紫锥菊为菊科草本植物,主要分布于加拿大、美国和德国[1]。近年来,我国成功引种紫锥菊,陕西、河南、湖南等地均有种植。紫锥菊的主要活性成分为咖啡酸及其衍生物、多糖及糖蛋白、烷基酰胺类化合物等,具有免疫调节、抗菌消炎、抗病毒、抗肿瘤等功能[2]。我国批准紫锥菊相关制剂用于增强畜禽疫苗的免疫功能,如批准紫锥菊根、紫锥菊根末用于增强猪蓝耳病灭活疫苗、猪瘟疫苗的免疫效果[3]。仔猪进入保育期后,不能从母体获得相应的母源抗体,必须依靠自身的体质和免疫性能抵御外界环境的不利因素,饲养管理不当可以引发各种疾病,如腹泻、咳嗽和生长停止等[4]。紫锥菊及其相关制剂对猪的免疫功能及疫苗的免疫效果具有很好的增强作用[5]。目前,有关紫锥菊对猪的生长性能、血液指标及抗病性影响的研究较少。因此,本试验研究紫锥菊对保育猪生长性能、免疫功能、血清生化指标及抗病性的影响,为寻找可促进保育猪生长发育的添加剂提供参考。1材料与方法1.1试验材料试验保育猪选自甘肃德民生态养殖公司;紫锥菊超微粉购自山东齐鲁动物保健品公司;免疫指标测定试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司。1.2试验设计选取临床检查健康的25日龄的“杜×长×大”三元杂交仔猪100头,随机分为4组,每组5个重复,每个重复5头。对照组仔猪饲喂基础日粮,试验组仔猪饲喂基础日粮并分别添加0.6%、1.2%、1.8%的紫锥菊粉末。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.20.006.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米63.20消化能/(MJ/kg)13.42豆粕23.00干物质/%80.11麸皮8.50粗蛋白/%15.99石粉0.80总磷/%0.62磷酸氢钙1.00钙/%0.65氯化钠0.50赖氨酸/%0.82预混料3.00蛋氨酸+胱氨酸/%0.55色氨酸/%0.18苏氨酸/%0.21精氨酸/%1.01注:1.预混料购自甘肃大北农农牧科技有限责任公司。2.营养水平均为计算值。1.3饲养管理试验过程猪舍定期打扫消毒,确保舍内的饮水、采食、通风设备正常。试验过程保证猪自由采食、饮水,每天的9:00和17:00对翻动饲料,防止料槽中的饲料腐败、结块。每天记录异常猪数量。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能试验开始前和试验结束后分别对每组试验猪称重,记录每组的每天加料量、剩料量,计算试验猪平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。平均日采食量=试验期总耗料量/试验天数(1)平均日增重=(末重-初重)/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2免疫功能指标试验第15、30、45 d采集分离血清,利用试剂盒测定免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)和补体C3水平,测定方法参考说明书,采用双抗体两步夹心ELISA法。1.4.3血清生化指标利用试验第45 d采集静脉血制备血清,采用日立 7600全自动生化仪进行常规血清生化指标检测,主要包括白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)、谷丙转氨酶(ALT)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)。1.4.4抗病能力指标试验过程记录每组中出现腹泻、死亡等情况的异常猪数量,根据异常猪数量占正常数量猪数量的百分比判定抗病能力。1.5数据统计与分析利用Excel软件整理数据,采用SPSS 22.0软件进行统计分析,采用Duncan's法进行多重比较,结果以“平均值±标准差”表示。P0.05表示差异显著,P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1紫锥菊对保育猪生长性能的影响(见表2)由表2可知,1.8%紫锥菊组保育猪的末重、平均日增重显著高于对照组(P0.05),料重比极显著低于对照组(P0.01),1.2%紫锥菊组保育猪的料重比显著低于对照组(P0.05)。