麒麟鸡又称卷毛鸡、翻毛鸡，原产于广东省茂名高州、信宜地区，是优质地方鸡品种。研究表明，鸡的卷毛性状由常染色体等位基因的不完全显色性所致[1]，而麒麟鸡则由于第33号染色体KRT75L4基因cds区15 bp（chr:33:1295046-1295060）缺失而呈现卷羽的特征[2]。麒麟鸡的卷羽性状有利于散热。因此，麒麟鸡在潮湿的热带、亚热带气候条件下生长性能表现良好。本草纲目记载，麒麟鸡是独特的药膳鸡，对胃病、风湿杂症和妇科病有很好的治疗功效[3]。但麒麟鸡规模化和商品化生产时间短，无特定的营养参数，不能进行标准化生产。因此，本试验以麒麟鸡为研究对象，探讨饲粮中能量水平对其生长性能、营养物质表观消化率以及肝脏相关指标的影响，为麒麟鸡规模化、标准化养殖提供参考。1材料与方法1.1试验动物试验选择200只1日龄麒麟母鸡，随机分为5组，每组4个重复，每个重复10只麒麟母鸡。各组饲粮能量水平分别为10.00、10.80、11.60、12.40、13.20 MJ/kg（粗蛋白含量约为19％）。试验期12 w。1.2试验饲粮试验饲粮参照NRC（1994）家禽营养需要和中国黄羽肉鸡饲养标准（2004）适当调整后配制，饲粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.19.009.T001表1饲粮组成及营养水平（干物质基础）项目10.00 MJ/kg组10.80 MJ/kg组11.60 MJ/kg组12.40 MJ/kg组13.2 0MJ/kg组原料组成/%玉米48.0954.0161.1460.0457.05豆粕31.8431.4430.4931.5631.33谷糠10.936.250.3000鱼粉0.500.500.500.501.10麸皮4.142.892.650.460.18大豆油0.100.500.503.006.00磷酸氢钙1.881.891.901.931.85蛋壳粉1.721.721.721.711.69食盐0.300.300.300.300.30预混料0.500.500.500.500.50合计100.00100.00100.00100.00100.00营养水平代谢能/(MJ/kg)10.0010.8011.6012.4013.20粗蛋白/%19.0819.0519.0318.9918.89赖氨酸/%0.030.030.050.030.02蛋氨酸/%0.110.110.100.100.10蛋氨酸+胱氨酸/%0.710.720.730.720.72钙/%1.151.151.151.151.15磷/%0.490.490.490.490.49注：1.预混料为每千克基础饲粮提供：Cu 8 mg、Fe 80 mg、Zn 60 mg、Mn 100 mg、Se 0.17 mg、I 0.4 mg、VA 8 330 IU、VD 1 440 IU、VE 30 IU、VB1 2.0 mg、VB2 8 mg、VB6 1.2 mg、VB12 0.03 mg、叶酸2.0 mg、生物素0.2 mg、烟酸40 mg、泛酸20 mg、氯化胆碱750 mg。2.营养水平中粗蛋白为实测值，其余均为计算值。1.3饲养管理试验麒麟鸡饲养在3层立式的金属笼中。鸡舍中使用红外线灯提供热量和光照，自由采食和饮水，常规接种疫苗。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能记录初生重量，试验结束后，在鸡空腹状态下称重（禁食12 h）。记录采食量，计算平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。ADG(g/d)=(末重-初重)/试验天数(1)ADFI(g/d)=饲料消耗/试验天数(2)F/G=平均日采食量/平均每日增重(3)1.4.2营养物质表观消化率试验结束前4 d以重复为单位，选取体重相近的2只鸡放入代谢笼进行代谢试验，采用全收粪法测消化率，收集粪便时加入1~2滴10％盐酸和甲苯，固氮防腐，120 ℃ 1 h，65 ℃烘至恒重，回潮，粉碎，待用。饲粮及粪中能量（GE）采用燃烧法（德国IKA2000全自动氧弹测定仪）测定；干物质（DM）采用GB/T 6435—2014测定；粗蛋白（CP）采用凯氏定氮法（GB/T 6432—2018）测定；粗脂肪（EE）采用索氏脂肪提取法（GB/T 6433—2006）测定；粗灰分（Ash）采用灼烧重量法（GB/T 6438—2007）测定；钙（Ca）采用EDTA络合滴定法（GB/T 6436—2018）测定；磷（P）采用分光光度法（GB/T 6437—2018）测定。