动物体细胞内的活性氧化应激能力超过内源性抗氧化剂的防御能力时会发生氧化应激反应，打破动物体内氧化还原的稳定状态，使机体不能够维持自身稳态的平衡，引起一系列的生理反应[1]。仔猪在断奶时会发生一系列的应激反应，会加剧仔猪氧化应激反应的程度。仔猪断奶时易出现采食量降低、体重下降、腹泻率升高、肠道功能障碍等问题，直接影响仔猪的生命健康[2-3]。日粮中添加抗生素能够解决仔猪断奶后的应激，但长期使用抗生素会对机体造成伤害。目前，我国已进入饲料“禁抗”时代[4]。因此，寻找合适的替抗产品缓解、治疗仔猪断奶所产生的应激成为目前研究的重点。益生菌具有抗氧化和改善肠道平衡的作用，已经在动物生产中广泛使用[5-6]。植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）是一种可以与有害物菌竞争的益生菌，可以提高宿主的免疫力和机体抵抗力[7-8]。Yang等[9]研究表明，在日粮中添加植物乳杆菌可以提高仔猪的生长性能，降低腹泻率，提高抗病能力。枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）可以提高宿主的免疫力，在消化道中稳定性较高，可以调节胃肠道菌群平衡，是一种耐酸、耐热和耐寒的益生菌[10]。在日粮中添加枯草芽孢杆菌可以提高动物生长性能，改善肉品质[11]。本试验在仔猪日粮中添加植物乳杆菌和枯草芽孢杆菌，研究其对仔猪生长性能和血清生化指标的影响，为益生菌在仔猪生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料枯草芽孢杆菌有效活菌含量≥1.0×1010 CFU/g，植物乳杆菌有效活菌含量≥1.0×1010 CFU/g，均购自赢创德固赛（中国）投资有限公司。1.2试验设计选取120头初始体重（7.99±0.23）kg健康的“长×大”二元杂交断奶仔猪，随机分为4组，每组5个重复，每个重复6头猪。对照组仔猪饲喂基础饲粮，试验组分别在基础饲粮中添加1×106  CFU/g枯草芽孢杆菌（试验A组）、1×106 CFU/g植物乳杆菌（试验B组）、5×105 CFU/g枯草芽孢杆菌+5×105 CFU/g植物乳杆菌（试验C组）。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.21.008.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米58.00消化能/(MJ/kg)15.40豆粕17.50干物质/%88.43小麦5.00粗蛋白/%18.65小麦麸5.00脂肪/%2.71米糠5.00灰分/%5.20DDGS5.00钙/%0.70乳清粉0.50总磷/%0.58预混料4.00注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 8 000 IU、VD3 3 000 IU 、VE 20 IU、VK 32 mg、VB1 14 mg、VB2 3.6 mg、VB5 40 mg、VB6 4 mg、VB12 0.02 mg、Cu 10 mg、Fe 80 mg、Mn 80 mg、Zn 10 mg、I 0.40 mg、Se 0.30 mg。2.营养水平中消化能为计算值，其余均为实测值。1.3饲养管理仔猪分栏饲养，室温24~26 ℃，试验期间仔猪自由采食和饮水，严格按照猪场饲养管理要求饲养。每天观察并记录仔猪的采食、粪便和精神状况。预试期7 d，正式试验期28 d。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能仔猪试验第1 d和最后1 d空腹称重；以重复为单位，每天8：00对仔猪进行饲喂，记录饲喂量和剩料量；每天8：30观察并记录仔猪腹泻情况。试验结束计算各组仔猪平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）、料重比（F/G）和腹泻率（DR）。