核苷酸是构成RNA和DNA的基本单位,是合成蛋白质的中间体,在动物机体的细胞结构、能量、代谢、调节等方面起着举足轻重的作用。动物自身组织可以合成一定含量的核苷酸。但是,机体发生氧化等各种应激、快速生长时,自身合成的核苷酸不能够满足自身的需要[1]。仔猪断奶时,自身免疫方式、饲养环境、饲料等因素的转变会导致仔猪产生断奶应激,胃肠道紊乱,发生腹泻,进而导致生长严重受阻,自身合成的核苷酸不足满足自身生长所需。外源核苷酸可以促进幼龄动物生长,调节机体免疫力[2-4]。孔庆娟等[5]研究发现,在断奶仔猪饲料中添加1、2 g/kg的酵母核苷酸能够提高断奶仔猪的平均日增重,并有效抑制因大肠杆菌引起的腹泻。尹敬博[6]研究发现,在妊娠后期母猪饲料中添加3 g/kg的酵母核苷酸能够降低母猪死胎率和仔猪弱仔率,促进新生仔猪的肠道发育,减少仔猪发生腹泻的数量,提高仔猪生长性能。在异育银鲫幼鱼、凡纳滨对虾、锦鲤幼鱼等水产动物的饵料中添加适量的酵母核苷酸可以改善水产动物的机体的免疫力,促进生长[7-9]。但是,酵母核苷酸对断奶仔猪的影响研究较少。因此,试验在断奶仔猪日粮中添加一定水平的酵母核苷酸,探究酵母核苷酸对断奶仔猪生长、免疫力及血清生化指标的影响,确定酵母核苷酸在断奶仔猪饲料中的添加量,为酵母核苷酸应用在畜牧养殖生产中提供参考。1材料与方法1.1试验材料酵母核苷酸购自安琪酵母,核苷酸含量大于10%,粗蛋白含量大于60%。血清生化指标试剂盒和免疫指标试剂盒购自上海名典生物工程公司。1.2试验设计选取160只21日龄、体重相近(约7.15 kg)、健康、三元杂交(杜×长×大)的断奶仔猪,随机分为4组,每组4个重复,每个重复10头断奶仔猪。试验1组为对照组,饲喂基础日粮;试验2组、试验3组、试验4组分别在基础日粮中添加0.05%、0.10%、0.20%的酵母核苷酸。试验期35 d,其中7 d预试期。1.3试验日粮试验断奶仔猪日粮根据NRC(2012)及《猪饲养标准》(NY/T 65—2004)的仔猪营养标准配制。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.18.009.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米62.99消化能/(MJ/kg)13.82豆粕(46%)22.50粗蛋白/%18.07乳清粉6.00钙/%0.64鱼粉3.50有效磷/%0.35豆油1.50食盐0.32DL-蛋氨酸0.30L-赖氨酸(98%)0.17磷酸氢钙0.84石粉0.88预混料1.00注:1.预混料购自枣庄六和饲料股份有限公司。2.营养水平均为计算值。1.4饲养管理试验开始前,试验猪舍清洗、消毒,1 w后进入预试期。预试期间所有断奶仔猪提供基础日粮。试验期间,断奶仔猪自由采食、饮水,猪舍环境保持卫生,温度、湿度、通风适宜,免疫程序按照猪场日常管理进行。1.5样品采集试验第35 d,每组选取体重相近的断奶仔猪10头,空腹颈静脉采血10 mL,静置2 h,离心取上层血清,用于检测血清生化指标和免疫指标。1.6测定指标及方法1.6.1生长性能试验前1 d和试验结束当天断奶仔猪禁食12 h,空腹称重,计算试验期间的平均日增重。统计试验期间各组断奶仔猪的总采食量,计算平均日采食量和料重比。试验期间观察仔猪腹泻情况,并计算腹泻率。生长性能计算公式如下:平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=总采食量/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)腹泻率=总腹泻头数×发病天数/(仔猪头数×试验天数)×100%(4)1.6.2血清生化指标断奶仔猪血清中白蛋白、球蛋白、总蛋白、尿素氮、血糖、甘油三酯、胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇含量及谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性检测方法参考试剂盒说明书。