团头鲂（Megalobrama amblycephala）属鲤形目（Cypriniformes），鲤科（Cyprinidae），鲌亚科（Culterinae），鲂属（Megalobrama），是我国淡水养殖的优良品种。团头鲂鱼的肉质鲜美、营养丰富。但是，由于团头鲂养殖规模的不断扩大，引发养殖环境污染、抗生素滥用等问题[1]，影响团头鲂的健康生长。中草药作为1种新型的绿色饲料添加剂，具有多种优点。有研究表明，中草药能够提高动物机体的消化和吸收代谢率，促进动物的生长发育[2-3]，刺激机体的免疫系统，抗病保健，改善肌肉品质[4-8]。中草药复方含有更多有效活性成分，因此中草药复方的作用更为广泛且显著[9]。但是，关于中草药复方制剂对特定品种团头鲂的生长和免疫方面的研究报道较少。本试验使用金盏花、黄芪、杜仲3种提取物，按不同配伍、不同剂量添加至团头鲂饲料中，通过一定周期投喂后，评估中草药复方制剂是否能够有效促进团头鲂的生长性能，并对团头鲂肝组织是否能够保持健康完整性进行试验验证，为在团头鲂养殖中推广应用复方中草药制剂提供参考。1材料与方法1.1试验材料团头鲂购自海兴农苗种厂。试验期投喂的饲料是在团头鲂全价饲料配方中，分别按2%和4%的量添加不同的中草药复方制剂（A、B、C），基础日粮组成及营养水平见表1。中草药复方制剂A以金盏花微粉为主，杜仲和黄芪微粉为辅；中草药复方制剂B以杜仲微粉为主，金盏花和黄芪微粉为辅；中草药复方制剂C以黄芪微粉为主，金盏花和杜仲微粉为辅。金盏花、黄芪、杜仲3种天然植物均购自广州清平中药材批发市场。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.17.010.T001表1基础日粮组成及营养水平项目A1组A2组B3组B4组C5组C6组D7组原料组成豆粕28.0026.0028.0026.0028.0026.0030.00菜籽粕25.0025.0025.0025.0025.0025.0025.00小麦20.0020.0020.0020.0020.0020.0020.00DDGS12.0012.0012.0012.0012.0012.0012.00统糠1.501.501.501.501.501.501.50米糠粕2.702.702.702.702.702.702.70大豆油2.002.002.002.002.002.002.00膨润土3.003.003.003.003.003.003.00磷酸二氢钙2.702.702.702.702.702.702.70氯化胆碱0.140.140.140.140.140.140.14食盐0.300.300.300.300.300.300.30矿物质预混料0.500.500.500.500.500.500.50抗氧化剂0.010.010.010.010.010.010.01防霉剂0.050.050.050.050.050.050.05多维预混料0.100.100.100.100.100.100.10中草药复方制剂A2.004.0000000中草药复方制剂B002.004.00000中草药复方制剂C00002.004.000合计100.00100.00100.00100.00100.00100.00100.00营养水平粗蛋白26.6025.7426.6025.7426.6025.7427.46粗脂肪2.002.002.002.002.002.002.00赖氨酸1.001.001.001.001.001.001.00粗纤维≤8.00≤8.00≤8.00≤8.00≤8.00≤8.00≤8.00粗灰分≤12.00≤12.00≤12.00≤12.00≤12.00≤12.00≤12.00钙≤4.00≤4.00≤4.00≤4.00≤4.00≤4.00≤4.00总磷≥0.50≥0.50≥0.50≥0.50≥0.50≥0.50≥0.50水分≤12.50≤12.50≤12.50≤12.50≤12.50≤12.50≤12.50注：1.预混料购自清远海贝生物技术有限公司。2.营养水平均为实测值。%1.2试验设计1 500尾试验团头鲂放入大型养殖循环系统中，暂养7 d，暂养期间投喂团头鲂基础饲料。正式试验开始后，随机挑选1 050尾（50±1.8）g的团头鲂，随机分到21个小型循环水试验系统中。