营养物质表观消化率=100%×[1-(A'/A)×(B/B')](4)式中：A为饲料中待评定元素的含量（%）；A'为粪中相应元素的含量（%）；B为饲料中指示剂的含量（%）；B'为粪中指示剂的含量（%）。1.4.3肝脏相关指标对代谢试验鸡进行屠宰，取肝脏样品分别储存于液氮和福尔马林固定液中，用于测定肝脏相关生化指标，观察肝脏组织结构。肝脏生化指标：肝脏总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、脂肪酶（LPS）、脂蛋白脂肪酶（LPL）均采用试剂盒测定。试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。肝脏组织结构：采用石蜡切片法和HE染法[4]，光学显微镜下观察肝脏组织结构。1.5数据统计与分析采用Excel 2019软件对试验数据进行初步处理，采用SPSS 23.0软件进行单因素方差分析（One-way ANOVA），使用Duncan's法进行多重比较，结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1饲粮能量水平对麒麟鸡生长性能的影响（见表2）由表2可知，能量水平为11.60 MJ/kg时，麒麟鸡的增重和ADG显著高于10.00、10.80和13.20 MJ/kg组（P0.05）；11.60 MJ/kg水平组增重的分别比其他水平组高12.39%、15.10%和18.43%。随着能量的增加，ADFI和F/G显著降低（P0.05），F/G的变化趋势与ADFI相似，11.60MJ/kg水平组F/G最高，分别比其他各组高22.79%（P0.05）、17.68%（P0.05）、3.06%（P0.05）和10.54%（P0.05）。能量水平为10.00、10.08 MJ/kg组的F/G显著高于11.60、12.40 MJ/kg组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.19.009.T002表2饲粮能量水平对麒麟鸡生长性能的影响项目初重/g末重/g增重/gADG/(g/d)ADFI/(g/d)F/GP值0.9460.0720.0250.0250.0150.01210.00 MJ/kg组35.11±0.151 281.98±19.401 246.87±19.52b14.84±0.23b52.13±1.45a3.61±0.09a10.80 MJ/kg组35.31±0.201 252.83±23.151 217.52±23.27b14.49±0.28b50.19±1.26ab3.46±0.07a11.60 MJ/kg组35.26±0.421 436.63±42.611 401.36±42.78a16.68±0.51a49.04±1.52abc2.94±0.75b12.40 MJ/kg组35.20±0.221 318.96±59.131 283.70±59.15ab15.28±0.70ab46.13±1.26bc3.03±0.14b13.20 MJ/kg组35.23±0.431 301.78±55.121 183.33±24.28b14.09±0.65b45.50±0.80c3.25±0.19ab注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05），字母相同或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2饲粮能量水平对麒麟鸡营养物质表观消化率的影响（见表3）由表3可知，随着饲粮能量水平的提升，干物质和总能营养代谢率显著升高（P0.05）。11.60、12.40 MJ/kg水平组总能营养代谢率均显著高于10.00、10.80 MJ/kg组（P0.05）。