1.6.3免疫指标断奶仔猪血清中免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、补体C3、补体C4、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-2、白细胞介素-6和白细胞介素-10检测方法参考试剂盒说明书。1.7数据统计与分析采用SPSS 20软件对数据做单因素方差分析,采用LDS法进行多重比较,结果以平均值和总标准误表示,P0.01表示差异极显著,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1日粮添加酵母核苷酸对断奶仔猪生长性能的影响(见表2)由表2可知,3组和4组断奶仔猪的末重显著高于对照组(P0.05)。3组和4组断奶仔猪的平均日增重显著高于对照组和2组(P0.05),料重比显著低于对照组和2组(P0.05)。所有试验组断奶仔猪的腹泻率均极显著低于对照组(P0.01)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.18.009.T002表2日粮添加酵母核苷酸对断奶仔猪生长性能的影响项目初重/kg末重/kg平均日增重/(kg/d)平均日采食量/(g/d)料重比腹泻率/%1组7.0413.40b0.23b474.002.06a5.49A2组7.1413.95ab0.24b476.001.98a3.37B3组7.0614.64a0.27a485.001.80b2.58C4组7.1014.75a0.27a488.001.81b2.63CSEM0.871.410.0512.030.140.51P值0.6180.0430.0210.8310.0190.004注:同列数据肩标不同小写字母表示差异显著(P0.05),不同大写字母表示差异极显著(P0.01),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。2.2日粮添加酵母核苷酸对断奶仔猪血清生化指标的影响(见表3)由表3可知,3组和4组断奶仔猪血清中总蛋白、白蛋白含量高于对照组(P0.05),所有试验组断奶仔猪的甘油三酯含量均极显著低于对照组(P0.05),3组和4组断奶仔猪血清的谷草转氨酶活性显著低于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.18.009.T003表3日粮添加酵母核苷酸对断奶仔猪血清生化指标的影响项目总蛋白/(g/L)白蛋白/(g/L)球蛋白/(g/L)葡萄糖/(mmol/L)尿素氮/(mmol/L)甘油三酯/(mmol/L)胆固醇/(mmol/L)低密度脂蛋白胆固醇/(mmol/L)高密度脂蛋白胆固醇/(mmol/L)谷草转氨酶/(U/L)谷丙转氨酶/(U/L)碱性磷酸酶/(U/L)乳酸脱氢酶/(U/L)1组57.96a23.19a34.775.025.130.56a2.761.341.9277.45a104.20186.03831.32组60.37ab25.04ab35.335.105.020.49b2.781.301.9573.91ab100.38185.39840.373组65.21b27.88b37.335.664.950.45c2.701.281.9570.29b97.25182.28852.194组66.49b28.16b38.335.704.880.43c2.761.291.9868.30b94.03180.59863.92SEM3.271.282.160.630.490.060.290.140.204.195.046.1810.37P值0.0450.0290.0690.3710.4920.0390.2370.310.2120.0410.1070.8510.7322.3日粮添加酵母核苷酸对断奶仔猪免疫功能的影响(见表4)由表4可知,3组和4组断奶仔猪血清的补体C3、补体C4、白细胞介素-10含量均显著高于对照组(P0.05)。