家禽养殖业中，高密度养殖产生的有害气体严重制约养鸡业的健康发展。鸡粪产生的有害气体能够污染舍内空气，降低家禽的生产性能，传播疾病，导致养殖场区及附近的空气质量下降，对人体健康构成威胁。研究发现，养殖环境对畜禽生产力的贡献率可达30%~40%[1-2]。NH3和H2S是评价鸡舍污染程度的重要指标[3]。鸡舍氨气浓度应控制在15 mg/m3以下，硫化氢浓度也应低于10 mg/m3[4]。实际生产中多采取通风、清除粪尿和喷洒吸附剂等方式降低鸡舍内臭味气体。喷洒吸附剂方法成本较高、不便于规模化养殖、效果不理想；通风致使圈舍温度急剧下降，容易影响家禽的生产性能[5]。研究发现，家禽日粮中添加微生物制剂能够有效降低圈舍有害气体的浓度[6-10]。本试验以酵母菌、枯草芽孢杆菌等合理搭配组方，旨在提供1种能够降低畜禽圈舍有害气体的饲料添加剂，为其推广应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料40日龄三黄肉公鸡2 400只，购自平凉市崆峒区智鑫养鸡场。酵母菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌、乳酸片球菌和粪肠球菌，均购自济南金雨源生物技术有限公司，有效活菌数≥9×109 CFU/g。1.2试验日粮参照农业农村部NY/T 33—2004《鸡饲养标准》，配制日粮，制成粉料。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.21.011.T001表1基础日粮组成及营养水平（风干基础）原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米62.38消化能/(MJ/kg)11.86麸皮（44.5%）21.20粗蛋白/%15.39棉籽粕3.84粗纤维/%4.56豆饼9.07钙/%0.84豆粉1.35总磷/%0.87磷酸氢钙1.32有效磷/%0.61蛋氨酸（98%）0.06赖氨酸/%0.68赖氨酸（98%）0.06蛋氨酸/%0.55多种维生素0.02胱氨酸/%0.33微量元素0.35食盐0.35注：1.多种维生素和微量元素购自安牧渔生物有限公司。2.营养水平均为计算值。1.3试验设计试验于甘肃省畜牧兽医研究所半封闭试验鸡舍进行，选用三层层叠式肉鸡笼养殖。根据交叉分组设计，将2 400只三黄肉公鸡随机分成30组（25个试验组和5个对照组），每组4个重复，每个重复20只鸡。各组肉鸡日龄、体重、健康状况无显著差别。预试期7 d，正式试验期30 d。饲养期间试验鸡自由采食和饮水，每3 d清扫一次鸡舍粪便，常规疫苗接种。对照组肉鸡饲喂基础日粮，试验组以酵母菌和枯草芽孢杆菌为基础菌，依次配伍为两组合、三组合、四组合和五组合，按照1 000 mg/kg（0.1%）剂量和不同配比添加到试验鸡基础日粮中开展饲喂试验，筛选可降低鸡舍有害气体浓度的微生物菌剂组合。根据初筛结果，在同一饲养管理水平下，以试验肉鸡粪便产生有害气体浓度为测定指标，确定复合微生物菌剂的组成和配比。1.4测定指标及方法试验第10、20、30 d，使用大气采样仪在离地1 m处分别采集每组鸡舍内气体；采用次氯酸钠-水杨酸分光光度法（GB/T 14679—1993）测定NH3浓度；采用气相色谱法（GB/T 14678—1993）测定H2S浓度。1.5数据统计与分析数据采用SPSS 22.0软件中的One-way ANOVA进行单因素方差分析，采用Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1两组合微生物菌剂对鸡舍中NH3和H2S浓度的影响（见表2）由表2可知，酵母菌+枯草芽孢杆菌组合的鸡舍中NH3浓度在试验第10、20和30 d的NH3浓度均显著低于对照组（P0.05)，酵母菌+枯草芽孢杆菌（1∶2）和（2∶1）组合第20和30 d的NH3浓度显著高于（1∶1）组合（P0.05）。酵母菌+枯草芽孢杆菌组合的鸡舍内H2S浓度在试验第20和30 d显著低于对照组（P0.05），酵母菌+枯草芽孢杆菌（1∶2）和（2∶1）组合H2S浓度在试验第20和30 d均显著高于（1∶1）组合（P0.05）。因此，酵母菌+枯草芽孢杆菌（1∶1）组合可有效降低鸡舍中NH3和H2S浓度。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.21.011.T002表2两组合微生物菌剂对鸡舍中NH3和H2S浓度的影响组别配比NH3浓度H2S浓度第10 d第20 d第30 d第10 d第20 d第30 d酵母菌+枯草芽孢杆菌1∶16.12±0.11b7.25±0.62c9.32±0.20c5.10±0.32b5.72±0.46c6.97±0.24c1∶26.34±0.13b8.61±0.51b10.45±0.16b5.63±0.41b6.25±0.21b8.16±0.28b2∶16.50±0.08b8.83±0.22b10.80±0.28b5.95±0.39a6.63±0.19b8.57±0.35b对照组—7.04±0.21a9.50±0.47a12.33±0.41a6.18±0.54a7.84±0.36a10.12±0.71a注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。mg/m32.2三组合微生物菌剂对鸡舍中NH3和H2S浓度的影响（见表3）在酵母菌+枯草芽孢杆菌（1∶1）组合的基础上，按照不同比例分别添加双歧杆菌、乳酸片球菌和粪肠球菌进行配伍。