氧化锌是防治断奶仔猪腹泻的有效方法之一[1]。但是,高锌可能引起污染和抗性作用[2]。我国农业农村部在2018年7月开始执行限锌的新规,未来研究氧化锌替代物在仔猪生产中的应用成为一种趋势[3]。庞培等[4]探索了植物精油、腐殖酸钠等在仔猪前期日粮中替代添加氧化锌的思路[4]。李升生[5]研究发现,腐殖酸钠可以替代氧化锌在仔猪日粮中使用。腐殖酸是一种暗色有机物,是地球运动留下的动植物遗骸[6],腐殖酸钠是腐殖酸与片碱反应后的产物[7]。刘欣伟[8]研究发现,腐殖酸钠可作为饲料添加剂,促进饲料成分的活化吸收。但是,由于腐殖酸钠对饲料具有染色性。因此,试验旨在探讨一种包膜腐殖酸钠[9]替代氧化锌对断奶仔猪生长性能、血清生化指标、抗氧化性能、肠道绒毛形态的影响,为研究猪养殖业中的氧化锌替代物提供参考。1材料与方法1.1试验材料包膜腐殖酸钠由长沙正利生物科技有限公司提供。1.2试验设计选取144头28日龄,体重(7.12±0.1)kg的“杜×长×大”三元杂交早期断奶仔猪,公、母各半,经过编号、防疫、驱虫和观察均健康,按照体重一致的原则随机分为4组。试验A组添加1.5 g/kg包膜腐殖酸钠;试验B组添加3.5 g/kg包膜腐殖酸钠;试验C组添加2 g/kg氧化锌(饲料级氧化锌购自市场,锌含量76.5%),D组为对照组。1.3试验时间与地点试验时间:2020年7月24日~2020年8月22日。预试期3 d,正式试验期28 d。试验地点:中国科学院亚热带农业生态研究所动物实验楼。1.4试验日粮试验采用玉米-豆粕型日粮,参考NRC(1998和2012)、猪理想氨基酸模型、应用标准回肠可消化氨基酸体系设计基础日粮。试验全程采用粉料饲喂,自由采食和饮水。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.18.008.T001表1基础日粮组成及营养水平(风干基础)原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米63.50消化能/(MJ/kg)14.20豆粕19.80粗蛋白/%18.27乳清粉4.50钙/%0.60鱼粉9.00总磷/%0.51大豆油0.80有效磷/%0.23赖氨酸0.38蛋氨酸0.10苏氨酸0.09色氨酸0.01石粉0.52食盐0.30预混料(含磷酸氢钙)1.00注:1.预混料为每千克日粮提供:VA 10 800 IU、VD3 400 IU、VE 40 IU、VK3 4 mg、VB2 12 mg、VB6 6 mg、VB12 0.05 mg、生物素0.2mg、叶酸2 mg、烟酸50 mg、D-泛酸钙25 mg、铜150 mg、铁100 mg、锰40 mg、锌100 mg、碘0.5 mg、硒0.3 mg。2.营养水平均为实测值。1.5饲养管理试验采用漏缝塑料地板,不锈钢可调式料槽,鸭嘴式饮水器。每天清洗猪舍地面,猪舍每周喷雾消毒1次。每天观察并记录猪的健康与采食状况。1.6指标测定及方法1.6.1临床观察试验期内每天观察试验动物临床表现、采食和饮水情况,观察和记录不良反应。1.6.2生长性能正式试验开始前、试验第14 d和28 d对试验猪进行活体称重,每天记录腹泻次数和耗料量。平均日采食量=耗料量/(试验天数×头数) (1)平均日增重=(末重-初重)/试验天数 (2)料重比=总耗料量/总增重 (3)1.6.3血清指标在试验结束当天,每组抽取2只仔猪,早上空腹前腔静脉采血10 mL,静置3 h,3 000 r/min离心10 min,吸取上清液,用于检测血清生化指标。血清指标包括:总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)、血糖(GLU)、总胆红素(TBILI)、球蛋白(GLO)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)。试剂盒购自河南省唯洋医疗器械有限公司。1.6.4脏器指数试验结束,每组抽取2只仔猪屠宰,取完整的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏,称重,计算脏器指数[10]。脏器指数=器官重量/体重 (4)1.6.5肠绒毛形态试验结束,从每个处理组中选取2头试验猪屠宰。分别采取空肠中段,用生理盐水冲洗干净,采取肠黏膜,装入无菌EP管中,液氮速冻,-80 ℃保存。