平均日增重(g/d)=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量(kg/d)=每组总采食量/每组仔猪只数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)腹泻率=［(腹泻仔猪数×腹泻天数)/(总试验仔猪数×试验天数)］×100%(4)1.4.2血清抗氧化指标采用ABTS法测定总抗氧化能力（T-AOC），采用黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性，采用二硫代二硝基苯甲酸法测定谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性，采用紫外分光法测定过氧化氢酶（CAT）活性，采用TAB法测定丙二醛（MDA）含量。检测试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。1.4.3血清生化指标试验最后1 d，仔猪空腹12 h，静脉采血10.0 mL，室温静置20 min，3 500 r/min离心15 min，分离上层血清2.0 mL，-80 ℃保存。检测血清总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、尿素（UREA）、胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）含量及谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）活性。检测试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。1.5数据统计与分析试验数据采用Excel软件整理，采用SPSS 19.0统计软件进行分析，采用LSD法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1植物乳杆菌与枯草芽孢杆菌对仔猪生长性能的影响（见表2）由表2可知，试验C组仔猪的末重显著高于试验A组和试验B组（P0.05），试验C组仔猪平均日增重显著高于其他3组（P0.05），试验C组仔猪料重比显著低于试验A组和对照组（P0.05），试验A组、试验B组、试验C组仔猪腹泻率显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.21.008.T002表2植物乳杆菌与枯草芽孢杆菌对仔猪生长性能的影响组别初重/kg末重/kg平均日采食量/g平均日增重/g料重比腹泻率/%对照组7.98±0.2014.69±0.11ab555.04±4.02239.65±3.20b2.31±0.12a13.30±0.30c试验A组8.01±0.1213.90±0.22b461.12±3.24210.58±3.13b2.19±0.12a10.97±0.27b试验B组7.88±0.1314.38±0.14b466.11±4.23232.14±3.29b2.01±0.12ab10.64±0.29b试验C组7.95±0.1116.93±0.20a525.04±3.98321.34±4.27a1.63±0.12b7.58±0.13a注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2植物乳杆菌与枯草芽孢杆菌对仔猪血清抗氧化指标的影响（见表3）由表3可知，试验C组仔猪血清超氧化物歧化酶活性显著高于其他3组（P0.05），试验B组和试验C组仔猪血清总抗氧化能力显著高于对照组和试验A组（P0.05），试验C组仔猪血清谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶活性显著高于其他3组（P0.05），试验组仔猪血清丙二醛含量均显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.21.008.T003表3植物乳杆菌与枯草芽孢杆菌对仔猪血清抗氧化指标的影响组别超氧化物歧化酶/(U/mL)总抗氧化能力/(U/mL)谷胱甘肽过氧化物酶/(U/mL)过氧化氢酶/(U/mL)丙二醛/(μmol/L)对照组72.01±5.18c7.062±0.48c571.50±8.21c44.26±6.57c4.97±0.11a试验A组80.74±9.53bc8.02±0.34c586.40±5.32c66.08±4.22b4.00±0.29b试验B组89.24±1.21b9.04±0.18b617.08±9.21b69.19±6.19b3.82±0.06b试验C组95.26±2.31