结果表明,日粮添加紫锥菊能够促进保育猪的生长发育,以添加1.8%的组别效果最好。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.20.006.T002表2紫锥菊对保育猪生长性能的影响组别初重/kg末重/kg平均日增重/(kg/d)平均日采食量/(kg/d)料重比对照组6.67±0.2618.99±2.340.02±0.000.79±0.031.55±0.180.6%紫锥菊组6.37±0.3619.99±2.450.03±0.000.81±0.311.56±0.281.2%紫锥菊组6.41±0.3420.68±2.670.03±0.000.80±0.251.49±0.11*1.8%紫锥菊组6.77±0.2721.87±2.34*0.03±0.00*0.81±0.301.43±0.22**注:*表示与对照组相比差异显著(P0.05),**表示与对照组相比差异极显著(P0.01),无标注表示差异不显著(P0.05);下表同。2.2紫锥菊对保育猪部分免疫功能的影响(见表3)由表3可知,试验15 d,1.8%紫锥菊组保育猪血清IgG、IgA、补体C3水平显著高于对照组(P0.05),1.8%紫锥菊组保育猪血清IgM水平极显著高于对照组(P0.01)。试验30 d,1.8%紫锥菊组保育猪血清IgM水平显著高于对照组(P0.05)。试验45 d,各组间IgM、IgG、IgA、补体C3水平差异均不显著(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.20.006.T003表3紫锥菊对保育猪部分免疫功能的影响项目对照组0.6%紫锥菊组1.2%紫锥菊组1.8%紫锥菊组IgM15 d0.430±0.0400.440±0.0500.460±0.040*0.510±0.060**30 d0.440±0.0600.440±0.0500.460±0.0300.470±0.060*45 d0.450±0.0700.460±0.0600.470±0.0500.450±0.060IgG15 d5.080±0.2205.260±0.3105.330±0.2805.490±0.340*30 d4.990±0.1305.070±0.2105.140±0.1805.150±0.34045 d4.350±0.5104.330±0.3904.360±0.4604.380±0.440IgA15 d0.730±0.0300.770±0.0200.800±0.0300.850±0.010*30 d0.860±0.0700.890±0.0600.910±0.0700.920±0.08045 d0.950±0.1000.940±0.1500.960±0.1300.950±0.170补体C315 d0.150±0.0050.160±0.0060.170±0.0040.190±0.005*30 d0.160±0.0060.170±0.0050.170±0.0040.180±0.00645 d0.150±0.0030.150±0.0050.170±0.0060.160±0.004g/L2.3紫锥菊对保育猪血清生化指标的影响(见表4)由表4可知,1.8%紫锥菊组保育猪血清ALT、ALP、ALB水平均显著高于对照组(P0.05),CHOL含量显著低于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.20.006.T004表4紫锥菊对保育猪血清生化指标的影响组别ALB/(g/L)TP/(g/L)ALP/(U/L)TBIL/(μmol/L)ALT/(U/L)CHOL/(mg/L)HDL/(g/L)对照组29.16±0.7174.26±2.1116.20±1.038.02±0.071 301.1±3.069.01±0.772.61±0.050.6%紫锥菊组30.18±0.9775.16±2.0717.06±1.328.13±0.191 352.2±2.888.99±0.622.78±0.081.2%紫锥菊组31.97±0.7975.78±1.7918.99±1.088.01±0.091 