随着生态环境保护的发展、草食家畜禁牧政策的实施,草食家畜的饲养方式发生转变[1]。辽宁绒山羊具有产绒量高、绒质优良、适应性强、遗传性能稳定的优点[2]。舍饲方式的转变大幅提高精料比例,出现营养代谢问题,进而影响绒山羊的生产性能和健康水平[3]。碳水化合物的结构对动物的生长和健康有很大影响[4],绒山羊对结构性碳水化合物有较好的利用率。SC/NSC与饲粮在瘤胃中的发酵速度与能量释放密切相关[3]。精粗比能够影响瘤胃的发酵方式、内环境、血液生化指标和微生物群落变化,是保证胃肠道健康状态的重要因素[4]。因此,本试验研究不同SC/NSC等氮饲粮对辽宁绒山羊瘤胃发酵参数及血清生化指标的影响,为绒山羊实际生产提供参考。1材料与方法1.1饲料样品测定试验前,采集试验所用饲料原料,进行营养成分分析测定。粗蛋白(CP)、粗脂肪(EE)和粗灰分(Ash)参照Liu等[5]的方法测定,中性洗涤纤维(NDF)采用Licitr等[6]的方法测定,酸性洗涤纤维(ADF)采用谭支良等[7]的方法测定。原料中结构碳水化合物(SC)和非结构碳水化合物(NSC)含量依照谭支良等[7]的方法计算。饲料原料主要营养成分见表1。通过计算得出SC/NSC的比值运用于饲养试验的比值。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.20.001.T001表1饲料原料主要营养成分(干物质基础)项目CP/%EE/%NDF/%Ash/%ADF/%SC/%NSC/%SC/NSC玉米7.653.9916.131.231.018.0138.170.21豆粕44.550.1134.005.9612.734.255.620.76菜籽粕38.821.8220.357.936.540.280.750.37玉米蛋白粉57.135.718.571.194.790.231.930.12干酒糟及其可溶物30.123.0847.523.417.622.391.411.70苹果渣11.112.9176.921.343.622.200.346.46糖蜜2.70004.100002.80苜蓿草13.243.0862.129.244.8654.9117.183.20玉米秸5.160.3773.445.662.7653.4518.132.95花生秸5.671.6663.6014.382.4352.5517.123.071.2试验动物和试验设计选取15只装有永久性瘤胃瘘管的辽宁绒山羊,体重(52.5±2.1)kg,随机分为5组,每组3个重复。参照辽宁绒山羊生产中常用精粗比为60∶40、50∶50、40∶60、30∶70和20∶80,配制SC/NSC分别为0.85、1.05、1.28、1.59和1.96的全混合饲粮。试验饲粮组成及营养水平见表2。试验羊圈养单饲,早晚2次等量饲喂,自由饮水。预试期10 d,正式试验期15 d。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.20.001.T002表2试验饲粮组成及营养水平(风干基础)项目SC/NSC0.85组1.05组1.28组1.59组1.96组原料组成/%苜蓿草06.2518.7530.0037.50玉米秸秆33.7525.0020.62516.256.25花生秸秆6.2518.7520.62523.7536.25玉米31.8026.5021.2015.9010.60豆粕12.0010.008.006.004.00菜籽粕1.201.000.800.600.40玉米蛋白粉3.603.002.401.801.20干酒糟及其可溶物3.603.002.401.801.20苹果渣1.801.501.200.900.60液体糖蜜1.801.501.200.900.60石粉1.140.950.760.570.38预混料1.621.351.080.810.54小苏打0.600.500.400.300.20氯化铵0.420.350.280.210.14食盐0.300.250.200.150.10过瘤胃胆碱0.060.050.040.030.02过瘤胃蛋氨酸0.060.050.040.030.02合计100.00100.00100.00100.00100.00营养水平代谢能/(MJ/kg)8.258.288.198.118.18干物质/%88.2888.5688.5188.5188.75粗蛋白质/%14.6614.5814.6314.6214.67中性洗涤纤维/%24.0629.7434.2238.9044.44酸性洗涤纤维/%15.2420.4324.5328.7433.96钙/%0.981.251.411.581.86总磷/%0.320.280.270.250.21注:1.