由表3可知，鸡舍中NH3浓度在试验后不同时间段，酵母菌+枯草芽孢杆菌+粪肠球菌组合与对照组间无显著性差异（P0.05），但均显著高于酵母菌+枯草芽孢杆菌+双歧杆菌和酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌组合（P0.05）。酵母菌+枯草芽孢杆菌+双歧杆菌与酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌（1∶1∶2）和（2∶2∶1）组合间差异不显著（P0.05），但均显著高于酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌（1∶1∶1）组合（P0.05）。鸡舍中H2S浓度在试验第10 d，酵母菌+枯草芽孢杆菌+粪肠球菌组合与对照组间无显著差异（P0.05），但均显著高于酵母菌+枯草芽孢杆菌+双歧杆菌和酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌组合（P0.05）。酵母菌+枯草芽孢杆菌+双歧杆菌与酵酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌（2∶2∶1）组合间差异不显著（P0.05），但均显著高于酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌（1∶1∶1）和（1∶1∶2）组合（P0.05）。试验第20和30 d，不同组合鸡舍中H2S浓度与NH3浓度变化趋势相近，以酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌（1∶1∶1）组合最低。因此，酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌1∶1∶1组合对鸡舍除臭效果最好。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.21.011.T003表3三组合微生物菌剂对鸡舍中NH3和H2S浓度的影响组别配比NH3浓度H2S浓度第10 d第20 d第30 d第10 d第20 d第30d酵母菌+枯草芽孢杆菌+双歧杆菌1∶1∶15.33±0.26b6.18±0.23b9.15±0.27b5.50±0.23b6.92±0.50b8.72±0.13b1∶1∶25.40±0.43b6.30±0.17b9.41±0.15b5.62±0.10b7.05±0.43b9.30±0.22b2∶2∶15.68±0.34b6.32±0.15b9.33±0.30b5.33±0.17b6.76±0.25b8.64±0.26b酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌1∶1∶14.93±0.40c5.47±0.31c7.12±0.21c4.60±0.31c5.63±0.30c7.53±0.41c1∶1∶25.52±0.18b6.85±0.24b9.10±0.53b4.93±0.24c6.50±0.28b8.82±0.47b2∶2∶15.36±0.22b6.40±0.12b8.81±0.26b5.27±0.20b6.79±0.17b9.05±0.27b酵母菌+枯草芽孢杆菌+粪肠球菌1∶1∶16.37±0.21a7.91±0.18a10.45±0.38a6.07±0.13a8.10±0.31a10.64±0.32a1∶1∶26.15±0.30a8.23±0.30a10.86±0.41a6.10±0.27a8.01±0.35a10.80±0.20a2∶2∶16.54±0.37a8.42±0.35a11.14±0.50a6.15±0.35a8.26±0.29a10.75±0.40a对照组—6.62±0.45a8.74±0.26a11.25±0.73a6.31±0.22a8.42±0.45a11.03±0.36amg/m32.3四组合微生物菌剂对鸡舍中NH3和H2S浓度的影响（见表4）在酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌（1∶1∶1）组合的基础上，按照不同比例分别添加双歧杆菌和粪肠球菌进行配伍。由表4可知，试验后不同时间段鸡舍中NH3和H2S浓度，酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+粪肠球菌（1∶1∶1∶2）和（2∶2∶2∶1）组合与对照组间无显著性差异（P0.05），但均显著高于其他4组（P0.05）。酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌（1∶1∶1∶1）和（1∶1∶1∶2）组合与酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+粪肠球菌（1∶1∶1∶1）组合间均显著高于酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌（2∶2∶2∶1）组合（P0.05）。试验后第20和30 d鸡舍中H2S浓度，酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+粪肠球菌（1∶1∶1∶2）和（2∶2∶2∶1）组合与对照组间无显著差异（P0.05），但均显著高于其他5组（P0.05）。酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌（1∶1∶1∶1）和（1∶1∶1∶2）组合显著高于酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌（2∶2∶2∶1）和酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+粪肠球菌（1∶1∶1∶1）组合（P＜0.05）。