a10.11±0.21a650.42±7.25a88.42±7.12a3.42±0.23c2.3植物乳杆菌与枯草芽孢杆菌对仔猪血清生化指标的影响（见表4）由表4可知，试验C组仔猪血清总蛋白含量显著高于其他各组（P0.05）；试验C组和试验B组仔猪血清白蛋白含量显著高于试验A组和对照组（P0.05），试验C组仔猪血清总蛋白和白蛋白含量均显著高于试验B组（P0.05）；试验C组和试验B组仔猪血清谷草转氨酶活性显著高于试验A组和对照组（P0.05）；试验C组仔猪血清谷丙转氨酶活性显著高于其他各组（P0.05）；试验C组仔猪血清碱性磷酸酶活性显著高于其他各组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.21.008.T004表4植物乳杆菌与枯草芽孢杆菌对仔猪血清生化指标的影响组别总蛋白/(g/L)白蛋白/(g/L)总胆固醇/(mmol/L)甘油三酯/(mmol/L)尿素/(mmol/L)谷草转氨酶/(U/L)谷丙转氨酶/(U/L)碱性磷酸酶/(U/L)对照组45.02±0.74c24.00±1.00c1.80±0.170.62±0.102.51±0.3240.02±0.46b21.02±1.99c120.08±3.64c试验A组45.22±0.94c24.20±1.30c1.84±0.170.66±0.102.39±0.4540.32±0.46b22.02±1.99c122.08±3.64c试验B组50.09±0.89b30.53±1.06b1.81±0.160.62±0.072.28±0.4145.39±0.72a28.42±0.97b131.69±1.48b试验C组56.40±0.79a35.60±0.69a1.81±0.100.60±0.162.04±0.2445.05±0.85a31.31±1.33a143.68±1.51a3讨论3.1植物乳杆菌与枯草芽孢杆菌对仔猪生长性能的影响平均日增重和料重比可以反映仔猪生长性能和消化性能[12-13]。王煜琦等[14]将植物乳杆菌与枯草芽孢杆菌混合添加到育肥猪的日粮中，结果表明，添加益生菌可以提高育肥猪的生长性能、营养物质表观消化率和免疫能力。本试验中，同时添加两种益生菌可以明显提高仔猪平均日增重，降低料重比和腹泻率，说明添加益生菌能够更好地促进仔猪的生长发育，降低腹泻率，提高养殖经济效益，与张飞等[15]研究结果一致。仔猪因为机体各方面机能发育未健全、免疫能力较差，极易发生腹泻[16]。郭丹丹等[17]等在断奶仔猪日粮中添加枯草芽孢杆菌，结果表明，枯草芽孢杆菌能够明显改善断奶仔猪生长性能，降低腹泻率，提高免疫力。本试验中，添加益生菌组仔猪的腹泻率明显低于对照组，与陈娟等[18]研究结果一致。3.2植物乳杆菌与枯草芽孢杆菌对仔猪血清抗氧化指标的影响断奶会导致幼龄畜禽机体自由基含量提高，脂质过氧化，蛋白质和DNA的损伤，造成幼龄畜禽生长性能受阻，机体免疫力下降，腹泻等疾病更容易发生[19]。SOD、GSH-Px和CAT是机体抗氧化防御系统重要的3种酶，可维持动物机体自由基代谢平衡[20]。GSH-Px是抗氧化酶，在正常代谢条件下有助于控制过氧化氢和脂质过氧化物的水平。T-AOC反映动物机体的抗氧化能力[21]。MDA是细胞内多不饱和脂肪酸过氧化的最终产物之一，被认为是氧化应激的标志物，间接表示细胞的损伤程度[22]。本试验中，试验C组仔猪SOD活性、T-AOC、GSH-Px活性和CAT活性明显高于对照组，但MDA含量明显降低，与王强等[23]在仔猪日粮中添加植物乳杆菌得出的结果一致。3.3植物乳杆菌与枯草芽孢杆菌对仔猪血清生化指标的影响ALB含量反映肝脏蛋白质代谢水平[24]。仔猪血清中的TP含量反映仔猪的营养水平和免疫能力[25]。本试验中，血清各项指标均在正常数值范围内，试验C组仔猪TP和ALB含量明显高于对照组，说明在日粮中添加益生菌可以提高仔猪的免疫能力。AST和ALT作为肝脏组织细胞中主要的氨基转移酶，直接影响幼龄畜禽体内蛋白质代谢水平[26]。ALT和ALP活性可以反映幼龄畜禽体内脂类代谢水平，其中ALP活性可以反映动物机体的生产性能[27]。本试验中，添加两种益生菌组仔猪AST、ALT、ALP活性均显著提高，与王晓丹等[28]研究结果一致。4结论添加植物乳杆菌与枯草芽孢杆菌可以明显提高仔猪生长性能，改善血清生化指标和抗氧化能力，且二者同时添加效果更好。