天然植物活性多糖具有广阔的应用前景[1]。甘草是一种常用中药材，甘草多糖具有免疫调节[2-3]、提高生长性能[4]、抗肿瘤[5]、抗病毒[6]、抗氧化[7]等功效，且无细胞毒作用[8]，可作为饲料添加剂。黄文清[9]研究发现，饲喂甘草颗粒可提高乌骨鸡的平均日增重和平均日采食量。衣蕾等[10]研究发现，添加甘草多糖组的罗曼鸡平均体重显著高于空白对照组。本试验研究甘草多糖对爱拔益加肉鸡生长性能、体尺以及IGF-1基因相对表达量的影响，旨在为甘草多糖在肉鸡养殖中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料甘草多糖购自洛阳蓝斯利科技有限公司。PrimeScriptTM RT reagent Kit with gDNA Eraser反转录试剂包、RNAiso Plus、氯仿、无水乙醇、异丙醇、DEPC水、TB Green Premix Ex Taq Ⅱ试剂包，均购自赛沃生物科技有限公司。1.2试验设计选用1日龄的健康爱拔益加肉鸡240只，购自洛阳市偃师市佃庄镇种鸡场，随机分为4组，每组6个重复，每个重复10只鸡。组1为对照组，肉鸡饲喂基础日粮；组2、组3和组4分别在基础日粮中添加300、600和900 mg/kg的甘草多糖。试验期为42 d。每日人工饲喂3次（9：00、15：00、20：00）。温度设定为32~35 ℃，第1周起每2 d下降1 ℃；第3周起温度24~26 ℃，湿度控制60％~70％。试验日粮为颗粒料，购自洛阳六和饲料有限责任公司。基础日粮组成及营养水平见表1。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.12.008.T001表1基础日粮组成及营养水平Tab.1Composition and nutrient levels of the basal diet项目1~21日龄22~42日龄原料组成/%玉米57.3061.50豆粕37.8033.22豆油1.902.50石粉1.650.30磷酸氢钙0.441.58L-赖氨酸0.080.10DL-蛋氨酸0.190.36食盐0.300.0250％氯化胆碱0.100.20维生素预混料0.020.10微量元素预混料0.200.10植酸酶0.020.02合计100.00100.00营养水平代谢能/(MJ/kg)12.5712.99粗蛋白质/%21.5020.05钙/%1.020.91有效磷/%0.460.41赖氨酸/%1.151.00蛋氨酸/%0.520.42蛋氨酸+半胱氨酸/%0.850.77注 ：1.维生素预混料为每千克日粮提供：VA 12 000 IU、VD3 2 000 IU、VE 20.75 mg、VK3 2.65 mg、VB1 2 mg、VB2 5 mg、VB6 2 mg、VB12 0.025 mg、生物素0.032 5 mg、叶酸1.25 mg、D-泛酸12 mg、烟酸50 mg。2.微量元素预混料为每千克日粮提供：锰100 mg、碘0.35 mg、硒0.15 mg、锌75 mg、铜8 mg、铁80 mg、钴0.2 mg。3.代谢能和有效磷为计算值，其余为实测值。1.3引物设计根据NCBI库中收录的IGF1 mRNA序列设计基因特异性引物，由生工生物工程（上海）股份有限公司合成引物，引物信息见表2。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.12.008.T002表2引物序列信息Tab.2Primer sequence information基因序列（5'→3'）片段长度/bp退火温度/℃GenBank登录号IGF-1-FGTATGTGGAGACAGAGGCTTC20060NM_001004384IGF-1-RTTTGGCATATCAGTGTGGCGCβ-actin-FCCAGCCATCTTTCTTGGGTA16060NM_205518.1β-actin-RCTTCTGCATCCTGTCAGCAA1.4测定指标及方法1.4.1生长性能分别称肉鸡的试验初重、试验末重，计算平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。ADG=（末重-初重）/试验天数（1）ADFI=（加料量-余料量）/试验天数（2）F/G=ADFI/ADG（3）1.4.2体尺指标第6周龄末每个重复随机抽取5只鸡，分别测定鸡体斜长、龙骨长、胸宽、胫长。1.4.3IGF-1基因相对表达量采用TRIzol法提取爱拔益加肉鸡胸肌组织的RNA，使用反转录试剂盒将提取的RNA反转录为cDNA。PCR反应体系20 μL：cDNA 1 μL、TB Green Premix Ex TaqⅡ(2×) 10 μL、IGF1上下游引物（10 μmol/L）各0.7 μL、RNase-free ddH2O 7.6 μL。PCR扩增条件为95 ℃预变性30 s；95 ℃变性5 s，60 ℃退火30 s，循环40次；95 ℃延伸10 s，扩增结束后分析熔解曲线。采用2-△△Ct法计算IGF-1基因相对表达量，使用Prism 8.0软件制图。1.5数据统计与分析试验数据采用Excel进行整理，采用SPSS 26.0软件进行单因素方差分析。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同添加水平的甘草多糖对肉鸡生长性能的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，各试验组末重和ADG均显著提高（P0.05），各试验组的F/G显著降低（P0.05）。