21个小型循环水系统随机分成7组，编号分别为A1组、A2组、B3组、B4组、C5组、C6组、D7组，每组设3个重复，每重复50尾鱼，分别投喂对应编号的复方饲料。其中，D7组为对照组。1.3饲养管理循环水的水温保持在（18±1.5）℃，pH值7.2~7.6，试验过程溶氧保持在8.3~8.6 mg/L。每天7：00、12：00和18：00定时投喂，日均投饵率为3%。1.4测定指标及方法1.4.1样品采集试验正式开始后，投喂期间每天观察记录团头鲂的摄食、发病及死亡情况。试验开始0 d和第28 d结束时，对各组团头鲂进行采样并记录数据。每个试验组随机捞取10尾，整体称重、测量体长和内脏团和肝脏的重量。1.4.2生长性能增重率(WGR)=(W1-W0)/W0×100%(1)特定生长率(SGR)=(W1-W0)/T×100%(2)饲料系数(FCR)=饲料消耗量/(W1-W0)(3)肥满度=(体重/体长3)×100(4)肝胰体比=G1/A×100%(5)内脏体比=G2/A×100%(6)式中：W0为试验开始时初始鱼重；W1为试验结束后鱼重；T为养殖时间（d）；G1为试验鱼肝胰脏重量的平均值；G2为试验鱼脾脏重量的平均值；A为试验鱼平均体重。1.4.3组织切片制作与观察在试验第0、14、28 d，随机从各组中捞取10尾团头鲂，观察和记录团头鲂的体表特征、称重、测量鱼体长，完整分离内脏团和肝胰脏，分别称重，取下肝组织，制作组织切片并观察。1.5数据统计与分析试验数据采用SPSS 20.0软件进行单因素方差分析，采用Duncan's法进行多重比较，结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1中草药复方制剂对团头鲂生物学行为的影响试验期间，各试验组与对照组团头鲂均未出现疾病和死亡，摄食正常并且抢食积极，排泄物无异常，鱼体体色、鳞片、皮肤、鳍条等均无异常。因此，按试验剂量在团头鲂饲料中添加中草药复方制剂，试验期间团头鲂的生物学行为和临床行为无异常。2.2中草药复方制剂对团头鲂生长性能的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，连续投喂28 d，B4、C5和C6组团头鲂的WGR和SGR均显著提高（P0.05）；B4、C5和C6组团头鲂的FCR显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.17.010.T002表2中草药复方制剂对团头鲂生长性能的影响组别WGR/%SGR/(%/d)FCRA1组48.25±0.14a1.10±0.03a2.39±0.12bA2组51.34±0.16a1.12±0.04a2.36±0.09bB3组49.41±0.09a1.12±0.02a2.40±0.14bB4组52.46±0.11b1.21±0.03b2.29±0.21aC5组53.23±0.18b1.24±0.02b2.28±0.17aC6组53.37±0.15b1.25±0.04b2.22±0.13aD7组48.35±0.14a1.10±0.01a2.41±0.31b注：同列肩标字母不同表示差异显著（P0.05），字母相同或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2中草药复方制剂对团头鲂形体指标的影响（见表3）由表3可知，B4、C5和C6组团头鲂的肥满度显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.17.010.T003表3中草药复方制剂对团头鲂形体指标的影响组别肥满度/(g/cm3)肝胰体比/%脏体比/%A1组2.27±0.08a1.55±0.038.63±0.23A2组2.27±0.04a1.57±0.048.62±0.31B3组2.26±0.05a1.56±0.028.61±0.02B4组2.31±0.03b1.54±0.038.62±0.41C5组2.38±0.04b1.55±0.028.60±0.51C6组2.41±0.04b1.56±0.048.63±0.24D7组2.26±0.01a1.57±0.018.62±0.012.3中草药复方制剂对团头鲂肝脏组织形态的影响（见图1）由图1可知，投喂前，团头鲂的肝脏组织中肝细胞形态、肝血窦丰度和肝细胞索等均正常。