池塘内循环水养殖模式(IPRS)是1种新兴的养殖模式[1],其流水槽系统内构建推水单元、养殖单元、粪污收集单元,系统外构建养殖尾水净化单元,可以实现养殖用水高效净化和高效率利用[2],增加养殖效益[3]。近年来,研究人员开展很多品种的适应性研究,包括罗非鱼[3-5]、斑点叉尾鮰[6]、草鱼[7]、三角鲂[8]、大口黑鲈[9]、黄颡鱼[10]等,均取得较好的效果。新疆地区的气候条件特殊,水资源的约束和水体封闭的特征有必要推广应用该模式。因此,本试验对比分析两种不同养殖模式下罗非鱼的生长性能与肌肉组分的差异,为该模式的应用推广提供参考。1材料与方法1.1试验设计试验组为池塘内循环水养殖模式,水面面积9.33 hm2,有流水槽8条,每条流水槽长22 m、宽5 m、水深1.8 m。放养密度为15 000尾/槽,平均体重为(40.01±8.66)g/尾;尾水净化单元放养均重约1 kg/尾的鲢鳙鱼(鲢、鳙分别为100尾/667m2、60尾/667m2);水面种植水蕹菜,种植面积为水面面积的6.5%。对照组为土池塘主养罗非鱼模式,水面面积1 hm2。放养密度1 500尾/667m2,平均体重为(39.95±11.05)g/尾,套养鲢、鳙分别为100、50尾/667m2,鲢鳙均重约1 kg/尾。试验期143 d。基础饵料及营养水平见表1。每日投饵率为3%~5%。试验组推水速度(0.30±0.05)m/s;均采用底部微孔增氧。养殖期间,溶氧3.17~12.38 mg/L、水温21~29 ℃、pH值7.3~7.8。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.16.009.T001表1基础饵料组成及营养水平原料组成含量营养水平合计100.00鱼粉18.40粗蛋白33.65豆粕9.70粗脂肪7.90菜粕18.10灰分8.90小麦粉27.40次粉9.70鱼油5.10羧甲基纤维素2.00微晶纤维素6.60预混料3.00注:1.每千克预混料为饵料提供:VA 280 000 IU、VB1 131 mg、VB2 130 mg、VB6 131 mg、VC 1 900 mg、VE 1 400 mg、VK3 70 mg、VD3 50 000 IU、泛酸钙400 mg、氯化胆碱38 000 mg、烟酸5 000 mg、叶酸200 mg、肌醇27 000 mg、生物素30 mg、NaCl 50 000 mg、MnSO4·H2O 3 000 mg、FeSO4·H2O 9 000 mg、ZnSO4·H2O 5 500 mg、CuSO4·5H2O 1 200 mg、MgSO4·H2O 10 000 mg、Na2SeO3 20 mg、KI 150 mg、CaH2PO4 300 000 mg。2.营养水平均为实测值。%1.2测定指标及方法1.2.1生长性能采样前饥饿24 h,分别从对照组池塘随机捕捞40尾、试验组每条流水槽随机捕捞5尾(合计40尾),测量体长、体重、内脏重、肝脏重,计算生长性能指标。增重率(WGR)=Wt-WiWi×100% (1)肝体指数(HSI)=WhWt×100% (2)脏体指数(BI)=WbWt×100% (3)肥满度(HSI)=WtL3×100% (4)肠脂指数(BI)=WeWt×100% (5)式中:Wi为鱼初重(g);Wt为鱼末重(g);t为试验时间(d);L为鱼体全长(cm);Wh、Wb、We分别为肝脏、内脏、肠系膜重量(g)。1.2.2肌肉质构特性采集两种模式罗非鱼机体侧线上方的肌肉,切成1 cm×1 cm×1 cm的小块。利用TA.XT.Plus型物性测试仪(英国STablele Micro Systems公司),使用平底柱形探头P/36R,对试样进行2次压缩即TPA测试。测试条件为测试前速率3 mm/s、测试速率2 mm/s、测试后速率2 mm/s、压缩程度65%、停留间隔时间5 s,负重探头类型为Auto-5 g,数据收集率为200 pps。样品TPA测试于室温下进行。1.2.3肌肉常规营养成分分别采集两种模式下罗非鱼机体侧线上方肌肉约5 g,同组混合得到混合样。参照GB 5009.3—2016、GB 5009.5—2016、GB 5009.6—2016、GB 5009.4—2016的方法分别测定其水分、粗蛋白、粗脂肪和粗灰分含量;参照GB 5009.124—2016的方法测定其氨基酸含量;参照GB 5009.168—2016的方法测定其脂肪酸含量。