布鲁氏菌病(Brucellosis)是由布鲁氏菌(Brucella)引起的一种人畜共患传染病[1]。人类布鲁氏菌病的流行病学与家畜布鲁氏菌病的发病率直接相关。OIE将其定为B类传染病,我国列为二类疫病[2-3]。该病的主要病症为母畜不孕、流产,公畜不育、关节炎等其他组织的局部病灶[4-5]。人被感染后会发生波浪热、浑身关节疼痛、乏力等临床症状,布鲁氏菌病的病程反复而漫长[6]。该病在世界各地170多个地区广泛流行,每年报告的病例超过50万,特别是发生在地中海、非洲和拉丁美洲部分地区以及西亚、南亚和东亚。在我国人、畜间布鲁氏菌病仍有发生,严重危害人类健康和畜牧养殖业的健康发展。近年来,国内、国外的布鲁氏菌病疫情呈现上升的趋势,并发现新的流行特征[7]。世界各国均相继开展防治清除布鲁氏菌病的相关防控计划,但布鲁氏菌病的防控将会是一个复杂而漫长的过程[8-9]。本次试验选择新疆福海县6个乡镇作为调查点,对福海县域利用虎红平板凝集试验(RBT)的进行初筛,进一步通过试管凝集试验(SAT)进行确诊的方式,对福海县牛羊的布鲁氏菌病发生情况进行流行病学调查,为防控布鲁氏菌病提供相关流行病学参数。1材料与方法1.1样品来源2019~2021年,以福海县6个乡镇为调查点,采集血样14 080份。其中,牛血样8 455份,羊血清5 625份。分离血清,标记编号、年龄。-20 ℃冷冻保存,待检。1.2试剂及仪器布鲁氏菌虎红平板凝集抗原、布鲁氏菌试管凝集抗原、布病标准阴阳性血清,购自中国兽医药品监察所。DIGICEN20-R高速低温离心机(西班牙ORTOALRESA公司)、台式低速离心机(AXTD5A)、赛默飞世尔MK3(Thermo Fisher)、试管(北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司)。1.3结果判定布鲁氏菌病临床检测依据GB/T 18646—2018《动物布鲁氏菌诊断技术》方法[10],RBT初筛,疑似样品进行SAT确诊。RBT:试验阴阳性成立的前提下,受检血清在4 min内出现肉眼可见凝集现象者判为阳性(+),呈均匀粉红色且无凝集现象者判为阴性(-)。SAT:试验阴阳性成立且抗原对照无自凝的前提下,牛1∶100血清稀释度,羊1∶50血清稀释度,出现“++”及以上凝集现象时,判定为阳性;牛1∶50血清稀释度,羊1∶25血清稀释度,出现“++”以上凝集现象时,判定为可疑。试验结果可疑的家畜经30 d后采血重检,如果仍为可疑,该牛、羊判为阳性。2结果与分析2.12019~2021年牛羊布鲁氏菌病检测结果(见表1)由表1可知,采集牛血清8 455份;RBT初筛阳性血清111份,将其进行SAT检测,确认阳性血清104份,确诊的牛布鲁氏菌病总阳性率为1.23%。其中,2019~2021年牛布鲁氏菌病感染率分别为1.47%、1.15%及0.70%。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.10.021.T001表12019~2021年牛羊布鲁氏菌病感染检测结果Tab.1Detection results of brucellosis infection in cattle and sheep of 2019~2021年度牛羊检测数SAT阳性数(RBT阳性数)阳性率/%检测数SAT阳性数(RBT阳性数)阳性率/%合计8 455104(111)1.235 62560(64)1.0720194 36464(66)1.471 94227(30)1.3920202 52629(33)1.152 14524(25)1.1220211 56511(12)0.701 5389(9)0.59注 :阳性率为SAT检测阳性数/当年总采集血清份数。采集羊血清5 625份;RBT初筛阳性血清64份,将其进行SAT检测,确认阳性血清60份,确诊的羊布鲁氏菌病总阳性率为1.07%。其中,2019~2021年羊布鲁氏菌病感染率分别为1.39%、1.12%及0.59%。各年份感染率均呈现下降趋势。2.2不同地区牛羊布鲁氏菌病检测结果(见表2)由表2可知,各地区牛布鲁氏菌病阳性率分别为福海镇0.76%、解特阿热勒镇1.66%、科克阿尕什乡0.88%、齐干吉迭乡0.80%、喀拉玛盖镇1.96%、阿尔达乡1.56%。