因此，酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌（2∶2∶2∶1）组合对鸡舍除臭效果最好。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.21.011.T004表4四组合微生物菌剂对鸡舍中NH3和H2S浓度的影响组别配比NH3浓度H2S浓度第10 d第20 d第30 d第10 d第20 d第30 d酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌1∶1∶1∶16.21±0.30b7.28±0.30b8.78±0.35b6.53±0.11b7.80±0.35b9.80±0.22b1∶1∶1∶26.10±0.22b7.35±0.24b8.50±0.23b6.70±0.17b7.62±0.20b9.57±0.34b2∶2∶2∶15.54±0.18c6.23±0.17c7.52±0.22c5.94±0.24c6.35±0.29c7.83±0.25c酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+粪肠球菌1∶1∶1∶16.03±0.24b6.90±0.50b8.34±0.18b6.41±0.15b6.80±0.42c8.10±0.31c1∶1∶1∶26.76±0.19a8.04±0.36a10.36±0.27a7.30±0.30a8.80±0.34a10.28±0.32a2∶2∶2∶16.87±0.42a8.20±0.28a10.70±0.31a7.25±0.26a8.74±0.50a10.40±0.21a对照组—7.10±0.31a8.62±0.22a10.74±0.45a7.43±0.33a9.03±0.41a10.56±0.27amg/m32.4五组合微生物菌剂对鸡舍中NH3和H2S浓度的影响（见表5）在酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌（2∶2∶2∶1）组合的基础上，按照不同比例添加粪肠球菌进行配伍。由表5可知，试验后不同时间段，鸡舍中NH3与H2S浓度，酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌+粪肠球菌（4∶4∶4∶2∶1）组合与对照组间差异不显著（P0.05），但均显著高于酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌+粪肠球菌（2∶2∶2∶1∶1）和（2∶2∶2∶1∶2）组合（P0.05）。除试验后第10 d鸡粪中H2S浓度外，其他时间段酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌+粪肠球菌（2∶2∶2∶1∶1）组合显著高于（2∶2∶2∶1∶2）组合（P0.05）。因此，酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌+粪肠球菌（2∶2∶2∶1∶2）组合对鸡舍除臭效果最好。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.21.011.T005表5五组合微生物菌剂对鸡舍中NH3和H2S浓度的影响组别配比NH3浓度H2S浓度第10 d第20 d第30 d第10 d第20 d第30 d酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌+粪肠球菌2∶2∶2∶1∶16.54±0.15b7.64±0.30b8.65±0.27b6.43±0.20b7.45±0.18b9.16±0.24b2∶2∶2∶1∶25.31±0.28c6.52±0.23c7.83±0.30c6.28±0.17b6.88±0.31c8.75±0.31c4∶4∶4∶2∶17.06±0.24a8.37±0.32a9.47±0.29a7.20±0.32a8.29±0.25a10.34±0.32a对照组—7.68±0.31a8.50±0.28a9.82±0.35a7.25±0.22a8.61±0.31a10.50±0.27amg/m32.5复合微生物菌剂对鸡粪鸡舍中NH3和H2S浓度的影响（见表6）由表6可知，试验后不同时间段鸡舍中NH3浓度，试验组均显著低于对照组（P0.05）。酵母菌+枯草芽孢杆菌（1∶1）、酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌（1∶1∶1）和酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌+粪肠球菌（2∶2∶2∶1∶2）均显著高于酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌（2∶2∶2∶1）组合（P0.05）。试验第10、20 d鸡舍中H2S浓度，试验组均显著低于对照组（P0.05）。酵母菌+枯草芽孢杆菌（1∶1）和酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌+粪肠球菌（2∶2∶2∶1∶2）组合均显著高于酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌（1∶1∶1）和酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌（2∶2∶2∶1）组合（P0.05）。