每千克预混料为饲粮提供:VA 180 000 IU、VD3 26 000 IU、VE 250 IU、烟酸225 mg、铁2 500 mg、铜312 mg、锌2 500 mg、锰3 125 mg、硒7.8 mg、碘27.5 mg、钴7.75 mg。2.营养水平中代谢能为计算值,其余均为实测值。1.3测定指标及方法正式试验期第1、10、15 d饲喂4 h后通过瘤胃瘘管取瘤胃液样,测定pH值;-20 ℃冷冻保存,用于测定氨态氮(NH3-N)和挥发性脂肪酸(VFA)浓度。pH值采用25型酸度计测定,NH3-N浓度采用比色法测定,VFA(乙酸、丙酸和丁酸)浓度采用液相色谱法测定。采集瘤胃液前静脉采血,4 ℃、3 500 r/min离心15 min,取血清,分装,-20 ℃保存。尿素氮(BUN)、尿酸(UA)、血糖(GLU)、甘油三酯(TG)含量及碱性磷酸酶(ALP)活性均采用比色法测定,试剂盒均购自中生北控生物科技股份有限公司。胰岛素(INS)含量测定采用酶联免疫法,试剂盒购自北京华英生物技术研究所。1.4数据统计与分析采用SPSS 17.0软件中的混合模型进行方差分析,采用Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1饲粮SC/NSC对辽宁绒山羊瘤胃pH值和NH3-N含量的影响(见表3)由表3可知,随饲粮SC/NSC比值增加,绒山羊瘤胃液pH值呈显著升高。0.85组绒山羊瘤胃液pH值显著低于1.28、1.59、1.96组(P0.05);1.05组绒山羊瘤胃液pH值显著低于1.96组(P0.05)。0.85、1.05组绒山羊瘤胃液NH3-N浓度显著高于其他各组(P0.05);1.96组绒山羊瘤胃液NH3-N浓度显著低于他各组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.20.001.T003表3饲粮SC/NSC对辽宁绒山羊瘤胃pH值和NH3-N含量的影响项目pH值NH3-N/(mg/L)0.85组6.54c164.30a1.05组6.62bc163.40a1.28组6.65ab158.90b1.59组6.68ab154.70c1.96组6.73a124.10dSEM0.020.40P值0.0090.001注:同列数据肩标不同小写字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。2.2饲粮SC/NSC对辽宁绒山羊瘤胃VFA的影响(见表4)由表4可知,随饲粮SC/NSC比值增加,瘤胃液VFA浓度下降,乙酸浓度增加。0.85、1.05组的VFA浓度显著高于1.59、1.96组(P0.05)。0.85、1.05组的乙酸含量显著低于1.59、1.96组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.20.001.T004表4饲粮SC/NSC对辽宁绒山羊瘤胃VFA的影响项目VFA/(mmol/L)乙酸(mmol/L)丙酸(mmol/L)丁酸(mmol/L)乙酸/丙酸0.85组54.59a76.87c14.768.375.241.05组51.82ab77.41bc14.458.145.411.28组47.08abc78.39bc14.167.455.621.59组44.15bc79.28ab13.916.815.761.96组39.52c80.78a13.445.786.16SEM1.800.440.190.340.12P值0.0260.0110.2440.0620.0832.3饲粮SC/NSC对辽宁绒山羊血清生化指标的影响(见表5)由表5可知,随SC/NSC比值增加,1.05组胰岛素含量显著高于其他各组(P0.05);1.59组的碱性磷酸酶活性显著高于0.85、1.05、1.59组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.20.001.T005表5饲粮SC/NSC对辽宁绒山羊血清生化指标的影响项目尿素氮/(mmol/L)尿酸/(μmol/L)血糖/(mmol/L)甘油三酯/(mmol/L)胰岛素/(μU/L)碱性磷酸酶/(U/L)0.85组4.2615.325.540.1510.15b80.79b1.05组5.6716.565.270.1415.54a119.99b1.28组5.7716.275.630.1512.48b101.97ab1.59组6.2116.925.200.1410.11b156.14a1.96组4.6916.685.640.1310.94b82.62bSEM0.490.290.200.020.936.84P值0.1240.7630.5840.8850.0230.0153讨论3.1饲粮SC/NSC对辽宁绒山羊瘤胃pH值和NH3-N浓度的影响饲粮组成是影响反刍动物瘤胃pH值的重要因素[8]。