1.2.4肌肉氨基酸营养价值评价根据FAO/WHO 1973年建议的氨基酸评分标准模式和全鸡蛋蛋白质的氨基酸模式分别计算氨基酸评分(AAS)、化学评分(CS)和必需氨基酸指数(EAAI)。AAS=试验样品中氨基酸含量(mg/g Pro)FAO/WHO评分标准模式中同种氨基酸含量(mg/g Pro) (6)CS=试验样品中氨基酸含量(mg/g Pro)全鸡蛋蛋白中同种氨基酸含量(mg/g Pro) (7)EAAI=100aae×100bbe×⋯×100iien (8)式中:n为必需氨基酸(EAA)个数;a、b、……、i为试验样品蛋白质的EAA含量(mg/g Pro);ae、be、……、ie为全鸡蛋蛋白质的EAA含量(mg/g Pro)。1.3数据统计与分析试验数据采用Excel 2010和SPSS 24.0软件进行统计分析,采用单因素方差分析进行显著性检验,结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1两种养殖模式对罗非鱼生长及肌肉质构特征的影响(见表2)由表2可知,与对照组相比,试验组罗非鱼的末重显著提高(P0.05)。试验组罗非鱼的肝体指数、脏体指数均显著低于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.16.009.T002表2两种养殖模式对罗非鱼生长及肌肉质构特征的影响(n=40)项目对照组试验组项目对照组试验组初重/(g/尾)39.95±11.0540.01±8.66硬度/g1 801.34±676.991 947.79±666.98末重/(g/尾)573.90±31.83652.70±25.26*硬度/N17.67±6.6419.10±6.54增重率/%1 336.551 531.34弹性/mm0.65±0.030.65±0.03肝体指数/%3.29±0.13*2.37±0.09凝聚性/mJ0.48±0.040.50±0.04肥满度/(g/cm3)2.07±0.012.28±0.37咀嚼性/mJ563.70±193.42635.66±213.43脏体指数/%10.42±0.66*8.54±0.42回复性0.23±0.030.25±0.02肠脂指数/%3.66±0.372.81±0.82注:*表示两组数据差异显著(P0.05);下表同。2.2两种养殖模式对罗非鱼肌肉常规营养成分的影响(见表3)由表3可知,与对照组相比,试验组罗非鱼肌肉中粗蛋白、粗脂肪含量显著提高7.14%、14.29%(P0.05),粗灰分含量显著降低(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.16.009.T003表3两种养殖模式下罗非鱼肌肉常规营养成分比较组别水分粗蛋白粗脂肪粗灰分对照组74.50±0.4718.20±0.280.70±0.042.50±0.09*试验组75.40±0.5019.50±0.43*0.80±0.04*2.10±0.11%2.3两种养殖模式对罗非鱼肌肉氨基酸含量的影响及营养品质评价(见表4、表5)由表4可知,试验组罗非鱼肌肉中EAA总量显著提高9.46%(P0.05),TAA、DAA总量提高4.73%和2.70%(P0.05)。与对照组相比,试验组除Glu、Arg降低外(P0.05),Thr、Ala含量接近,其他各组分氨基酸均不同程度升高,EAA中Leu、Phe含量显著升高(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.16.009.T004表4两种养殖模式对罗非鱼肌肉氨基酸含量的影响(鲜样)项目对照组试验组Asp※●1.45±0.131.48±0.22Thr★0.78±0.190.78±0.15Ser●0.64±0.080.67±0.11Glu※●2.76±0.132.70±0.26Pro●0.25±0.060.26±0.07Gly※●1.52±0.121.54±0.13Ala※●1.60±0.151.60±0.16Val★0.80±0.200.83±0.13Met★0.52±0.100.60±0.08Ile★0.71±0.130.76±0.10Leu★1.57±0.061.73±0.03*Tyr※●0.76±0.100.90±0.11Phe★※0.79±0.021.01±0.01*Lys★1.48±0.091.58±0.12His#0.53±0.110.61±0.10Arg#0.94±0.060.85±0.12氨基酸总量(TAA)17.11±0.6717.92±0.43EAA6.66±0.307.29±0.23*DAA8.12±0.368.34±0.40SEAA1.47±0.101.46±0.11NEAA7.53±0.487.68±0.30注:★为必需氨基酸(EAA);#为半必需氨基酸(SEAA);※为呈味氨基酸(DAA);●为非必需氨基酸(NEAA)。