梅公散以乌梅、蒲公英、金银花、连翘为主，并配以其他辅药、矫正药组合而成，具有较强的体外抗菌作用。为进一步系统研究该中药复方的抗炎作用及其抗炎作用机制，本试验展开针对梅公散对小鼠血液和组织中PGE2含量影响的研究，旨在为梅公散复方的临床药效评价奠定基础。1材料与方法1.1试验动物纯昆明种小鼠96只，体重（20±2）g，雌、雄兼用，购自内蒙古大学实验动物中心。1.2试验材料本实验室加工的梅公散，由乌梅、蒲公英、金银花、连翘等中药煎制而成；地塞米松磷酸钠注射液（批号为08051211）购自天津药业焦作有限公司。1.3试剂与仪器小鼠SE-selectin测定试剂盒，购自江苏酶标生物科技有限公司；二甲苯、甲醛，均购自天津市风船化学试剂科技有限公司；蛋清。Acculab ACL电子天平，购自德国赛多科斯股份公司；低速离心机，购自安徽中科中佳科学仪器有限公司；三用恒温水箱，购自金坛市杰瑞尔电器有限公司；高压灭菌锅，购自日本HIRAYAMA公司；紫外可见分光光度计，购自北京普析通用仪器有限责任公司；风热高温烘干箱，购自上海福玛实验设备有限公司；多功能酶标仪，购自美国伯腾仪器有限公司。1.4试验设计采用二甲苯致炎法[1-5]，将96只小鼠随机分为4组，每组2个重复，每个重复12只；每组中选择一个重复的小鼠应用于测定耳廓、足跖肿胀，另一重复小鼠做其他试验用。连续灌喂4 d，1次/d。分组及给药方案见表1。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.12.001.T001表1试验分组及给药方案Tab.1Experimental groups and administration scheme组别给药方案阴性对照组每只小鼠按20 mL/(kg·bw)剂量口服蒸馏水阳性对照组每只小鼠按5 mg/(kg·bw)剂量皮下注射地塞米松磷酸钠注射液高剂量组每只小鼠按20 g/(kg·bw)剂量口服梅公散灌注剂高剂量组每只小鼠按10 g/(kg·bw)剂量口服梅公散灌注剂1.5测定指标及方法1.5.1耳廓肿胀第4 d给药30 min后，将致炎剂二甲苯按0.02 mL/10 g两面涂布于每只小鼠左耳前后，右耳作为对照。30 min后脱颈椎处死小鼠，沿耳廓线剪下两耳，使用内径为7 mm的打孔器以对称位置取小鼠左右耳片称重，以每只小鼠的左耳片重减去右耳片重，即为左耳肿胀重量。1.5.2足跖肿胀采用小鼠足跖肿胀法[1-3]。第4 d给药30 min后，于每只小鼠左后足跖部皮下注射10%的蛋清0.01 mL，右后足跖部皮下注射2.5%甲醛溶液0.01 mL。分别于致炎前及致炎后0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 h测量左右足厚度并记录，4 h后脱颈椎处死小鼠，踝关节处剪取炎症后足称重。计算左右足跖肿胀率。肿胀率=（致炎后足跖容积-致炎前足跖容积）/致炎前足跖容积×100%（1）1.5.3血清中PGE2含量第4 d给药30 min后，将致炎剂二甲苯按0.02 mL/10 g的给药剂量涂布于每只小鼠左耳前后，右耳作为对照，30 min后分别从小鼠左右眼眶取血，并脱颈椎处死小鼠。小鼠血液3 000 r/min离心15 min，取上清液，参照文献[3]和文献[6]竞争性ELISA方法测定样品中PGE2含量。1.5.4肿胀足中PGE2含量第4 d给药30 min后，每只小鼠后肢右足跖皮下注射1%甲醛0.01 mL致炎，左趾注射10%的蛋清0.01 mL。3 h后脱颈椎处死小鼠，剪下致炎后肢，称重剪碎后置于6 mL生理盐水中浸泡1 h，超声提取0.5 h，浸泡液3 000 r/min离心15 min，取上清液0.3 mL于试管内，加入0.5 mol/L的KOH-甲醇溶液2 mL，50 ℃水浴中异构化20 min，加甲醇稀释至10 mL，参照文献[3]和文献[6]竞争性ELISA方法测定小鼠肿胀足中PGE2的含量。1.6数据统计与分析数据采用SPSS 19.0软件进行单因素方差分析（One-way ANOVA），采用LSD法进行多重比较.结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1梅公散对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响（见表2）由表2可知，与阴性对照组相比，高剂量组及阳性对照组均极显著抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀（P0.01），低剂量组显著抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀（P0.05）。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.12.001.T002表2梅公散对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响Tab.2Effect of Meigong powder on xylene-induced auricle swelling in mice组别耳肿胀度阴性对照组1.55±0.12a阳性对照组0.34±0.02c高剂量组0.58±0.05c低剂量组0.96±0.09b注 ：同列数据肩标相邻字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05），相间字母表示差异极显著（P0.01）；下表同。mg2.2梅公散对蛋清和甲醛所致小鼠足趾肿胀率的影响（见表3、表4）由表3可知，与阴性对照组相比，致炎2 h后，给予高剂量的梅公散可显著抑制蛋清所致小鼠足趾肿胀（P0.05）；而在致炎4 h后，给予高、低剂量的梅公散均可极显著抑制蛋清所致小鼠足趾肿胀（P0.01）。