“早期断奶综合征”是当今养猪行业比较普遍且亟待解决的问题[1],其主要原因为断奶时仔猪自身消化系统和免疫系统发育不完善,易受外界因素影响,导致仔猪食欲不振、消化不良、腹泻、生长迟滞、免疫力下降和饲料利用率降低等问题。中草药中含有生物碱、维生素、多糖类等生物活性成分,且无耐药性、低残留、无污染及低毒副作用[2]。将不同的中草药严格按照配伍禁忌使用,可以起到补充营养、促进采食、提高抗应激能力和提高免疫等作用[3]。因此,复方中草药添加剂具有广阔的开发与应用前景。本试验针对仔猪断奶前后的生理特点,结合不同中草药特性,考察以杜仲、黄芪、山楂、甘草4种中药材按一定比例混合的复方中草药添加剂对仔猪生长性能、血清生化指标及免疫指标的影响,为后续中草药添加剂的研发提供参考。1材料与方法1.1试验材料复方中草药添加剂由杜仲、黄芪、山楂、甘草等配伍而成,各单味中药均购自亳州市邓大伟药业有限责任公司,符合2015版药典标准。粉碎过筛后按6∶5∶2∶2比例混匀,制成粉剂,按不同添加量添加到基础日粮中。总蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)、血尿素氮(BUN)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和总抗氧化能力(T-AOC)等试剂盒均购自武汉华美生物工程有限公司。免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)试剂盒均购自上海允麦生物科技有限公司。1.2试验设计试验选取72头28日龄体重相近的“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪,随机分为4组,每组3个重复,每个重复6头猪。试验1组仔猪饲喂基础日粮,试验2、3、4组分别在基础日粮中添加1.0、2.0、3.0 g/kg的复方中草药添加剂。基础日粮组成及营养水平见表1。试验期28 d。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.18.010.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.0玉米53.1消化能/(MJ/kg)15.46膨化大豆10.0粗蛋白/%18.86发酵豆粕12.0粗脂肪/%6.12高蛋白豆粕9.0钙/%1.05进口鱼粉3.0有效磷/%0.52乳清粉6.2赖氨酸/%1.28血浆蛋白粉1.6苏氨酸/%0.85磷酸二氢钠0.9胱氨酸+蛋氨酸/%0.61石粉0.7色氨酸/%0.23豆油2.5预混料1.0注:1.预混料为每千克日粮提供:VA 8 000 IU、VD3 1 500 IU、VE 42 IU、VK3 1.5 mg、VC 20 mg、VB2 5 mg、VB12 0.02 mg、Fe 130 mg、Mn 20 mg、Zn 85 mg、Cu 120 mg、I 0.3 mg、生物素0.1 mg、叶酸0.4 mg、烟酸27 mg、泛酸21 mg。2.营养水平中消化能为计算值,其余均为实测值。试验断奶仔猪每组单独饲喂,自由采食、饮水,常规消毒与免疫。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能试验期间,仔猪空腹称重,记录初重、末重、每个重复组的耗料量及腹泻情况,并测定平均日增重、平均日采食量、腹泻率及料重比等指标。平均日增重=增重/试验天数(1)平均日采食量=耗料量/(试验天数×试验头数)(2)腹泻率=腹泻头数/仔猪总头数×100%(3)料重比=平均日采食量/平均日增重(4)1.3.2血清生化和免疫指标试验第28 d,空腹称重,各试验组随机选取5头试验仔猪,前腔静脉采血10 mL,分离血清待测。采用专用试剂盒测定血清各项指标及免疫指标含量。1.4数据统计与分析采用SPSS 21.0软件进行统计分析。数据以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1复方中草药添加剂对断奶仔猪生长性能的影响(见表2)由表2可知,试验2、3、4组仔猪的末重均显著高于试验1组(P0.05),试验3、4组的末重均显著高于试验2组(P0.05)。试验2、3、4组仔猪的平均日增重与平均日采食量均显著高于试验1组(P0.05),且试验4组的平均日增重和平均日采食量最高。试验2、3、4组仔猪的料重比均显著低于试验1组(P0.05)。