438.3±2.798.72±0.582.79±0.111.8%紫锥菊组33.72±0.98*75.99±1.9819.21±1.43*8.39±0.111 509.8±3.11*8.55±0.69*2.72±0.092.4紫锥菊对保育猪抗病能力的影响(见表5)由表5可知,与对照组相比,1.8%紫锥菊组保育猪的腹泻头数和腹泻率显著降低(P0.05),0.6%紫锥菊组和1.2%紫锥菊组呈递减趋势,但与对照组相比差异不显著(P0.05);各组间保育猪的死亡数及死亡率均无显著差异(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.20.006.T005表5紫锥菊对保育猪抗病能力的影响组别腹泻数/只死亡数/只腹泻率/%死亡率/%对照组2.40±0.111.40±0.0248.00±0.3124.00±0.100.6%紫锥菊组2.00±0.010.60±0.0224.00±0.194.00±0.041.2%紫锥菊组0.60±0.010.20±0.010.12±0.042.00±0.011.8%紫锥菊组0.20±0.00*0.00±0.000.00±0.00*0.00±0.003讨论3.1紫锥菊对保育猪生长性能的影响紫锥菊富含多糖、生物碱、蛋白质、微量元素等多种对动物机体有益的成分,是天然、无公害、无残留、不易产生抗药的添加剂[6]。日粮中添加紫锥菊粉末可改善日粮的结构比例和营养成分,补充日粮中的酚类、烷基胺、黄酮等营养成分的不足,促进动物机体对日粮的吸收,促进动物生长[7]。研究表明,在貉的基础日粮中添加紫锥菊超微粉可改善貉的生长性能[8]。安妮等[9]研究发现,紫锥菊提取物可改善肉鸡的生长性能。高仙等[10]研究发现,紫锥菊超微粉可促进蓝耳病病毒仔猪的生长。本试验在基础日粮中添加0.6%、1.2%、1.8%的紫锥菊,发现紫锥菊可促进保育猪生长,并降低料重比,与上述研究结果一致,表明紫锥菊粉具有促进动物生长性能的作用,原因可能与紫锥菊富含多种活性物质有关。这些活性物质能够提高保育猪对饲料的利用率,提高动物采食量,改善生长性能。3.2紫锥菊对保育猪免疫功能和抗病能力的影响免疫球蛋白分为IgA、IgG、IgM、免疫球蛋白D(IgD)、免疫球蛋白E(IgE),是机体防御系统中的重要成员,也是反映机体免疫状况的重要指标[11]。补体是存在于血清与组织液中、经活化后具有酶活性的蛋白质,与动物机体的免疫系统关系密切,是炎症反应等病理损害的重要介质,C3是效应功能发挥的关键成分[12]。紫锥菊可促进B淋巴细胞增殖,增强机体体液免疫。有研究发现,紫锥菊可提高小鼠血清IgM水平,促进免疫低下的鸡分泌血清IgG[13]。紫锥菊可使肉鸡的新城疫病毒抗体效价显著增强[14];提高猪猪瘟、猪丹毒及猪蓝耳病疫苗的抗体水平[15]。此外,紫锥菊还可提高犬细小病毒疫苗和犬瘟热疫苗的免疫应答[16-17]。上述研究结果表明,紫锥菊可增加机体的体液免疫应答能力,改善血液的免疫功能和血清生化指标。本试验研究发现,在保育猪日粮中添加紫锥菊可提高IgA、IgG、IgM和补体C3的水平,表明紫锥菊可促进保育猪机体的体液免疫应答能力,但随着添加时间的推移,体液免疫指标无法继续维持原来的差异状况,其原因有待进一步研究。试验过程中,紫锥菊添加组的腹泻率和死亡率和对照组相比均呈降低趋势,表明紫锥菊可促进机体的体液免疫应答能力,提高机体的抗病能力。3.3紫锥菊对保育猪血清生化指标的影响谷丙转氨酶活性的高低反映了蛋白质合成和代谢分解情况;碱性磷酸酶含量的变化反映了动物的生长状况,其活性的高低和动物的生长速度和生产性能呈正相关[18-19]。杨华等[20]研究发现,谷丙转氨酶和碱性磷酸酶活性与长白猪的日增重相关,活性越高,日增重量越高。伍革民等[21]研究发现,谷丙转氨酶和碱性磷酸酶活性的活性与“杜×长×大”猪的日增重呈正相关。本试验在保育猪的基础日粮中添加紫锥菊,添加剂量越高,谷丙转氨酶和碱性磷酸酶活性越高,白蛋白和总蛋白含量呈升高趋势,符合谷丙转氨酶活性越高蛋白质合成的量越高的理论。结果表明,紫锥菊的添加能够促进动物机体的生长。4结论日粮中添加紫锥菊能够促进保育猪生长,提高保育猪机体的免疫功能及抗病能力,1.8%的添加剂量效果最佳。
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