g/100 g由表5可知,从AAS和CS结果看,试验组第一限制性氨基酸分别为Val、(Met+Cys),第二限制性氨基酸分别为(Met+Cys)、Ile;而对照组第一限制性氨基酸均为(Met+Cys),第二限制性氨基酸分别为Val、Ile。其他氨基酸评分结果均接近或优于FAO/WHO标准模式或全鸡蛋蛋白模式。在EAAI方面,试验组比对照组高9.25%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.16.009.T005表5两种模式下罗非鱼肌肉的EAA含量、AAS、CS及EAAI项目FAO/WHO标准模式全鸡蛋蛋白模式对照组试验组AASCS对照组试验组对照组试验组Thr*404742.8642.861.071.070.910.91Val*505043.9645.600.88▲▲0.91▲0.940.97Met+Cys355728.5732.970.82▲0.94▲▲0.61▲0.70▲Ile*405439.0141.760.981.040.83▲▲0.89▲▲Leu*708686.2695.051.231.361.842.02Phe+Tyr609385.16104.951.421.751.812.23Lys557081.3286.811.481.581.731.85合计350457407.14450.00EAAI84.5892.41注:▲为第一限制性氨基酸,▲▲为第二限制性氨基酸mg/g Pro2.4两种养殖模式对罗非鱼肌肉脂肪酸含量的影响(见表6)由表6可知,本研究检测到13种脂肪酸,其中饱和脂肪酸5种,不饱和脂肪酸8种。试验组TFA、TUFA、TSFA均分别高于对照组18.46%、17.41%、20.49%。与对照组相比,试验组中C20∶1、C20∶3不饱和脂肪酸含量均显著升高(P0.05),C18∶3含量显著降低(P0.05);饱和脂肪酸中C16∶0、C18∶0和C24∶0含量分别显著升高(P0.05),C14∶0含量显著降低(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.16.009.T006表6两种养殖模式对罗非鱼肌肉脂肪酸含量的影响(鲜样)项目对照组试验组C14∶00.015 8±0.000 9*0.008 0±0.000 8C16∶00.139 0±0.011 70.168 9±0.010 6*C16∶10.021 8±0.001 40.022 4±0.002 4C18∶00.032 4±0.001 00.041 6±0.001 4*C18∶10.154 0±0.018 70.161 0±0.016 4C18∶2(n-6)0.114 0±0.015 80.142 0±0.016 9C20∶10.014 6±0.000 80.037 6±0.001 0*C18∶3(n-3)0.012 5±0.001 3*0±0C20∶20.005 7±0.000 70.006 5±0.001 1C22∶00.008 4±0.001 10.009 4±0.000 9C20∶30.021 6±0.001 30.040 0±0.009 3*C24∶00.003 0±0.000 70.011 4±0.001 0*C22∶6(DHA,n-3)0.041 7±0.002 10.043 6±0.011 8脂肪酸总量(TFA)0.584 50.692 4不饱和脂肪酸(TUFA)0.385 90.453 1饱和脂肪酸(TSFA)0.198 60.239 3多不饱和脂肪酸(TPUFA)0.195 50.232 1单不饱和脂肪酸(TMUFA)0.190 40.221 0n-3/n-60.480.31g/100 g3讨论3.1两种养殖模式对罗非鱼生长及肌肉质构特征的影响养殖环境或条件对鱼类生长有显著影响[11],斑点叉尾鮰在高密度循环水养殖模式下的增重率、特定生长率和肥满度等指标不会降低[12];半滑舌鳎在循环水养殖模式下生长速度明显[13]。