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.12.001.T003表3梅公散对蛋清所致小鼠足趾肿胀率的影响Tab.3Effect of Meigong powder on toe swelling rate induced by egg white in mice组别致炎时间/h0.51.02.03.04.0阴性对照组41.92±4.1347.53±4.2139.98±3.31a38.53±3.2128.51±2.23a阳性对照组33.54±3.1124.82±2.4325.21±2.12b16.32±1.1228.43±2.22a高剂量组33.12±3.1239.42±3.2325.44±2.24b9.74±0.639.95±0.75c低剂量组41.23±4.2144.23±4.1139.52±3.23a19.22±1.4214.53±1.33c%由表4可知，与阴性对照组相比，致炎2 h后，给予低剂量的梅公散可极显著抑制甲醛所致小鼠足趾肿胀（P0.01），给予高剂量的梅公散可显著抑制甲醛所致小鼠足趾肿胀（P0.05）；致炎4 h后，低剂量梅公散可极显著抑制甲醇所致小鼠足趾肿胀（P0.01），高剂量梅公散可显著抑制甲醇所致小鼠足趾肿胀（P0.05）。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.12.001.T004表4梅公散对甲醛所致小鼠足趾肿胀率的影响Tab.4Effect of Meigong powder on toe swelling rate induced by formaldehyde in mice组别致炎时间/h0.51.02.03.04.0阴性对照组70.12±7.2579.81±7.3377.98±7.43a57.73±5.3355.21±5.36a阳性对照组65.94±6.2774.32±7.4263.27±6.55b53.31±5.2852.14±5.36b高剂量组66.22±6.6474.92±7.4363.11±6.51b48.71±4.3451.97±5.44b低剂量组69.31±6.4675.23±4.1159.33±5.45c58.33±5.3658.12±5.44c%2.3梅公散对二甲苯致炎模型小鼠血清中PGE2含量的影响（见表5）由表5可知，与阴性对照组相比较，高剂量的梅公散可显著降低小鼠血清中PGE2含量（P0.05），而低剂量的梅公散则对血清中PGE2含量则无显著作用（P0.05）。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.12.001.T005表5梅公散对二甲苯致炎模型小鼠血清中PGE2含量的影响Tab.5Effect of Meigong powder on the content of PGE2 in serum of mice with xylene-induced inflammation组别PGE2含量阴性对照组0.81±0.08a阳性对照组0.52±0.05b高剂量组0.39±0.03b低剂量组0.65±0.06aµg/mL2.4梅公散对甲醛和蛋清所致小鼠肿胀足中PGE2含量的影响（见表6、表7）由表6、表7可知，与阴性对照组相比较，高剂量的梅公散可显著降低甲醛和蛋清所致小鼠肿胀足中PGE2的含量（P0.05），而低剂量的梅公散则无显著作用（P0.05）。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.12.001.T006表6梅公散对甲醛所致小鼠肿胀足中PGE2含量的影响Tab.6Effect of Meigong powder on PGE2 content in mice swollen feet induced by formaldehyde组别PGE2含量阴性对照组15.98±1.43a阳性对照组11.68±1.33b高剂量组12.93±1.22b低剂量组15.21±1.23aµg/mLXX.XXXX/j.issn.1672-9692.2021.12.001.T007表7梅公散对蛋清所致小鼠肿胀足中PGE2含量的影响Tab.7Effect of Meigong powder on PGE2 content in mice swollen feet induced by egg white组别PGE2含量阴性对照组14.99±1.52a阳性对照组11.63±1.14b高剂量组10.96±1.03b低剂量组14.11±1.47aµg/mL3讨论炎症反应严重损害动物机体，甚至导致其死亡[7]。PGE2是一种炎症介质，当动物机体受到某些致炎因素影响时，PGE2大量释放，使血管扩张、通透性升高，引起组织肿胀，产生炎症反应，因此，抑制PGE2合成可减轻炎症反应[8-10]。研究发现，PGE2在急性炎症后期时起极为重要的作用，且作用时间较持久[11]。临床上常应用抗炎药物治疗动物机体的炎症反应，抗炎药物以西药为主，分为甾体类和非甾体类，虽然抗炎效果非常显著，但长期使用化学药物可能会导致中枢神经系统、心血管系统及肝脏、肾脏的损伤，产生毒性反应。有研究表明，许多中药及其有效成分特具有较强的抗炎作用，以副作用小、作用靶点多、作用通路多、高效低毒等优点广泛应用于临床治疗[12-14]。本研究结果发现，在小鼠耳廓肿胀炎症模型中，高、低剂量的梅公散均可抑制小鼠耳廓肿胀度，且高剂量梅公散对小鼠耳廓肿胀度的抑制效果与地塞米松组相当。张浩等[5]研究发现，荆门上清丸高、中剂量组可抑制二甲苯致的小鼠耳廓肿胀。陈美安等[4]研究发现，兰香草各提取部位高剂量组及乙酸乙酯部位中、高剂量组均可显著抑制小鼠耳廓肿胀。本研究虽与上述研究的药物不同，但高剂量组可抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀，说明梅公散、荆门上清丸、兰香草对急性炎症均存在一定抑制作用，且具有剂量依赖性。蛋清和甲醛所致小鼠足趾肿胀试验中，其足趾肿胀度随时间延长均产生一定变化，并在致炎1 h后达到峰值；随着时间延长，肿胀度逐渐降低，致炎4 h后高剂量梅公散可显著抑制小鼠足趾肿胀，且均高于阳性对照组，表明梅公散具有较好的抗炎作用。本试验中，高剂量梅公散可显著降低二甲苯、蛋清、甲醛所致小鼠炎症模型中PGE2含量，低剂量梅公散无明显效果，表明梅公散具有一定的抗炎作用，且存在剂量依赖性。4结论高剂量梅公散可较好地抑制急性炎症，其作用机制可能与抑制炎症介质PGE2的合成有关。该组方结构复杂，抗炎机制是否与其他炎症因子有关仍待进一步探讨。