抗生素作为饲料添加剂对畜牧业的发展起到推动作用。但是，饲料中添加大量抗生素会导致细菌耐药性不断提高以及动物源产品和环境中的抗生素残留等问题[1]。2006年，欧盟全面禁止在畜禽饲料中添加抗生素生长促进剂。2020年7月1日，我国全面禁止生产和使用含有促生长类药物饲料添加剂。使用植物性来源的黄酮类化合物作为饲料添加剂能够改善畜禽的生产性能，在一定程度上解决抗生素滥用问题[2]。莓茶，学名显齿蛇葡萄，是葡萄科蛇葡萄属的一种落叶藤本植物[3]。莓茶素是莓茶中的活性成分，主要为黄酮类物质，总黄酮含量为43.3%~44.0%，是目前发现植物中黄酮含量最高的植物之一。二氢杨梅素是莓茶素中含量最高的一种黄酮类物质[4]。莓茶中二氢杨梅素具有多种药理活性，如消炎、降脂、降糖、增强免疫力、抗氧化和抑菌作用[5]。因此，本试验在文昌鸡基础日粮中添加不同比例的莓茶素，探究莓茶素对文昌鸡生长性能、屠宰性能、抗氧化性能、免疫性能的影响，为莓茶素在文昌鸡日粮中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料莓茶素由海南舜钦生物科技有限公司提供。其中，粗蛋白含量为13.82%，黄酮类化合物含量为41.5%，二氢杨梅素含量为36.8%，杨梅素含量为0.83%。1.2试验设计饲养试验于2020年12月~2021年1月在海南省琼海市大午农牧有限公司进行。试验采用单因素完全随机设计，选取240只70日龄健康、体重相近的文昌鸡母鸡，随机分成4组，每组5个重复，每个重复12只鸡。4组分别为对照组（饲喂基础日粮）和3个试验组（分别在基础日粮中添加0.2%、0.4%、0.6%的莓茶素）。试验期为54 d。1.3试验日粮和饲养管理参照《文昌鸡饲养管理技术规程》（DB 46/T44）配制玉米-豆粕型基础日粮，在此基础上添加不同比例的莓茶素组成试验日粮。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.18.011.T001表1基础日粮组成及营养水平（风干基础）原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米63.55代谢能/(MJ/kg)13.96发酵豆粕11.60粗蛋白质/%15.32次粉5.00可消耗赖氨酸/%0.58玉米蛋白粉5.00可消耗蛋氨酸/%0.27菜籽粕3.00可消耗半胱氨酸/%0.27米糠粕1.50钙/%0.38豆油7.00有效磷/%0.44石粉0.50磷酸氢钙0.40预混料2.45注：1.每千克预混料为日粮提供：VA 1 000 000 IU、VD3 416 667 IU、VE 6 667 mg、VK3 267 mg、VB1 267 mg、VB2 717 mg、VB6 450 mg、烟酰胺5 000 mg、泛酸钙1 417 mg、Fe 1 667 mg、Cu 1 333 mg、Mn 10 000 mg、Zn 9 167 mg、I 104 mg、Se 25 mg。2.营养水平为计算值。试验鸡采用3层叠式笼养，自由采食及饮水，定期清洁卫生及消毒，常规免疫。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能每周统计各组投料量和剩料量，在试验开始和结束时以重复为单位对每组鸡进行称重，计算平均日增重、平均日采食量和料重比，并详细观察和记录试验鸡发病、死亡和淘汰情况。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=(投料量-剩料量)/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2屠宰性能参照中国农业行业标准（NY/T 823—2004）中的方法对文昌鸡屠宰性能的相关指标进行度量和计算。试验第55 d，每重复选取1只接近平均体重的健康肉鸡，称重后颈动脉放血并收集血清，去毛后解剖，分离胸肌、腿肌和腹脂并称重记录，计算屠宰率、半净膛率、全净膛率、胸肌率、腿肌率和腹脂率。屠宰率=屠体重/宰前体重×100%(4)半净膛率=半净膛重/宰前体重×100%(5)全净膛率=全净膛重/宰前体重×100%(6)腿肌率=两侧腿重/全净膛重×100%(7)胸肌率=两侧胸肌重/全净膛重×100%(8)腹脂率=腹脂重/(全净膛重+腹脂重)×100%(9)1.4.3血清指标血清总抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MAD）含量和总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性均采用比色法进行测定。