11.60 MJ/kg组粗脂肪、粗灰分、钙和磷的营养代谢率显著高于其他水平组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.19.009.T003表3饲粮能量水平对麒麟鸡营养物质表观消化率的影响项目干物质总能粗蛋白粗脂肪粗灰分钙磷P值000.061 7000010.00 MJ/kg组72.88±0.07d64.69±0.26d64.41±1.3265.78±1.57c37.00±0.84bc31.79±2.73c36.63±1.47b10.80 MJ/kg组76.42±0.10c68.33±0.44c66.31±1.7564.51±1.79c38.50±2.76bc48.07±1.07b34.97±1.01b11.60 MJ/kg组78.85±0.04b73.56±0.42ab64.51±2.5883.92±0.32a49.70±0.25a63.76±0.35a50.44±1.12a12.40 MJ/kg组79.21±0.15b74.31±0.95ab63.77±1.8777.07±3.01b40.44±0.94b49.12±1.42b38.33±0.74b13.20 MJ/kg组81.70±0.88a76.47±1.11a71.12±0.4050.42±2.42d34.69±0.10c46.79±5.45b35.82±2.47b%2.3饲粮能量水平对麒麟鸡肝脏健康的影响2.3.1饲粮能量水平对麒麟鸡肝脏形态结构的影响（见图1）细胞核可以被革兰氏染液染成蓝紫色，细胞质被革兰氏液染成红色。由图1可知，能量为10.80、11.60 MJ/kg时肝小叶结构清晰完整，肝细胞核清晰可见，细胞四周的肝血窦结构正常。能量为10.00、12.40 MJ/kg时肝小叶结构尚算清晰，可以清晰观察到肝细胞核，但细胞四周的肝血窦数量少。能量为13.20 MJ/kg时肝小叶结构杂乱，无法清晰看到肝细胞核结构，核膜界线模糊，细胞四周的肝血窦少且狭窄，肝脏细胞内有脂肪沉积。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.19.009.F001图1肝脏组织切片（HE，×400）2.3.2饲粮能量水平对麒麟鸡肝脏脂类代谢相关指标的影响（见表4）由表4可知，随着能量水平的增加肝脏TC含量显著增加（P0.05），12.40、13.20 MJ/kg组TC含量显著高于其他组（P0.05）。LDL-C含量随着能量水平的增加有升高的趋势（P0.05），TG和HDL-C含量则随着能量水平的提高而降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.19.009.T004表4饲粮能量水平对麒麟鸡肝脏脂类代谢相关指标的影响项目TC/(mmol/L)TG/(mmol/L)HDL-C/(mmol/L)LDL-C/(mmol/L)LPS/(U/g prot)LPL/(U/mL)P值0.0010.3200.0700.0600.0880.25110.00 MJ/kg组1.48±0.88b0.91±0.272.60±0.632.56±0.91175.88±12.835.20±1.6710.80 MJ/kg组1.12±0.31b0.87±0.202.47±0.702.68±0.79140.60±14.393.49±1.3611.60 MJ/kg组1.36±0.56b0.79±0.132.34±0.692.75±0.83145.79±16.873.23±0.9012.40 MJ/kg组2.44±0.57a0.72±0.161.82±0.402.78±0.28140.60±34.853.30±0.8813.20 MJ/kg组2.32±0.44a0.71±0.191.69±0.583.28±0.94162.91±23.923.55±1.133讨论3.1饲粮能量水平对麒麟鸡生长性能的影响能量作为机体代谢吸收的物质基础，动物的生长发育离不开能量。饲粮能量水平高动物的采食量低，能量水平低的动物采食量高[5]。本试验结果显示，蛋白质含量约19%的饲粮中，随着能量水平的提高，麒麟鸡日平均采食量显著降低，与徐铁山等[6]在嘉积鸭上的试验的结果一致。研究结果进一步验证了动物“为能而食”的采食特征。研究表明，随着饲粮中能量水平的提高，家禽生长性能和饲料转化率提高[7]，平均日采食量和料重比均降低[8]。本试验中，饲粮能量水平在10.00~13.20 MJ /kg的ADFI也呈现逐渐下降的趋势；麒麟鸡的ADG随着能量水平的增加呈现先上升后下降的趋势，表明能量水平太低或太高对麒麟鸡的ADG效果不好，与陈莹等[8]、杨秀娟等[9]、路腾等[10]的研究结果相同。也有研究表明，随着饲粮中能量水平的提高，鸡的ADG直线上升[11-13]。