试验2、3、4组仔猪的腹泻率显著低于试验1组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.18.010.T002表2复合中草药添加剂对断奶仔猪生长性能的影响组别初重/kg末重/kg平均日增重/(g/d)平均日采食量/(g/d)料重比腹泻率/%试验1组8.23±1.4719.44±2.43c400.35±10.15c607.89±22.18c1.52±0.25a8.33±0.17a试验2组8.27±1.0720.04±1.36b420.35±15.71b626.47±17.61b1.49±1.22b6.94±0.37b试验3组8.28±1.6821.77±1.29a481.79±14.28ab675.74±23.51ab1.40±0.77b2.78±0.18c试验4组8.25±1.5122.08±1.95a490.93±19.78a685.47±28.72a1.40±1.19b2.78±0.21c注:同列数据肩标字母相同或无字母表示差异不显著(P0.05);字母不同表示差异显著(P0.05);下表同。2.2复方中草药添加剂对断奶仔猪血清生化指标及抗氧化指标的影响(见表3、表4)由表3可知,试验2、3、4组仔猪的血清TP、ALB含量均显著高于试验1组(P0.05);试验2、3、4组仔猪的BUN含量、ALT活性、AST活性均显著低于试验1组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.18.010.T003表3复合中草药添加剂对断奶仔猪血清生化指标的影响组别TP/(g/L)ALB/(g/L)BUN/(mmol/L)ALT/(mmol/L)AST/(mmol/L)试验1组45.35±4.72c29.84±1.74c4.55±0.17a67.75±10.22a60.32±12.87a试验2组47.85±3.78b33.17±1.53b3.89±0.27b65.34±8.45b56.57±10.78b试验3组50.98±4.27a35.11±3.79a3.88±0.33b64.82±10.34b55.58±8.67b试验4组51.56±3.35a35.68±4.12a3.76±0.12b63.67±9.32b56.21±9.11b由表4可知,试验2、3、4组仔猪的血清MDA含量均显著低于试验1组(P0.05),试验4组的血清MDA含量显著低于试验2、3组(P0.05)。试验2、3、4组仔猪的血清GSH-Px活性和T-AOC显著均高于试验1组(P0.05),且试验4组仔猪的血清GSH-Px活性和T-AOC最高。与试验1组相比,试验2、3、4组仔猪的血清SOD活性升高,但差异不显著(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.18.010.T004表4复合中草药添加剂对断奶仔猪血清抗氧化指标的影响组别MDA/(μmol/L)GSH-Px/(U/mL)SOD/(U/mL)T-AOC/(U/mL)试验1组3.78±0.18a266.87±21.24b42.57±5.770.67±0.02c试验2组2.85±0.08b289.76±22.73a43.82±7.872.21±0.15b试验3组2.81±0.21b293.24±23.38a43.88±6.532.51±0.17ab试验4组2.67±0.35c296.63±14.62a44.76±4.722.77±0.24a2.3复方中草药添加剂对断奶仔猪免疫指标的影响(见表5)由表5可知,与试验1组相比,试验2、3、4组仔猪的IgM、IgA含量均显著升高(P0.05),且IgM含量试验4组最高;试验4组仔猪的IgG含量显著高于试验1组(P0.05)。试验4组仔猪的IL-6含量最高,显著高于试验1、2组(P0.05)。试验3、4组仔猪的TNF-α含量均显著低于试验1、2组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.18.010.T005表5复合中草药添加剂对断奶仔猪免疫指标的影响组别IgG/(g/L)IgM/(g/L)IgA/(g/L)IL-6/(mg/L)TNF-α/(mg/L)试验1组1.88±0.11b0.77±0.01b0.07±0.01c1 003.5±120.1b701.2±181.5a试验2组1.96±0.25ab1.04±0.02a0.08±0.03b1 014.9±170.2b712.2±123.7a试验3组2.01±0.12ab1.03±0.01a0.11±0.05ab1 061.4±127.5ab681.5±161.0b试验4组2.11±0.27a1.06±0.03a0.13±0.02a1 103.4±113.3a678.4±173.8b3讨论3.1复方中草药添加剂对断奶仔猪生长性能的影响本试验结果表明,与试验1组相比,试验2、3、4组仔猪的平均日增重显著提高4.25%、14.61%、16.79%;料重比分别显著降低1.38%、3.45%、3.45%;腹泻率显著降低16.69%、66.63%、66.63%。研究表明,由杜仲、黄芪、山楂、甘草配伍而成的复方中草药添加剂对断奶仔猪的生长发育具有促进作用。