从屠宰猪的十二指肠、空肠和回肠取约2~3 cm的组织样,置于含甲醛为3.8%的福尔马林液中固定。各肠段经脱水、浸蜡、包埋、切片等处理步骤,经苏木精-伊红染色,在光学显微镜下进行观察、取图和拍照,测量小肠绒毛高度、隐窝深度和绒毛高度隐窝深度比值(V/C)。1.7数据统计与分析数据采用Excel 2020软件进行初步统计,采用SAS 8.0软件进行单因素方差分析,采用Duncan's法多重比较,P0.05表示差异显著,P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1不同浓度包膜腐殖酸钠替代氧化锌对断奶仔猪生长性能的影响(见表2)由表2可知,试验过程中仔猪腹泻无明显差异,全程无死淘猪。B组断奶仔猪的料重比低于其他各组,但差异不显著(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.18.008.T002表2不同浓度包膜腐殖酸钠替代氧化锌对断奶仔猪生长性能的影响项目试验时间/d初重/kg末重/kg平均日采食量/g平均日增重/g料重比腹泻次数死淘数A组0~1415~280~287.1311.307.1311.3018.9418.94536.23975.24785.70297.86545.71421.791.801.791.86978000B组0~1415~280~287.1111.297.1111.2918.9618.96531.34961.58761.82298.57547.86423.211.781.761.80756000C组0~1415~280~287.1411.317.1411.3119.0819.08551.131 046.97816.76297.86555.00426.431.851.891.92978000D组0~1415~280~287.1211.287.1211.2818.9018.90554.511 054.32834.38297.14544.29420.711.871.941.9811910000SEM0~1415~280~280.190.350.190.350.580.5830.9237.1029.9617.8623.4117.220.050.070.04P值0~1415~280~280.990.860.990.860.290.296.690.270.190.250.720.100.060.370.18注:同列数据肩标不同小写字母表示差异显著(P0.05),不同大写字母表示差异极显著(P0.01)字母相同或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。2.2不同浓度包膜腐殖酸钠替代氧化锌对断奶仔猪血清生化指标影响(见表3)由表3可知,B组仔猪的血清GLU浓度显著高于其他3组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.18.008.T003表3不同浓度包膜腐殖酸钠替代氧化锌对断奶仔猪血清生化指标影响项目BUN/(mol/L)CRE/(μmol/L)GLU/(mmol/L)TBILI/(μmol/L)TP/(g/L)ALB/(g/L)GLO/(g/L)白球比A组3.2574.504.05b0.5347.1928.1819.581.43B组3.7372.134.77a0.5246.5327.5519.471.40C组3.4573.573.83b0.6049.5026.7319.631.39D组3.4372.923.94b0.5448.1227.4819.651.44SEM0.121.370.170.050.760.700.300.04P值0.300.790.040.770.270.580.980.912.3不同浓度包膜腐殖酸钠替代氧化锌对断奶仔猪脏器指数的影响(见表4)由表4可知,各组断奶仔猪脏器指数无显著差异(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.18.008.T004表4不同浓度包膜腐殖酸钠替代氧化锌对断奶仔猪脏器指数的影响项目心脏肝脏脾脏肺脏肾脏A组0.462.840.171.071.08B组0.492.810.161.101.08C组0.452.890.171.081.09D组0.482.680.171.131.09SEM0