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.10.021.T002表2不同地区牛羊布鲁氏菌病检测结果Tab.2Results of detection of brucellosis in cattle and sheep in different regions地区牛羊检测数阳性数阳性率/%检测数阳性数阳性率/%合计8 4551041.235 625601.07福海镇1 443110.761 03480.77解特阿热勒镇1 266211.66843121.42科克阿尕什乡1 360120.8887291.03齐干吉迭乡1 874150.801 088100.92喀拉玛盖镇1 425281.96937111.17阿尔达乡1 087171.56851101.18各地区羊布鲁氏菌病阳性率分别为福海镇0.77%、解特阿热勒镇1.42%、科克阿尕什乡1.03%、齐干吉迭乡0.92%、喀拉玛盖镇1.17%、阿尔达乡1.18%。其中,福海镇牛羊感染率均最低。2.3不同年龄牛羊布鲁氏菌病检测结果(见表3)由表3可知,试验共计采集牛血清8 455份,其中,牛布鲁氏菌病的感染年龄段从高到低分别为:2≤X3、3≤X6、0≤X2及X≥6,感染率分别为1.52%、1.17%、0.96%及0.83%。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.10.021.T003表3不同年龄牛羊布鲁氏菌病检测结果Tab.3Results of detection of brucellosis in cattle and sheep of different ages年龄牛羊检测数阳性数阳性率/%检测数阳性数阳性率/%合计8 4551041.235 625601.070≤X21 867180.961 080100.932≤X33 215491.522 194241.093≤X62 653311.171 436171.18X≥672060.8391590.98共计采集羊血清5 625份,羊布鲁氏菌病的感染年龄段从高到低分别为:3≤X6、2≤X3、X≥6及0≤X2,感染率分别为1.18%、1.09%、0.98%及0.93%。3讨论本研究中,采用RBT进行初筛,并进一步通过SAT复测,2个试验的显示阳性率基本一致。在流行病学研究中,建议使用两种测试方法,最大限度地提高测试结果的准确性[11]。RBT是一种高度敏感的测试,可以很容易地在现场条件下筛选,而SAT是高度特异和敏感的试验,通常在布鲁氏菌病的诊断中用作检测布鲁氏菌抗体的确诊试验[12-13]。本试验RBT初筛、SAT复测的结果显示,牛布鲁氏菌病总阳性率为1.23%,羊布鲁氏菌病总阳性率为1.07%。各乡镇的感染率略有不同。其中,牛布鲁氏菌病感染率为0.76%~1.96%,羊布鲁氏菌病感染率为0.77%~1.42%。不同乡镇的较高流行率可能与牧区养殖模式有关。家庭式养殖与牧区中的畜群聚集在一起。该地区大部分以放牧为主,公共草场地多且面积大。不同畜种、畜群规模、牧场和供水点等因素促进了疾病的传播,特别是在流产后增加共同喂养和饮水点的接触促进了布鲁氏菌生物的传播[14]。牧群的频繁迁徙可能会增加与不同邻近地区的其他潜在感染畜群接触的机会,尤其是大量未经检疫外县牲畜被带牧人带入本地[15-17]。全球动物产品贸易的不断增加也是导致各种病原体传播的原因。我国采取检测和屠宰政策以根除动物布鲁氏菌病,可以有效降低布鲁氏菌病的发病率和流行率。但是,难以实时确定布鲁氏菌病感染的动物、无法控制牧场动物的迁徙、购买动物时未进行布鲁氏菌病检测以及部分牧民对布鲁氏菌病缺乏教育等多种原情况均导致无法根除该疾病。因此,新疆阿勒泰地区在该病的防控中做了一系列改进工作。每年定期对该病进行检测筛查,一旦发现病畜,立即进行扑杀、焚烧等无害化处理,避免不必要的传播。外来引进的牛羊,均检测无布鲁氏菌病且隔离观察45 d,再次确认布病为阴性的牛羊方可混入大群;阳性病例立即扑杀并做无害化处理,彻底消灭传染源。饲养圈舍定期清理,动物粪便进行统一处理[18]。在牛羊生长旺季,必须保证棚舍干净、通风、保暖。有母畜生产时要进行隔离饲喂,随时检测群体身体质量,待稳定后才能混养饲喂[19]。对于有流产史或生殖器官有明显临床变化的动物,最好先分开饲养,并对其实验室检查,做好流产原因调查,无传染性风险后再合群饲养。通过不断努力,可以看出,近3年的牛羊布鲁氏菌病的感染率均呈现下降趋势。4结论福海县各乡镇均存在牛羊布鲁氏菌病,各乡镇的感染率略有不同;部分感染率较高的地区,应加强该地区的检疫扑杀工作。

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