黄芪中富含多种活性物质及营养成分,具有促进生长作用[4];山楂中含有多种有机酸如延胡索酸、柠檬酸等,可以显著提升动物采食量及消化液分泌量,降低因消化不良引起的腹泻发病率[5]。邓玉英等[6]在三元杂交断奶仔猪日粮中添加不同剂量的黄芪多糖,研究表明,与对照组相比,饲喂500 mg/kg黄芪多糖组仔猪的平均日增重显著提高41.75%,料重比显著降低28.57%,腹泻率显著降低75%。朱晓萍等[7]研究山楂对断奶仔猪生长性能及消化率的影响,发现与对照组相比,在基础日粮中添加一定剂量的山楂粉可以显著提高断奶仔猪的平均日增重、平均日采食量及饲料报酬,且仔猪腹泻率显著降低76.1%,粗蛋白、粗脂肪的表观消化率极显著提高。郭丹丹等[8]以三元杂交断奶仔猪为研究对象,考察黄芪、金银花等多种提取物的不同配伍方案的促生长效果,结果表明,与对照组相比,黄芪、黄芩和金银花复配组的断奶仔猪平均日增重提高19.3%,料重比降低14.5%,配伍方案具有明显促进采食量的功效。本试验结果与前人研究结果一致,且随着中草药添加量的提高至2.0 g/kg,仔猪的平均日增重的增幅并不明显,可能与中草药纤维素含量高有关,饲喂过多纤维素可能降低仔猪的平均日增重和生长性能[9]。因此,中草药的添加量应当适量,并非越多越好。3.2复方中草药添加剂对断奶仔猪血清生化指标及抗氧化指标的影响血清生化指标可以有效反映机体内物质代谢情况及动物健康状况,血清BUN含量可以直接体现氨基酸平衡状况[10];TP、ALB含量则反映蛋白质状况。本试验结果表明,3个不同添加量组仔猪的TP、ALB含量均显著高于试验1组,但试验3、4组间差异不显著;3个试验组仔猪的BUN含量显著高于试验1组,3组间差异不显著;试验2、3、4组仔猪的ALT、AST活性显著高于试验1组,但组间差异不显著。研究表明,本试验复方中草药添加剂可以有效提高断奶仔猪肝肾代谢水平及饲粮蛋白质与氨基酸利用率,但饲料的蛋白质和氨基酸利用率并不随添加量的增加而明显升高。杜海江[11]以三元杂交断奶仔猪为研究对象,考察由黄芪、山楂、甘草、白头翁等10味中药材配伍成的复方中草药超微粉,与抗生素(林可霉素+喹乙醇)对照组作对比试验,结果表明,与对照组相比,不同添加量的复方中草药各组均能显著提高TP、ALB含量,且极显著降低BUN含量,但各复方中草药组间BUN含量差异不显著。王鑫等[12]在三元杂交断奶仔猪日粮中添加250 mg/kg的杜仲叶提取物,发现杜仲叶提取物可以显著降低断奶仔猪血清中BUN含量,显著提高TP含量。活性氧自由基(ROS)过多或清除缓慢会对机体造成损伤并诱发各种疾病,而GSH-Px、T-AOC和SOD等是机体防御及清除这些自由基或脂质过氧化物的主要物质。本试验研究结果表明,该复方中草药添加剂能够显著降低血清MDA含量,显著提高T-AOC和GSH-Px活性,与彭密军等[13]研究结果一致,杜仲叶干粉组血液中MDA含量极显著降低,并T-AOC极显著升高,GSH-Px活性升高,但对血液中SOD活性无显著影响。Wang等[14]研究表明,杜仲中杜仲黄酮具有显著降低MDA含量的作用。也有研究表明,黄芪中的黄芪多糖与黄芪甲苷均有一定的抗氧化作用[15-16]。本试验结果与上述众多研究结果一致,表明本复方中的黄芪、杜仲、山楂均能对断奶仔猪体内蛋白质的合成起促进作用,可以在有效改善断奶仔猪对饲粮中蛋白质消化与吸收能力的同时,提高机体的抗氧化能力,减少因断奶应激引起的氧化损伤,从而促进生长。3.3复方中草药添加剂对断奶仔猪免疫指标的影响血清中免疫球蛋白含量是直接影响机体免疫功能水平的重要因素。本试验结果表明,与试验1组相比,试验2、3、4组仔猪的IgG、IgM、IgA含量均显著提高,试验4组最高。试验4组仔猪的血清IL-6含量显著高于试验1、2组。试验3、4组仔猪的血清TNF-α含量显著低于试验1组,且试验3、4组间差异不显著。申学林等[17]考察以黄芪为主的复方中草药添加剂对断奶仔猪保育效果的影响,发现在三元杂交断奶仔猪基础日粮中添加黄芪等复方中草药添加剂后,仔猪的IgA含量极显著提高173.91%,IgM含量极显著提高37.50%,IgG含量极显著提高63.36%,表明以黄芪等中草药配伍的添加剂可以显著增强自主免疫能力。杨昆忠等[18]研究发现,添加黄芪组的断奶仔猪血清中的IgG、IgM、TNF-α含量较对照组均显著提高。本试验结果与隋明静[19]研究结果一致,在断奶仔猪中添加黄芪、杜仲、金银花等植物提取复方制剂,可以极显著提高IgG、IgM、IgA、IL-2和IL-4含量。研究表明,本试验复方中草药添加剂能够有效增强断奶仔猪免疫能力、抗病力,提高生产性能。4结论杜仲、黄芪、山楂、甘草配伍的中草药添加剂对断奶仔猪具有明显的促生长、降低腹泻率的作用,并显著增强机体免疫力及抗氧化能力,提高养殖者经济效益。复方中草药均为“117中可饲用天然植物”,安全高效,具有广阔的应用前景。
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