组4的ADFI显著低于对照组（P0.05）。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.12.008.T003表3不同添加水平的甘草多糖对肉鸡生长性能的影响Tab.3Effect of different levels of Glycyrrhiza polysaccharide on growth performance of broilers组别初重/g末重/gADFI/gADG/gF/G对照组39.51±0.272 789.67±44.91c118.76±1.98c65.48±1.07c1.81±0.02a组238.33±0.482 910.89±7.66b119.63±0.36c68.39±0.19b1.75±0.01c组338.89±0.353 060.78±17.08a123.83±0.74b71.95±0.40a1.72±0.03d组437.92±0.473 131.05±16.46a128.68±0.79a73.65±0.39a1.75±0.02b注 ：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），无字母或相同字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2不同添加水平的甘草多糖对肉鸡体尺的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，组3、组4的胸宽显著升高（P0.05）；各试验组的体斜长均显著升高（P0.05），随着添加量增加有上升趋势，但组间差异不显著（P0.05）。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.12.008.T004表4不同添加水平的甘草多糖对肉鸡体尺的影响Tab.4Effect of different levels of Glycyrrhiza polysaccharide on body size of broilers组别胫长/mm胸宽/mm体斜长/cm胸骨长/cm对照组102.66±0.6896.82±0.46b22.40±0.17b17.92±0.12组2103.50±0.5298.37±0.62ab22.84±0.16a17.93±0.09组3104.07±0.6499.25±0.52a22.96±0.16a18.18±0.11组4104.47±0.6699.77±0.74a23.08±0.13a18.23±0.142.3不同添加水平的甘草多糖对肉鸡IGF-1基因相对表达量的影响（见图1）由图1可知，组3、组4肉鸡IGF-1基因的相对表达量均极显著高于对照组（P0.01）。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.12.008.F001图1不同添加水平的甘草多糖对肉鸡IGF-1基因相对表达量的影响Fig.1Effect of different levels of Glycyrrhiza polysaccharide on IGF-1 gene relative expression of broilers注 ： 与对照组相比，*表示差异显著（P0.05），**表示差异极显著（P0.01）。3讨论3.1不同添加水平的甘草多糖对肉鸡生长性能的影响植物多糖可提高动物的生长性能，改善健康状况[1]。本试验中，与对照组相比，各试验组肉鸡ADG均显著提高（P0.05），组3肉鸡的F/G显著降低（P0.05）。研究表明，枸杞多糖和大蒜多糖可显著提高肉鸡的平均日增重（P0.05），日采食量显著降低（P0.05）[11-12]。日粮中添加不同浓度的甘草多糖显著提高22~42日龄时肉鸡的平均日增重[13]。饲喂甘草多糖可降低平均日采食量，提高小鼠的平均日增重[14]。衣蕾等[10]研究发现，肌肉注射4 g/L甘草多糖能够有效提高蛋鸡的生长性能。董永军等[15]研究发现，饲喂不同浓度的甘草多糖可提高肉仔鸡体重。3.2不同添加水平的甘草多糖对肉鸡体尺的影响体尺性状是衡量动物机体是否健康的指标[16]。本试验中，饲喂添加甘草多糖的试验组肉鸡与对照组的胫长、胸骨长均无显著差异（P0.05），但随着添加甘草多糖浓度增加，肉鸡的胫长、胸骨长均有提高。与对照组相比，各试验组胸宽均有增加，其中甘草多糖添加量为600、900 mg/kg的试验组均显著升高（P0.05）；各试验组的体斜长均显著高于对照组（P0.05），且随着添加量增加有上升趋势，但组间差异不显著（P0.05）。曹向阳[17]研究发现，在日粮中添加松针粉可显著提高固始公鸡的胫围（P0.05）。代航等[18]研究发现，在日粮中添加稻壳粉对雏火鸡的各项体尺指标均无显著差异（P0.05），表明不同动物对不同日粮添加剂的耐受力不同。3.3不同添加水平的甘草多糖对肉鸡IGF-1基因相对表达量的影响IGF-1是一种生物活性肽物质[19]，能够影响动物机体生长发育以及营养物质的代谢活性[20]。动物IGF-1的合成与日粮的营养水平密切相关[21]。万秋蓓等[22]研究表明，动物的生长发育水平与IGF-l相关度极高。吕建敏等[23]研究表明，IGF-1基因的相对表达量与日粮粗蛋白水平密切相关。本试验中，各水平甘草多糖添加组肉鸡IGF-1基因的相对表达量均有所提高，组3和组4肉鸡IGF-1基因的相对表达量均极显著高于对照组（P0.01）。由此可见，日粮中添加甘草多糖对可提高肉鸡生长相关基因IGF-1的相对表达量。4结论本试验结果表明，日粮中添加甘草多糖可以改善肉鸡生长性能、体尺以及IGF-1基因的相对表达量。