壳聚糖硒是以壳聚糖和无机硒为原料通过化学方法合成的产物，能够同时发挥壳聚糖和有机硒的作用[1]。壳聚糖硒在动物生产方面的作用主要体现在促进动物生长、调节动物的免疫功能、拮抗霉菌毒素、增强机体抗氧化能力等多个方面[2-6]。低聚壳聚糖硒是壳聚糖硒的1种，低聚壳聚糖硒与普通壳聚糖硒的区别为低聚壳聚糖硒是以低分子量的壳聚糖（低聚壳聚糖）和无机硒为原料合成的。低聚壳聚糖硒中低聚壳聚糖的分子量较小，因此，低聚壳聚糖硒具有较高的水溶性和生物利用率[7-8]。目前低聚壳聚糖硒在蛋鸡生产中的研究较少。因此，本试验以海兰褐蛋鸡为试验材料，探究低聚壳聚糖硒对蛋鸡生产性能、抗氧化功能及肠道菌群的影响，以期为低聚壳聚糖硒在蛋鸡生产中的推广应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料和仪器低聚壳聚糖硒（天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室制备，其低聚壳聚糖分子量为5 000，硒含量2.26 mg/g）；谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性、总抗氧化能力（T-AOC）和丙二醛（MDA）测定试剂盒（南京建成生物工程研究所）；PF6-2型原子荧光分析仪（北京普析通用仪器有限责任公司）。1.2试验设计340日龄的海兰褐壳蛋鸡180只，随机分为3组，每组5个重复，每个重复12只蛋鸡。C组蛋鸡饲喂基础日粮，OC-Se 1组和OC-Se 2组蛋鸡分别饲喂添加100 mg/kg和200 mg/kg低聚壳聚糖硒的日粮。预试期7 d，正式试验期42 d。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.17.006.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平含量合计100.00玉米63.40代谢能/(MJ/kg)11.93豆粕21.40粗蛋白/%16.69大豆油2.00钙/%3.52玉米蛋白粉2.00非植酸磷/%0.36石粉7.20色氨酸/%0.175预混料4.00赖氨酸/%0.88蛋氨酸/%0.42蛋+胱氨酸/%0.74食盐/%0.35注：1.预混料为每千克日粮提供：锌80 mg、锰80 mg、铁60 mg、铜20 mg、钴0.1 mg、碘0.5 mg、VA 8 000 IU、VD 1 500 IU、VE 30 IU、VK 2 mg、硫胺素1.5 mg、核黄素6 mg、烟酸25 mg、泛酸10 mg、吡哆醇2 mg、生物素0.1 mg、叶酸0.5 mg、VB12 0.01 mg。2.营养水平中粗蛋白、钙和非植酸磷为实测值，其他均为计算值。1.3测定指标及方法1.3.1生产性能试验期间每日以重复为单位记录产蛋数、产蛋总重量、饲料消耗量，计算每组蛋鸡的产蛋率、平均蛋重、平均日采食量和料蛋比。产蛋率=产蛋数/蛋鸡数量×100%(1)平均蛋重=产蛋总重量/产蛋数(2)平均日采食量=蛋鸡耗料量/(饲养期×蛋鸡数量)(3)料蛋比=耗料量/产蛋重量(4)1.3.2抗氧化功能1.3.2.1血浆抗氧化功能试验结束时，每重复随机选取2只蛋鸡，常规制备血浆，利用测定试剂盒检测血浆T-AOC、GSH-Px活性和MDA含量。1.3.2.2鸡蛋抗氧化功能试验结束时，每重复随机选取10枚鸡蛋，利用测定试剂盒检测鸡蛋中T-AOC、GSH-Px活性和MDA含量。1.3.3盲肠肠道菌群试验结束时，每重复随机选取2只蛋鸡，无菌取盲肠内容物，利用平板计数法分别对盲肠大肠杆菌、沙门氏菌、乳酸菌和双歧杆菌数量进行测定。1.3.4鸡蛋硒含量试验结束时，每组重复随机选取10枚鸡蛋，参照Lü等[9]的方法，利用氢化物发生原子荧光光谱法测定鸡蛋硒含量。