图1各组肝脏组织形态（H&E，×400）10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.17.010.F1a110.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.17.010.F1a2试验第14 d，对照组团头鲂肝脏组织中有部分肝细胞出现肿大现象；A1组的肝血窦出现轻微萎缩现象；而A2、B3、B4、C5和C6组的肝细胞和肝血窦丰度均正常。试验第28 d，对照组的肝脏组织出现水肿，肝血窦丰度降低，且仍有部分肝细胞肿大；A1组的肝血窦仍处于萎缩状态；A2组的肝血窦也出现了轻微萎缩现象；B3、B4、C5和C6组的肝细胞、肝血窦丰度等均正常，其中C6组肝血窦丰度较高，肝细胞索清晰。3讨论3.1中草药复方制剂对团头鲂生长性能的影响研究发现，在饲料中添加中草药可以促进水产动物的生长[10]。张安青等[11]在虹鳟饲料中添加杜仲提取物，结果发现，杜仲提取物能显著提高虹鳟的增重率、生长率和肌肉中的粗蛋白含量。冷向军等[12]在草鱼上验证了杜仲具有同样效果。在鲤鱼、中华鳖的饲料中添加黄芪植物提取成分，也能够促进动物的生长[13-15]。本试验研究结果表明，在饲料中添加以金盏花为主的中草药复方制剂A、以杜仲为主的中草药复方制剂B和以黄芪为主的中草药复方制C后均能够在一定程度上提高团头鲂的生长性能。其中，中草药复方制剂B（4%的添加剂量）和中草药复方制剂C（2%和4%的添加剂量）的促进效果较为明显。原因可能是：中草药复方制剂C以黄芪为主，而黄芪多糖是黄芪中含量最高的活性成分，主要含有葡萄糖、半乳糖等单糖，而这些单糖往往具有促生长和抗氧化等多种功能；中草药复方制剂B以杜仲为主，而杜仲也含有多种生物活性、微量元素和氨基酸等营养物质，可有效改善动物肉质和促进动物生长[16]。3.2中草药复方制剂对团头鲂形体指标的影响鱼类的肥满度是判断鱼体形态的指标之一。肥满度高，鱼体型好。郑宗林等[17]发现，在罗非鱼基础饲料中添加菜蓟提取物能显著提高鱼体的肥满度。王煜恒等[18]研究发现，黄芪多糖能显著提高建鲤的肝脏和肠道重量以及肠道消化酶和长绒毛肠道；而杨志强等[19]认为，不同浓度的黄芪多糖对锦鲤的生长指标影响不同，只有2 g/kg饲料的黄芪多糖添加量能够显著提高锦鲤肥满度。方珍珍等[20]分别将金银花和黄芪两种中草药按0.4%~1.0%的添加量添加到锦鲤的日粮中，研究发现，金银花处理组的锦鲤肥满度等生长指标与对照组差异不显著，仅1%添加量的黄芪处理组的锦鲤肥满度显著升高。但是，张安青[21]在虹鳟日粮中加入杜仲提取物，发现4%的杜仲添加量对虹鳟的肝体比、脏体比和肥满度均无影响。韩兆红等[22]在团头鲂日粮中添加杜仲，连续投喂60 d后，团头鲂的肥满度增加而内脏指数和肝脏指数降低。本试验研究发现，以金盏花和杜仲为主料的复方制剂A和B分别以2%和4%的添加量加入饲料中时，不会显著提高团头鲂的肥满度；而以黄芪为主料的复方制剂C的两个试验组的团头鲂肥满度均显著高于对照组，推测可能是因为中草药配伍的比例及添加量的不同而呈现出的不同效果。3.3中草药复方制剂对团头鲂肝脏组织的影响肝脏是鱼体重要的消化器官，发挥着代谢、消化、解毒和免疫等多种功能[23]。肝脏的显微结构形态可以直接反映鱼类肝脏的健康状况。中草药因含丰富的皂苷、氨基酸等物质对水产动物的肝脏具有保护作用。李霞等[24]研究发现，当归、银杏和黄芩的提取物具有显著的抑制肝脏组织损伤、保护肝脏组织完整性的作用，能通过恢复肝脏中氧化酶活性及下调炎性因子的表达来减少肝损伤。张盈娇等[25]研究发现，党参等可保护史氏鲟的肝脏。本试验结果表明，对照组团头鲂在试验28 d时出现肝细胞肿大、肝血窦丰度降低的现象；中草药复方制剂A以2%、4%添加于饲料中，连续投喂28 d，团头鲂肝组织中肝血窦也出现萎缩等不健康状态。研究表明，中草药复方制剂A以2%、4%的添加量投喂对团头鲂肝组织无明显的保护作用，而中草药复方制剂B和中草药复方制剂C则对这种损伤有一定的修复作用。本研究与栾学斌等[26]在施氏鲟上的研究结果相似。4结论在团头鲂基础饲料中添加4%的中草药复方制剂B（以杜仲微粉为主，金盏花和黄芪微粉为辅）和2%、4%的中草药复方制剂C（以黄芪微粉为主，金盏花和杜仲微粉为辅）能有效提高鱼体的生长性能，有助于肝脏组织保持健康状态。