本研究中,试验组利用水生植物、滤食性鱼类以及集排污装置净化水体,保持良好的水环境,试验组罗非鱼的末重显著升高。阴晴朗等[3]认为,在循环水槽养殖模式下,低放养密度(180尾/m2)的罗非鱼生长性能显著高于高密度(270尾/m2)和传统池塘养殖(5尾/m2)。本试验组放养密度为90.91尾/m2,得到类似结果。原居林等[14]报道,池塘内循环养殖模式下,大口黑鲈的肥满度、肝体指数和脏体指数显著低于常规池塘养殖组,可能与系统推水速度带来水体流速刺激鱼类运动有关。水流速度适宜可以增加鱼体脂肪的沉积,提高蛋白质合成速率[15],使肥满度、脏体指数和肝体指数出现一定程度的上升[16-17],但超范围强度的水流会导致脂肪分解供能,造成肥满度等指标下降[18-19]。本研究中,试验组肝体指数、脏体指数、肠脂指数等低于对照组,表明水流速度刺激罗非鱼的运动而降低脂肪沉积。鱼肉的品质由口感、外观、加工特性等因素共同决定,并受本身质构特性、营养组成、色泽等影响。肌肉化学成分影响质构特性,其中硬度和咀嚼性与蛋白质含量呈显著正相关,与水分、脂肪呈负相关,会影响鱼肉的机械强度、口感[20-21]。本研究中,与对照组相比,试验组罗非鱼的硬度、弹性、凝聚性、咀嚼性和回复性有不同程度的升高,说明试验组质构特征略好于对照组,与周彬等[22]、翁丽萍等[23]研究结果一致。3.2两种养殖模式对罗非鱼肌肉常规营养成分的影响本研究中,试验组罗非鱼肌肉粗蛋白、粗脂肪含量显著高于对照组,粗灰分含量显著降低,与耿子蔚等[20]的研究结果相似。翁丽萍等[23]认为,鱼体肌肉营养成分与其质构特性存在相关性,随着鱼体的水分含量下降,脂肪含量上升,蛋白质含量略有下降,质构方面表现为硬度、弹性等各方面指标上升。本研究中,常规营养成分变化也带来质构特征的差异。3.3两种养殖模式对罗非鱼肌肉氨基酸含量及营养价值的影响蛋白质中氨基酸组成、含量是评价鱼体蛋白质质量和营养价值的重要指标[24]。本研究发现,试验组TAA、TEAA、EAA/TAA、TDAA均高于对照组,其中EAA显著高于对照组,表明试验组对增加鱼体EAA合成具有促进作用。在6种DAA中,试验组Phe显著高于对照组;在7种EAA中,均表现为试验组高于对照组,其中,Leu含量显著升高。本研究与叶鸽等[25]的研究结果基本一致,说明内循环水养殖模式能够增加罗非鱼肌肉中氨基酸含量,尤其能够增加EAA和DAA含量,提升肌肉质量和鲜味。程亚美等[26]根据AAS和CS评分得出盐碱水和淡水养殖模式下罗非鱼肌肉中第一限制性氨基酸均为(Met+Cys)。本研究中,试验组和对照组第一限制性氨基酸、第二限制性氨基酸均发生变化,可能与养殖条件有关。EAAI能够反映必需氨基酸含量与标准蛋白质相比接近的程度[27]。本研究中,2种养殖模式EAAI分别为84.58、92.41,表明罗非鱼为优质蛋白来源。3.4两种养殖模式对罗非鱼肌肉脂肪酸含量的影响脂肪酸的组成影响鱼肉品质和风味[28],生活环境影响鱼肉脂肪酸组成,以UFA组成和含量差异最为明显[20]。冯德品等[29]研究表明,微流水下,齐口裂腹鱼运动强度更大,肌肉中脂肪含量低,引起多不饱和脂肪酸含量的差异。Fuentes等[30]、赵立等[31]在鲈鱼和乌鳢的研究中得到类似结果。耿子蔚等[20]研究发现,流水养殖显著提高鱼肉多不饱和脂肪酸、ω-6脂肪酸以及油酸、亚油酸、EPA和DHA含量。本研究中,试验组TFA、TSFA、TMUFA和TPUFA均高于对照组,可能与流水养殖环境有关。n-3系列PUFA有较好的肿瘤抑制作用,而n-6系列PUFA有增加肿瘤危险性,鱼体肌肉中n-3系列PUFA和n-6系列PUFA的比例维持动态平衡[27]。本试验检测到2种n-3系列PUFA,1种n-6系列PUFA,试验组n-3/n-6较对照组低,与程辉辉[27]的研究结果类似。原因可能是两种不同养殖模式下,罗非鱼自身对n-3系列PUFA吸收利用强度差异造成,但有待进一步研究证实。4结论池塘内循环养殖模式下的罗非鱼具有更好的生长性能、肉质和营养价值。
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