所有试验组仔猪的IgG含量均显著高于对照组(P0.05),肿瘤坏死因子含量均显著低于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.18.009.T004表4日粮添加酵母核苷酸对断奶仔猪免疫功能的影响项目补体C3/(mg/L)补体C4/(mg/L)IgA/(g/L)IgG/(g/L)IgM/(g/L)肿瘤坏死因子α/(ng/L)白细胞介素-2/(ng/L)白细胞介素-6/(ng/L)白细胞介素-10/(ng/L)1组24.98a28.03a1.273.18c0.28264.04a5.9355.02113.04a2组26.03ab31.17ab1.323.73b0.30219.37b6.2153.18129.18ab3组29.92b35.80b1.384.39a0.31167.20c6.4552.02144.13b4组30.14b37.05b1.344.21a0.31183.92c6.7052.19150.39bSEM2.102.070.180.620.064.051.042.034.17P值0.0030.0020.0830.0040.2850.0280.420.2170.0443讨论3.1日粮添加酵母核苷酸对断奶仔猪生长性能的影响核苷酸对动物机体内各种物质的合成和代谢起重要作用,可以促进幼龄动物各种器官的生长发育,对机体的免疫具有调节作用。周慧琦[10]研究发现,在断奶仔猪日粮中添加3%富含核苷酸的酵母提取物可以提高仔猪的平均日增重,降低料重比,但未达到显著水平,能够显著降低断奶仔猪的腹泻率。郜陆敏等[11]研究表明,在妊娠后期母猪日粮中添加4 g/kg的酵母核苷酸可以显著降低哺乳仔猪腹泻率,能够提高仔猪断奶时的平均体重。本试验结果与上述研究结果相似,酵母核苷酸能够提高断奶仔猪的生长性能,抑制大肠杆菌、沙门氏菌在断奶仔猪胃肠道内的定植及生长,降低断奶仔猪的腹泻率,改善肠道功能,提高断奶仔猪对营养物质的消化吸收程度,从而提高断奶仔猪的生长性能[12-13]。3.2日粮添加酵母核苷酸对断奶仔猪血清生化指标的影响血清生化指标可以反映动物机体的健康状态。总蛋白、尿素氮含量可以反映机体对蛋白质合成和代谢的状态,尿素氮含量越低,说明机体对蛋白质的利用率越好。胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇含量可以反映机体脂类的代谢情况。谷草转氨酶和谷丙转氨酶可以反映机体肝功能状态。本试验结果表明,断奶仔猪日粮中添加适量的酵母核苷酸能够促进蛋白质的消化吸收,改善机体的脂类代谢和机体肝功能。周慧琦[10]研究发现,在断奶仔猪日粮中添加3%的酵母核苷酸能够极显著提高总蛋白含量,乳糖含量和乳酸脱氢酶活性有提高的趋势。高敏敏[14]在异育银鲫饵料中添加适量酵母核苷酸可以提高总蛋白、总胆汁酸和低密度脂蛋白含量;胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和血糖含量均有下降的趋势。伏润奇等[15]研究表明,在断奶仔猪饲料中使用含有酵母核苷酸的水解物,能够显著减低断奶仔猪的低密度脂蛋白胆固醇和丙二醛含量,并降低血清甘油三酯含量。本试验研究结果与上述研究类似,说明酵母核苷酸可以改善幼龄动物机体的血清生化指标,提高机体的健康状态。研究表明,酵母核苷酸可以促进断奶仔猪自身蛋白质的合成,保持幼龄动物机体的代谢水平处于良好的环境,促进胃肠道的发育,快速恢复断奶仔猪因断奶而导致的应激状态,保证机体处于健康状态[16-17]。3.3日粮添加酵母核苷酸对仔猪免疫功能的影响动物机体血液中免疫球蛋白、抗炎因子、补体在动物机体体液免疫过程中起重要作用。本试验结果表明,在断奶仔猪日粮中添加适量的酵母核苷酸可以显著降低促炎因子含量,提高抗炎因子和免疫球蛋白含量,进而提高断奶仔猪机体的免疫力。郜陆敏等[11]研究发现,在妊娠后期母猪日粮中添加酵母核苷酸可以改善新生仔猪肠道形态结构,显著提高仔猪空肠和回肠中抗炎因子的表达量。伏润奇等[15]研究表明,酵母核苷酸可以显著提高断奶仔猪血液中补体C3、C4含量。酵母核苷酸能够提高断奶仔猪机体的免疫功能的原因可能是酵母核苷酸促进了T淋巴细胞的生长发育,促进B细胞的分化与成熟,激活免疫细胞,提高细胞因子的产生,进而调节机体的免疫应答反应[18-19]。4结论在断奶仔猪饲料中添加酵母核苷酸可以有效促进断奶仔猪的生长,改善血清生化指标,增强机体的免疫功能。综合考虑,酵母核苷酸在断奶仔猪饲料中的最适添加量为0.10%。

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