.15CK组0.070.090.110.120.130.150.160.170.180.19mg/L由表4可知，CK组养殖水体中活性磷酸盐的含量呈线性递增趋势，试验组活性磷酸盐的含量维持在0.020~0.042 mg/L。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.16.011.T004表4黑水虻虫粉对水体中活性磷酸盐含量的影响组别6 d12 d18 d24 d30 d36 d42 d48 d54 d60 dC25组0.0200.0240.0260.0290.0300.0300.0300.0350.0360.037C50组0.0210.0230.0250.0280.0300.0300.0300.0340.0400.040C75组0.0220.0230.0260.0290.0310.0330.0350.0360.0380.041C100组0.0200.0220.0260.0280.0310.0340.0370.0390.0420.040C0组0.0210.0230.0250.0260.0300.0320.0340.0360.0400.041CK组0.0280.0320.0360.0370.0400.0410.0430.0470.0510.053mg/L3讨论3.1黑水虻虫粉对拟穴青蟹生长性能的影响韩星星等[22]研究表明，黑水虻虫粉中的某些必需氨基酸（如赖氨酸、蛋氨酸和精氨酸）含量低于鱼粉，随着鱼粉替代水平的上升，饲料中这些必需氨基酸含量呈现下降趋势，所配制的饲料中的营养比例不能满足拟穴青蟹的生长需求，从而导致其生长受到抑制。黑水虻虫粉中含有水产动物生长所必需的蛋白质和脂肪，饲料中的粗灰分含量随着黑水虻虫粉替代鱼粉比例升高而增加，可能会降低饲料的适口性，且饲料中可消化利用营养物质随之减少[32-33]，进而降低饲料的利用率影响拟穴青蟹的生长。本试验中，黑水虻虫粉替代比为50%的拟穴青蟹脱壳时间最快，且平均壳长增加率与平均体质量绝对增加率表现较好，当替代比大于50%时，拟穴青蟹的生长性能下降，与上述研究一致。3.2黑水虻虫粉对拟穴青蟹养殖成活率和水环境的影响本试验中，黑水虻虫粉替代50%鱼粉时，拟穴青蟹的成活率极显著高于CK组，过高水平（大于50%）时，会造成不良影响。黑水虻虫粉中不仅含有水产动生物长所必需的蛋白质和脂肪，还含有溶菌酶、抗菌肽、凝集素等多种免疫成分[34]。将黑水虻虫粉代替鱼粉在金头鲷、鲈鱼、大黄的存活试验中，发现3种鱼的成活率随鱼粉替代比的增加，呈现先上升后下降的趋势[34]。于怀龙等[32]研究表明，黑水虻幼虫中必需脂肪酸含量为8.2%，某些必需氨基酸含量低于鱼粉，随着黑水虻虫粉比例的增加，饲料中必需氨基酸、多不饱和脂肪酸、DHA及EPA等生长发育所必需的物质不足以满足拟穴青蟹的需求。此外，氨氮是养殖水体中的主要污染产物，主要源自残饵及水产动物排泄物。氨氮先经亚硝化细菌转变为亚硝氮，再转变为无毒性的硝氮，而氨氮和亚硝氮含量增高会对水产动物产生毒副作用[35-36]，如破坏甲壳类动物血蓝蛋白运输氧的功能[37]。活性磷酸盐含量过高会破坏养殖水体的微生物平衡，造成大量藻类繁殖，消耗水体中的溶解氧，对水体中的养殖动物造成危害。黄伟卿等[19]以软颗粒饲料投喂拟穴青蟹，对养殖水体起到一定的保护作用。本试验中，投喂生鲜饵料的水体中氨氮与磷酸盐含量随着时间增加呈现递增的趋势，而投喂饲料的各试验组中，水体中氨氮与磷酸盐含量处于较低水平，且以黑水虻替代比为50%时最为稳定，与上述研究相符。50%的黑水虻虫粉替代鱼粉比对拟穴青蟹的生长与免疫具有促进作用，能够保护水质，提高拟穴的成活率。3.3黑水虻虫粉代替鱼粉应用于人工配合饲料的可行性分析鱼粉具有适口性好、氨基酸平衡、易消化等特点，是水产动物配合饲料主要的蛋白来源。随着海洋生物资源的开发和利用，鱼粉资源日益紧缺，使得鱼粉供不应求。为了水产行业的持续发展，找到适合的替代蛋白资源已迫在眉睫。对于肉食性水产动物而言，植物性蛋白源具有适口性差、转化率低、氨基酸不平衡等特点[38]；昆虫性蛋白属于动物蛋白，具有成本低、资源丰富、适口性好、氨基酸平衡等特点。黑水虻是1种腐生性资源昆虫，主要以畜禽粪便和生活垃圾为食，而黑水虻幼虫体内含有较高的蛋白质与氨基酸。目前。有关黑水虻作为替代蛋白源，在杂交鳢[乌鳢（Channa argus）♂×斑鳢（C. maculata）♀][27]、锦鲤（Cyprinus carpio L.）[39]、黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco）[40]、虹鳟[21]、罗非鱼（Oreochromis）[41]与斑点叉尾鯝（Ictalurus punctatus）[42]等淡水鱼中进行研究。结果表明，适宜比例的黑水虻虫粉替代鱼粉对鱼类的生长有促进作用。本研究以50%比例将黑水虻幼虫代替鱼粉应用于青蟹人工配合饲料中，使其成长与存活均得到了较好的提升，表明黑水虻在青蟹人工配合饲料中具有广泛前景。4结论将黑水虻虫粉以50%的比例替代鱼粉制作配合饲料对拟穴青蟹有促进生长和发育的作用；当黑水虻虫粉完全替代鱼粉时，对拟穴青蟹生长和存活具有负面影响。