高谷物精料型碳水化合物结构的饲粮会引起瘤胃内pH值降低[9]。瘤胃液pH值的正常变化范围是6.2~6.8[10]。Mclaughlin等[11]研究表明,奶山羊饲喂精料比例分别为30%和60%饲粮,高精料饲粮瘤胃pH值降低。Zhang等[12]研究表明,不同SC/NSC饲粮,瘤胃液pH值变动范围不大,在6.32~6.55之间。本试验中,随饲粮SC/NSC比值增加,pH值增高,范围在6.50~6.73之间,说明pH值与饲粮SC/NSC比值相关,但未超出正常范围,与Zhang等[12]的研究结果相似。NH3-N源自饲粮源蛋白质和内源含氮物质降解,在瘤胃发酵中起重要作用。研究发现,提高饲粮精料含量可以增加NH3-N的浓度,改变瘤胃某些核心菌的丰度[13]。Koch等[14]研究表明,随着SC/NSC比例的增加,NH3-N浓度下降,瘤胃降解蛋白减少,快速利用能量下降,微生物活性下降,蛋白质分解速度降低。孙亚波等[3]研究表明,随着SC/NSC比例缓慢降低,NH3-N浓度呈升高的趋势。本试验中,NH3-N浓度变化范围在12.05~16.52之间,随着饲粮SC/NSC比值升高,NH3-N浓度下降,0.85、1.05、1.28组NH3-N浓度显著高于其他组,与上述研究结果一致。原因可能是饲粮中非结果性碳水化合物水平提高,瘤胃内环境有利于瘤胃微生物生长增殖[13],提高NH3-N的利用效率。3.2饲粮SC/NSC对辽宁绒山羊瘤胃VFA的影响动物体内75%~85%的能量源自饲粮中的碳水化合物,瘤胃内碳水化合物代谢是反刍动物体内能量来源的主要前体物[3]。研究表明,饲粮中碳水化合物结构比例和采食水平是影响VFA浓度和组成的重要因素[14]。Liu等[5]研究表明,精料比例增加,瘤胃内NH3-N和丙酸浓度相应增加,pH值下降,乙酸/丙酸下降。韦子海等[15]研究发现,SC/NSC为1.28组瘤胃总VFA、乙酸及丙酸浓度最高,但组间差异不显著;SC/NSC为0.84组丁酸浓度极显著高于其他组。中等偏低饲养水平下,适宜的SC/NSC比例有利于提高饲料中纤维物质的利用效率[16]。在本试验中,随着饲粮SC/NSC比值的升高,总VFA浓度下降,乙酸浓度增加。原因可能是绒山羊饲粮SC含量增加,纤维分解菌数量和活性提高,乙酸浓度相应增加。本研究中,随饲粮NSC含量增加,乙酸/丙酸和丁酸浓度呈下趋势。碳水化合物转化为乙酸、丙酸和丁酸能量利用效率分别为62%、109%和78%[3]。NSC水平提高,瘤胃乙酸/丙酸和丁酸浓度呈增加趋势,有利于机体和微生物能量利用效率提高。本试验条件下,辽宁绒山羊饲粮SC/NSC比值增加,瘤胃发酵参数指标变化不显著,说明试验过程中可以保证绒山羊维持正常瘤胃功能和消化道健康,低SC/NSC比值条件下,VFA组成有利于提高碳水化合物利用效率。生产实践中可以根据饲料的可用性结合生产目的并综合生产性能选择原料组成[17]。3.3饲粮SC/NSC对辽宁绒山羊血清生化指标的影响碳水化合物代指饲粮中粗纤维与无氮浸出物。动物体血清生化指标是机体重要的生物学特征。其中血清尿素氮是氨基酸最终代谢产物,反映动物机体蛋白质代谢情况,是反刍动物氮循环中非常重要的指标[18];甘油三酯是脂肪代谢的终产物,反映动物机体脂肪代谢的情况;胰岛素则可以反映体内糖代谢水平。本研究结果显示,SC/NSC比值影响动物体内糖代谢、脂代谢与蛋白质代谢。当SC/NSC比值从0.85增至1.59,血清尿素氮含量显著增加;当SC/NSC比值为1.96时,血清尿素含量最低。原因是NSC结构简单可消化性好,当SC/NSC比值达到一定数值时,微生物对其消化能力较弱,破坏了瘤胃微生物合成菌体蛋白过程的能氮平衡。随SC/NSC比值增加,甘油三酯含量总体呈缓慢下降趋势,各组尿酸间均差异不显著,与Wei等[19]研究结果一致。甘油三酯作为脂肪最终代谢产物,参与体内众多生化反应,是葡萄糖转化合成的必须前提。本试验中,1.05组绒山羊血清胰岛素含量显著高于其他组。胰岛素作为体内将降解血糖的主要激素之一,当SC/NSC比值为1.05时,体内胰岛素含量达到峰值,说明SC/NSC比值为1.05最适宜。低SC/NSC比例有利于动物机体能氮平衡,可提高碳水化合物利用效率,实践中可优先考虑采用。4结论饲粮不同碳水化合物比例影响辽宁绒山羊瘤胃发酵参数。随饲粮SC/NSC比值增加,瘤胃液pH值和乙酸浓度升高,VFA和NH3-N浓度下降,尿酸浓度缓慢上升,甘油三酯浓度缓慢降低,说明低SC/NSC比例有利于提高碳水化合物利用效率。

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