1.4数据统计与分析试验数据采用SPSS 23.0软件进行方差分析和LSD进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1低聚壳聚糖硒对蛋鸡生产性能的影响（见表2）由表2可知，OC-Se 1组和OC-Se 2组蛋鸡的料蛋比均显著低于C组（P0.05），OC-Se 2组蛋鸡的产蛋率极显著高于C组（P0.01），OC-Se 1组蛋鸡的产蛋率显著高于C组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.17.006.T002表2低聚壳聚糖硒对蛋鸡生产性能的影响组别平均日采食量/g平均蛋重/g料蛋比产蛋率/%C组119.11±1.4259.55±0.982.24±0.05b89.17±1.55AaOC-Se 1组118.58±1.0959.80±0.312.18±0.04a91.03±0.77ABbOC-Se 2 组118.27±0.9359.56±0.432.17±0.02a91.67±0.60Bb注：同列数据肩标小写字母不同表示差异显著（P0.05），大写字母不同表示差异极显著（P0.01），字母相同或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2低聚壳聚糖硒对蛋鸡血浆抗氧化功能的影响（见表3）由表3可知，OC-Se 1组和OC-Se 2组蛋鸡血浆T-AOC和GSH-Px活性均极显著高于C组（P0.01）；OC-Se 2组蛋鸡血浆GSH-Px活性极显著高于OC-Se 1组（P0.01），OC-Se 1组和OC-Se 2组蛋鸡血浆MDA含量均极显著低于C组（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.17.006.T003表3低聚壳聚糖硒对蛋鸡血浆抗氧化功能的影响组别T-AOC/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)MDA/(μmol/L)C组4.83±0.50A1 217.55±160.15A9.80±1.29BOC-Se 1组5.77±0.68Ba1 496.88±167.92B8.07±1.06AaOC-Se 2 组6.54±0.94Bb1 826.13±209.64C7.52±0.90Aa2.3低聚壳聚糖硒对鸡蛋抗氧化功能及硒含量的影响（见表4）由表4可知，OC-Se 1组和OC-Se 2组鸡蛋硒含量、T-AOC及GSH-Px活性均极显著高于C组（P0.01），OC-Se 2组鸡蛋硒含量及T-AOC活性极显著高于OC-Se 1组（P0.01），OC-Se 1组和OC-Se 2组鸡蛋MDA含量均极显著低于C组（P0.01），OC-Se 2组鸡蛋MDA含量显著低于OC-Se 1组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.17.006.T004表4低聚壳聚糖硒对鸡蛋抗氧化功能及硒含量的影响组别T-AOC/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)MDA/(μmol/L)Se/(mg/kg)C组2.38±0.34A166.93±31.51A49.41±8.25B0.24±0.02AOC-Se 1组3.46±0.34B224.52±32.69Ba32.64±3.95Ab0.40±0.04BOC-Se 2组4.15±0.58C236.48±32.08Ba25.84±6.79Aa0.56±0.04C2.4低聚壳聚糖硒对蛋鸡盲肠肠道菌群的影响（见表5）由表5可知，OC-Se 1组和OC-Se 2组蛋鸡盲肠大肠杆菌和沙门氏菌数量均极显著低于C组（P0.01），OC-Se 2组蛋鸡盲肠大肠杆菌数量极显著低于OC-Se 1组（P0.01），OC-Se 2组蛋鸡盲肠沙门氏菌数量显著低于OC-Se 1组（P0.05）；OC-Se 1组和OC-Se 2组蛋鸡盲肠双歧杆菌数量均极显著高于C组（P0.01），OC-Se 2组蛋鸡盲肠双歧杆菌数量显著高于OC-Se 1组（P0.05）；OC-Se 2组蛋鸡盲肠乳酸菌数量极显著高于C组（P0.01），OC-Se 1组蛋鸡盲肠乳酸菌数量显著高于C组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.17.006.T005表5低聚壳聚糖硒对蛋鸡盲肠肠道菌群的影响组别乳酸菌双歧杆菌大肠杆菌沙门氏菌C组8.13±0.27Aa8.00±0.26A7.69±0.34C5.71±0.29BOC-Se 1组8.62±0.35ABb8.59±0.37Ba7.29±0.29B5.16±0.35AbOC-Se 2 组8.88±0.42Bb8.99±0.40Bb6.67±0.20A4.81±0.40AalgCFU/g3讨论3.1低聚壳聚糖硒对蛋鸡生产性能的影响壳聚糖硒能同时发挥有机硒和壳聚糖生物学作用，对畜禽生产性能的积极作用。