造成这些差别的原因可能是鸡的品种不同或性别差异。麒麟鸡是卷羽鸡，散热性强，在湿热环境下用于维持体温的能量较常羽鸡少。蒋守群等[11]以慢速型黄羽公鸡为研究对象，发现ADG和能量呈线性上升关系。在饲粮蛋白质水平一定的前提下，能量的变化会造成能蛋比不同是影响ADG的重要因素。能蛋比高，鸡进食量少，因此进食的蛋白质减少，从而影响生长性能；而能蛋比低，鸡进食量增加，进而增加蛋白质进食，摄入的蛋白质增加时会增加机体代谢负担，同时蛋白质的热增耗高，能量及其他营养物质的利用率会降低[14]。本试验中，12周龄麒麟鸡的增重在能量水平为11.60 MJ/kg时最大，可以推断麒麟鸡适宜的能蛋比为0.61。3.2饲粮中能量水平对麒麟鸡营养代谢率的影响饲粮中养分的消化率和饲粮养分含量有关。李莉等[15]对桂香雏鸡的研究结果显示，随着饲粮中能量水平提高，营养物质的表观代谢率提高。但是，不同研究提高的程度略有差异，有的呈现线性提高的趋势[8]，有的呈现逐渐提高的趋势[16-17]。也有研究表明，饲粮中低能量水平组养分表观代谢率高于高能量组[18]。本研究结果显示，在一定能量范围内，饲粮中营养物质的表观消化率随着能量水平的提高而增大；超过一定限度，营养物质的表观消化率基本保持一致，与于彩云等[18]的研究结果一致。因此，在特定粗蛋白质水平下，饲粮营养物质表观代谢率和能量含量相关，呈现出先上升后平缓的趋势。能量的表观消化率呈现持续升高的趋势，可能是随着能量的提高，麒麟鸡进食量降低，最大限度地保证生存和生长需要，推测麒麟鸡是通过进食量的营养反馈性调整后续采食量，进而改变能量代谢率。3.3饲粮中能量水平对麒麟鸡肝脏健康的影响肝脏是机体营养物质代谢的主要场所[19]，其健康程度和饲粮进食量高度相关。饲粮中能量水平直接影响动物肝脏的组织机构和脂肪代谢。研究表明，鹅在填饲高能日粮后，肝脏中脂肪合成原料增加，脂肪运输降解的能力不足，会导致肝脏的脂肪沉积，肝细胞增大，影响肝脏的组织结构[20]。在肉鸭饲粮中高能和低能均会引起肝细胞核破裂和核溶解，只有饲粮中能量适宜时肝细胞结构完整而且排列整齐[19]，与本试验结果相似。本试验中，10.80、11.60 MJ/kg组麒麟鸡肝小叶结构清晰完整，能量低于10.80 MJ/kg和高于11.60 MJ/kg的饲粮会影响肝细胞结构的完整性，当能量达到13.20 MJ/kg时会引起肝细胞脂肪的沉积，说明饲粮中过高的能量引起肝脏脂肪代谢紊乱，造成脂肪沉积。肝脏脂肪代谢的状况可以通过相应的代谢指标和酶的活性体现。TG常用于反应机体血脂水平，其代谢产物为大部分组织提供能量[21]。肝脏在家禽脂类代谢中发挥着重要作用，通过糖原分解和糖异生作用平衡葡萄糖的释放和储存，进而调节肝脏的脂类代谢指标[22]。肝脏脂肪的积蓄和肝脏中的TG、TC含量高度相关。脂类在肝脏正常的代谢过程为TC、TG与LDL-C结合后排到肝细胞外。此代谢途径异常时，大量TC、TG在肝脏中堆积，引起肝脏脂肪变性[23]。本研究结果表明，随着饲粮中能量水平的增加，肝脏TC含量显著增加。因此，高能量有致使肝脏损伤的可能。肝脏LPS的主要作用是将脂肪分解为甘油和脂肪酸。LPL是动物脂肪沉积的关键酶，是甘油三酯降解过程中的限速酶，在脂质代谢和转运过程中起重要作用。在其他关键酶共同作用下LPS和LPL达到动态平衡，保证脂类代谢的稳定状态。HDL-C主要由肝脏合成，其颗粒小，可以自由进出动脉血管壁，摄取血管壁内膜底层沉积的胆固醇、甘油三酯等转运到肝脏进行代谢。LDL-C的主要功能是运输肝脏中合成的内源性甘油三酯，与TG、TC共同参与机体的脂肪代谢。本试验条件下，随着饲粮中能量水平的提高，麒麟鸡肝脏HDL-C含量有逐渐降低的趋势，LDL-C含量有逐渐升高的趋势，说明饲粮的能量水平对肝脏健康存在潜在的威胁。但是，脂肪代谢水平无显著变化，原因可能与饲粮的进食量有关。能量水平高，进食量少，摄入的能量物质总量变化不大。因此，可以维持肝脏正常的脂类代谢。结合肝脏组织结构，饲粮中能量为10.80~11.60 MJ/kg时对肝脏健康的影响较小，能量太高或太低均会影响肝脏健康，增加麒麟鸡脂肪代谢紊乱的风险，与Cerk等[24]的结论一致。4结论随着饲粮中能量水平的提高，麒麟鸡的生长性能和营养物质表观消化率均增加，采食量降低，肝脏健康受到影响。综合生长性能、营养物质表观消化率、肝脏相关指标情况及肝脏结构完整性，麒麟鸡饲粮能量较适宜水平为10.8~11.6 MJ/kg。