酵母菌+枯草芽孢杆菌（1∶1）、酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌（1∶1∶1）和酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌+粪肠球菌（2∶2∶2∶1∶2）组合间均显著高于酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌（2∶2∶2∶1）组合（P0.05）。因此，酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌（2∶2∶2∶1）组合对鸡舍除臭效果最好。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.21.011.T006表6复合微生物菌剂对鸡舍中NH3和H2S浓度的影响组别配比NH3浓度H2S浓度第10 d第20 d第30 d第10 d第20 d第30 d酵母菌+枯草芽孢杆菌1∶16.40±0.30b7.61±0.24b8.80±0.26b5.83±0.19b6.70±0.18b9.03±0.20b酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌1∶1∶16.21±0.50b7.09±0.41b8.23±0.32b5.28±0.30c5.97±0.24c8.75±0.23b酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌2∶2∶2∶15.72±0.32c6.38±0.22c7.16±0.31c4.90±0.11c5.63±0.16c7.08±0.18c酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌+粪肠球菌2∶2∶2∶1∶26.33±0.27b7.40±0.30b8.67±0.42b5.73±0.28b6.85±0.35b9.12±0.20b对照组—7.45±0.72a8.12±0.48a9.97±0.55a6.84±0.23a7.51±0.32a10.14±0.39 amg/m33讨论微生物菌剂是由畜禽体内正常附着的微生物以及生长因子经过生物发酵工艺制成的，具有调节保持肠道微生物平衡的作用，是抑制动物体内致病菌增殖以及加强动物本身免疫功能的一类微生物制剂，包含益生元、合生元和益生菌3类。微生物菌剂按照产品类别，可划分为乳酸菌类、芽孢杆菌类、酵母类、霉菌类和混合制剂。在养殖业中应用饲用微生物菌剂已成为目前发展的趋势。家禽作为单胃动物，消化道内生存的微生物种类繁多，关系错综复杂，其作用机理还未完全解析，但业内普遍接受的观点是：饲用微生物菌剂进入家禽消化道后，在胃液酸性作用环境下，积极参与或构建肠道动态平衡状态，从而维持机体生长、消化和免疫等活动。本研究选用的酵母菌、枯草芽孢杆菌、双歧杆菌、乳酸片球菌和粪肠球菌为益生菌种属。其中，乳酸片球菌和双歧杆菌属乳酸菌类；枯草芽孢杆菌属芽孢杆菌类；酵母菌属酵母类；粪肠球菌属肠球菌类。研究表明，饲用益生菌可以调整畜禽肠道微生物平衡，提高饲料转化率，能够有效降低鸡粪中NH3和H2S的释放量[11-17]。本试验中，酵母菌+枯草芽孢杆菌（1∶1）、酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌（1∶1∶1）、酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌（2∶2∶2∶1）和酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌+粪肠球菌（2∶2∶2∶1∶2）组合可以有效降低鸡舍中NH3和H2S浓度，且酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌（2∶2∶2∶1）组合效果最为明显。Hossain等[18]报道，在肉鸡日粮中添加0.1%复合益生菌（枯草芽孢杆菌、丁酸梭菌、嗜酸乳酸杆菌等），能够明显降低粪便中NH3和H2S浓度。朱复跃[19]在肉鸭日粮中添加微生物菌剂（枯草芽孢杆菌、乳酸杆菌、酵母菌、乳酸、柠檬酸等），薛同宣[20]在肉鸭日粮中添加一定比例的枯草芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌等，均可以明显降低粪便中NH3与H2S的释放量，上述结果均与本研究结果相符。研究表明，复合微生物菌剂对降低畜舍恶臭具有一定的促进作用。不同菌种因其种属、功能、比例等不同，组合后可能会产生协同或拮抗作用，效果不一，需要通过试验确定其作用效果。张露[21]研究发现，在产朊假丝酵母、枯草芽孢杆菌、粪肠球菌等7种菌种中，筛选出除臭组合为产朊假丝酵母菌和凝结芽孢杆菌双菌。4结论通过筛选试验，在肉鸡基础日粮中按照1 000 mg/kg（0.1%）剂量添加酵母菌+枯草芽孢杆菌（1∶1）、酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌（1∶1∶1）、酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌（2∶2∶2∶1）和酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌+粪肠球菌（2∶2∶2∶1∶2）菌剂，能够有效降低鸡舍中NH3和H2S浓度。酵母菌+枯草芽孢杆菌+乳酸片球菌+双歧杆菌（2∶2∶2∶1）组合效果最佳，具有良好的应用前景。