高忠新等[2]研究表明，壳聚糖硒能够提高肉仔鸡的平均日增重和平均日采食量，降低料重比。孟海蓝等[10]研究表明，壳聚糖硒能够明显增加蛋雏鸡28日龄的体重、耗料量，改善蛋鸡的生长性能。张璠[11]研究表明，0.3 mg/kg和0.5 mg/kg的壳聚糖硒对育肥猪料重比无影响，但能够提高育肥猪的日增重。本试验结果表明，低聚壳聚糖硒能够提高蛋鸡的产蛋率，降低料蛋比，表明低聚壳聚糖硒能够改善蛋鸡的生产性能。壳聚糖硒对动物生长或生产性能的促进作用可能主要是壳聚糖发挥作用的结果，因为只有硒含量极度缺乏时，补充硒元素才表现出促生长作用[12]。大部分研究和本研究结果均表明，基础日粮中的硒含量均处于正常水平。低聚壳聚糖硒对禽类生长的促进作用可能与壳聚糖成分改善禽类肠道的结构和功能[13]、调节肠道菌群[14]、提高营养物质的吸收有关。3.2低聚壳聚糖硒对蛋鸡和鸡蛋抗氧化功能的影响孟海蓝等[15]研究表明，壳聚糖硒能够增强蛋雏鸡血清抗氧化功能。陈秀芸等[16]研究表明，壳聚糖硒能够提高蛋用种公鸡肝脏抗氧化功能。方静等[17]研究表明，壳聚糖硒能够增强肉仔鸡血液抗氧化功能。本试验结果表明，低聚壳聚糖硒能够提高蛋鸡血浆中T-AOC和GSH-Px的活性、鸡蛋中的硒含量，降低蛋鸡血浆和鸡蛋中MDA含量，表明壳聚糖硒能够增强蛋鸡血浆和鸡蛋的抗氧化功能。有研究表明，低聚壳聚糖和硒均具有提高鸡的抗氧化功能的作用[18-19]。因此，低聚壳聚糖硒对蛋鸡抗氧化功能的提升可能是有机硒和低聚壳聚糖共同发挥作用的结果。3.3低聚壳聚糖硒对蛋鸡盲肠肠道菌群的影响营养物质的吸收与肠道的微生态平衡密切相关，肠道菌群失调导致营养代谢障碍，并引发相关疾病。高忠新等[2]研究发现，壳聚糖硒能够提高肉仔鸡盲肠内双歧杆菌和乳酸杆菌数量，减少大肠杆菌的数量，表明壳聚糖硒能够调节肠道菌群。本试验结果表明，低聚壳聚糖硒能够提高蛋鸡肠道中有益菌（乳酸菌和双歧杆菌）数量，降低有害菌（大肠杆菌和沙门氏菌）数量，起到调节肠道菌群的作用。有研究发现，无机硒或有机硒中单纯的硒成分对蛋鸡的肠道菌群无影响[20]。因此，低聚壳聚糖硒对蛋鸡肠道菌群的调节作用可能是壳聚糖成分发挥作用的结果。本试验中，低聚壳聚糖硒降低料蛋比的作用效果可能与其调节肠道菌群、提高营养物质的吸收利用效率有关。3.4低聚壳聚糖硒在蛋鸡生产中的应用剂量研究发现，蛋鸡饲料中有机硒的添加量一般不超过0.50 mg/kg，低聚壳聚糖硒的硒含量为2.26 mg/g[21-22]。因此，本试验中，低聚壳聚糖硒的添加剂量上限为200 mg/kg（硒的添加量为0.452 mg/kg）。蛋鸡饲料中硒的添加量一般不少于0.15 mg/kg，饲料中添加0.15 mg/kg的壳聚糖硒对蛋雏鸡的生长[10]及抗氧化功能[15]均有明显的提升作用。因此，本试验中低聚壳聚糖硒的添加剂量下限为100 mg/kg（硒的添加量为0.226 mg/kg）。20 mg/kg低聚壳聚糖能够有效降低蛋鸡血清甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇和极低密度脂蛋白胆固醇含量[23]；而200 mg/kg低聚壳聚糖能够显著提高鸡蛋哈夫单位，降低肠道大肠杆菌数量[24]。因此，100 mg/kg和200 mg/kg低聚壳聚糖的添加剂量能够对蛋鸡的相关指标产生明显影响。考虑到生产实践中低聚壳聚糖硒的应用成本（合成低聚壳聚糖硒的成本约300元/kg），将本试验中低聚壳聚糖硒的试验剂量确定为100 mg/kg和200 mg/kg。4结论低聚壳聚糖硒具有改善蛋鸡的生产性能、增强蛋鸡血浆及鸡蛋的抗氧化功能、调节盲肠肠道菌群的作用，低聚壳聚糖硒的应用剂量以200 mg/kg为宜。