试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。血清免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）和免疫球蛋白M（IgM）均采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法进行测定。试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。1.5数据统计与分析试验数据采用SPSS 25.0软件进行单因素方差分析（One-way ANOVA），采用Tukey's法对各组平均值进行多重比较，结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1莓茶素对文昌鸡生长性能的影响（见表2）由表2可知，添加0.40%莓茶素组文昌鸡的末重和平均日增重显著高于对照组（P0.05）；添加0.40%莓茶素组文昌鸡的料重比显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.18.011.T002表2莓茶素对文昌鸡生长性能的影响组别初重/g末重/g平均日采食量/(g/d)平均日增重/(g/d)料重比对照组1 115.12±10.892 157.50±36.30b108.54±0.9819.30±0.72b5.63±0.19a0.20%组1 104.38±20.402 206.50±32.52ab109.15±0.5420.41±0.50ab5.35±0.15ab0.40%组1 105.19±19.272 244.83±28.14a108.28±0.4121.10±0.61a5.14±0.14b0.60%组1 097.59±15.222 198.54±45.38ab108.86±0.0620.39±1.12ab5.35±0.30ab注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），字母相同或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2莓茶素对文昌鸡屠宰性能的影响（见表3）由表3可知，0.6%莓茶素组肉鸡的屠宰率显著高于对照组（P0.05）；0.4%莓茶素组的腹脂率显著低于添加0.6%的莓茶素组（P0.05）；日粮中添加0.6%的莓茶素组和0.4%莓茶素组的胸肌率显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.18.011.T003表3莓茶素对肉鸡屠宰性能的影响组别屠宰率半净膛率全净膛率腹脂率胸肌率腿肌率对照组93.01±0.61b84.16±2.5167.96±2.389.87±0.78ab13.05±2.10b14.67±1.270.20%组92.82±0.32b85.11±1.9368.30±1.899.74±1.08ab14.89±1.31ab15.80±1.100.40%组93.58±0.42ab85.46±3.4670.26±2.827.96±1.50b15.71±1.26a16.88±1.940.60%组94.00±0.63a85.60±4.4067.94±4.5610.51±1.96a15.90±0.86a16.73±1.51%2.3莓茶素对文昌鸡血清抗氧化指标的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，在日粮中添加0.40%莓茶素组肉鸡血清中的T-AOC、T-SOD、GSH-Px活性显著升高（P0.05）。添加0.40%莓茶素组肉鸡血清中的MDA含量显著低于0.20%组，且0.40%组的MDA含量最低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.18.011.T004表4莓茶素对文昌鸡血清抗氧化指标的影响组别T-AOC/(U/mL)T-SOD/(U/mL)MDA/(μmol/L)GSH-Px/(U/mL)对照组6.93±1.37b220.54±6.52b5.55±1.10ab1 377.79±21.74c0.20%组7.68±1.11ab241.90±8.12ab6.41±1.04a1 449.09±28.14b0.40%组9.21±1.20a255.79±10.88a4.11±0.96b1 512.00±42.20a0.60%组8.07±0.85ab254.32±25.07a5.86±1.08ab1 