.010.050.0040.030.02P值0.060.170.650.780.97g/kg2.4不同浓度包膜腐殖酸钠替代氧化锌对断奶仔猪血清抗氧化指标的影响(见表5)由表5可知,试验B组的T-AOC显著高于其他3组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.18.008.T005表5不同浓度包膜腐殖酸钠替代氧化锌对断奶仔猪血清抗氧化指标的影响项目MDA/(μmol/L)SOD/(U/mL)T-AOC/(mmol/L)A组7.2832.010.38bB组7.1932.110.42aC组7.3331.820.35bD组7.5531.660.37bSEM0.090.420.03P值0.120.140.032.5不同浓度包膜腐殖酸钠替代氧化锌对断奶仔猪肠绒毛形态的影响(见表6)由表6可知,B组仔猪的绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度均极显著高于其他各组(P0.01),隐窝深度极显著低于其他各组(P0.01)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.18.008.T006表6不同浓度包膜腐殖酸钠替代氧化锌对断奶仔猪肠道绒毛形态的影响项目绒毛高度/μm隐窝深度/μm绒毛高度/隐窝深度A组370.23B250.67A1.63BB组401.81A223.67B1.89AC组367.73B258.90A1.56BD组360.89B261.24A1.52BSEM21.6021.310.14P值0.0010.0010.0013讨论3.1不同浓度包膜腐殖酸钠替代氧化锌对断奶仔猪生长性能的影响本试验中,试验前期(0~14 d)在全价日粮中添加3.5 g/kg的包膜腐殖酸钠有降低仔猪料重比的趋势(P=0.06),包膜腐殖酸钠替代氧化锌未降低断奶仔猪的生产性能,仔猪腹泻次数也相对较少。徐鹏飞等[11]研究发现,仔猪日粮中添加3 g/kg的改性腐殖酸钠可以显著降低仔猪腹泻,降低料重比。孙召君等[12]研究发现,复合益生菌制剂和腐殖酸钠能够显著促进猪的生长和降低猪的腹泻率。上述研究结果均与本试验结果相似。但是,欧阳富龙等[13]研究发现,在饲料中添加0.4%的腐殖酸钠对保育猪的腹泻方面不能替代3 000 mg/kg的氧化锌组,造成试验结果有差异的原因可能是试验猪的阶段和饲养管理环境不同导致的。3.2不同浓度包膜腐殖酸钠替代氧化锌对断奶仔猪血清生化指标及抗氧化指标的影响本试验结果表明,包膜腐殖酸钠替代氧化锌未对血清生化指标造成明显影响,在日粮中添加3.5 g/kg的包膜腐殖酸钠能够提高断奶仔猪的血糖水平,原因可能是包膜腐殖酸钠促进细胞中酶的活性,增强机体新陈代谢。本试验结果与李丽[14]的研究结果相似。本试验中,在日粮中添加3.5 g/kg的包膜腐殖酸钠显著提高仔猪的血清总抗氧化能力,原因可能是腐殖酸钠具有多个官能团,既有氧化性又具有还原性。左玉等[15]研究发现,腐殖酸钠具有较强的自由基清除能力和一定的抗氧化能力,且随着腐殖酸钠浓度的增加,抗氧化能力逐渐增强高度一致,与本试验研究结果一致。3.3不同浓度包膜腐殖酸钠替代氧化锌对断奶仔猪肠道形态的影响本试验中,在日粮中添加3.5 g/kg的包膜腐殖酸钠极显著提高仔猪肠道的绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度。结果表明,饲料中添加3.5 g/kg的包膜腐殖酸钠可改善断奶仔猪肠道形态,促进肠道的生长发育,提高饲粮中营养物质的利用率,进而改善仔猪的生长性能。原因可能是包膜腐殖酸钠的pH值比普通腐殖酸钠更低,能更好地调节肠道健康,提高饲料中各种有效成分的吸收,从而达到改善肠道形态、促进肠道生长发育的作用[16]。朱荣生等[17]研究发现,饲粮中添加3.0 kg/t腐殖酸钠和1.5 kg/t的核苷酸能够提高断奶仔猪十二指肠、空肠和回肠的绒毛高度。赵必迁等[18]研究发现,在断奶仔猪日粮中添加4 kg/t的覆膜腐殖酸钠颗粒能显著提高断奶仔猪的生产性能,极显著降低仔猪腹泻。上述试验结果均与本试验结果相似。4结论在断奶仔猪日粮中添加3.5 g/kg的包膜腐殖酸钠可有效替代氧化锌。

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