386.17±20.17c2.4莓茶素对文昌鸡血清免疫指标的影响由表5可知，与对照组相比，日粮中添加0.20%、0.40%、0.60%莓茶素均能够显著提高肉鸡血清中IgA的含量（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.18.011.T005表5莓茶素对文昌鸡血清免疫指标的影响组别IgAIgGIgM对照组280.74±18.97c2 716.42±59.511 002.66±29.710.20%组343.77±18.14b2 794.84±52.131 032.00±40.240.40%组414.43±22.16a3 037.30±47.081 073.76±60.400.60%组368.14±19.47b3 077.44±35.921 009.53±19.48mg/L3讨论3.1莓茶素对文昌鸡生长性能的影响黄酮类化合物可以提高动物体内消化酶的活性，促进肠道物质消化吸收，从而促进饲料消化，同时黄酮类化合物可以通过作用于动物的下丘脑-垂体-靶器官生长轴调节，增强动物的生长性能[6]。戴青等[7]研究表明，添加0.05%的二氢杨梅素可提高肉鸡的日增重，促进肉鸡体重的增加并且降低料重比。谢鹏[8]研究发现，添加0.025%的二氢杨梅素可以极显著增加肉鸡的日采食量，显著增加肉鸡的日增重。韩爱云等[9]研究发现，饲料中添加0.05%二氢杨梅素能够提高肉仔鸡日粮的转化率。本研究发现，添加0.4%莓茶素，即二氢杨梅素含量为0.1%时可以显著提高文昌鸡的末重和日增重，显著降低料重比，与上述研究结果一致。研究表明，莓茶素对文昌鸡的生长性能具有积极作用。3.2莓茶素对文昌鸡屠宰性能的影响屠宰性能可以判断畜禽品种的优劣和饲养水平的高低，并能够反映畜禽机体构成与畜禽可食用部分之比。本试验发现，莓茶素可以提高文昌鸡的屠宰率、胸肌率，添加0.2%和0.4%莓茶素，即二氢杨梅素含量分别为0.07%和0.10%时可以降低文昌鸡的腹脂率。郭航等[10]研究表明，添加0.025%二氢杨梅素能够提高肉鸡的屠宰率和胸肌率。郑伟等[11]研究表明，在肉鸡日粮中添加0.05%沙棘黄酮，可降低肉鸡的腹脂率。姜义宝等[12]在肉鸡日粮中添加0.002%红车轴草异黄酮，发现红车轴草异黄酮可降低肉鸡的腹脂率，与本研究结果一致。戴青等[7]研究发现，添加0.05%二氢杨梅素可以提高瑶山鸡的胸肌率，但对瑶山鸡的屠宰率和全净膛率影响不显著。与本试验结果不一致的原因可能是所用的试验用鸡品种不同造成的。3.3莓茶素对文昌鸡抗氧化性能的影响莓茶素中主要成分二氢杨梅素A环的5、7位，B环的3'、4'、5'位，C环的3位共有6个羟基取代基团，从结构上分析具有较强的抗氧化活性[13]。徐静娟等[14]通过抗坏血酸-Cu2+-H2O2体系法、氮蓝四唑光化还原法和亚油酸体系法证明二氢杨梅素具有抗氧化能力。张友胜等[15]研究表明，在浓度相同的条件下，二氢杨梅素的抗氧化活性与常用的天然植物抗氧化剂和常用的化学合成抗氧化剂作用相当或超过其作用。Hou等[16]通过在仔猪日粮中添加不同水平的二氢杨梅素，发现二氢杨梅素能够提高仔猪血清中T-AOC，并提高肝脏和肺中SOD和GSH-Px的活性。徐大节等[17]研究表明，添加0.02%和0.04%二氢杨梅素可以降低肉鸡血清和肝脏中的MDA含量。本研究表明，莓茶素可显著提高文昌鸡血清的T-AOC、T-SOD及GSH-Px活性，并降低MDA的含量，与上述研究结果一致。3.4莓茶素对文昌鸡免疫性能的影响血清抗体能够在一定水平上反映机体对疾病的抵抗能力，免疫球蛋白IgG、IgM和IgA是介导体液免疫的主要抗体[18]。IgM主要由B细胞合成，是机体在初次免疫应答时产生具有与抗原结合能力的免疫球蛋白[19]。IgG主要是在中枢免疫器官的浆细胞内合成的，能够抵抗病菌和病毒对机体的侵袭，对疾病有预防作用[20]。IgA是在胃肠淋巴组织中合成的，分为血清型和分泌型两种，是防止病原体入侵机体的第一道防线[21]。赵萌等[22]研究发现，日粮中添加0.5%和1.0%的藤茶黄酮能够极显著的提高仔猪血清中IgM和IgG的含量。Yang等[23]研究发现，在肉鸡日粮中添加0.003%竹叶黄酮可以显著提高血清中IgM的含量。郑艳[24]在日粮中添加青刺果总黄酮，发现青刺果总黄酮可显著提高雏鸡血清IgM和IgG的含量。王志龙等[25]研究发现，在哺乳母猪日粮中添加0.02%和0.03%大豆异黄酮可以显著提高血清中IgA和IgG的含量，从而提高机体免疫力。本研究中，在日粮中添加0.4%莓茶素，即黄酮含量为0.1%时可以显著提高IgA的含量；而IgG和IgM的含量虽有升高的趋势但影响不显著，其原因可能是添加莓茶素比例导致的。4结论日粮中添加莓茶素可以提高文昌鸡的生长性能、屠宰性能、机体抗氧化能力及免疫功能，且莓茶素的添加量为0.4%时效果最好。