香菇多糖是从香菇子实体中提取分离出来的具有典型的真菌β－葡聚糖化学结构的生物活性多糖[1-5]，具有增强机体免疫力、抗氧化、降血脂、保护肝脏等功效[6-10]。研究表明，饲料中适量添加香菇多糖可提高仔猪[11-13]、肉鸡[14-16]、和断奶大鼠[17]的生长性能、抗氧化能力和机体免疫力，增强虹鳟（Oncorhynchus mykiss）[18]、草鱼（Ctenopharyngodon idellus）[19]、黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco）[20]、吉富罗非鱼（Oreochromis niloticus）[21]、建鲤（Cyprinus carpio var）[22]等鱼类的非特异性免疫力，提高黄颡鱼[23]和金丝鱼（Tanichthrs altbonubes）[24]的抗氧化能力，缓解CCl4诱导建鲤肝脏的损伤[25]。但是，关于香菇多糖对鱼类生长性能影响的研究较少，仅有对黄颡鱼和哲罗鱼（Hucho taimen，Pallas）无明显促生长效果的报道[9,26]。本试验研究香菇多糖在欧洲鳗鲡（Anguilla anguilla）饲料中添加效果，为香菇多糖在鳗鲡养殖中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验动物与试验设计试验动物为欧洲鳗鲡，选择规格为（7.44±0.18）P（P数为描述鳗鲡规格的专用术语，为每千克鳗鲡尾数）、重量（824.20±17.28）kg/池的6口鳗鲡养殖池，随机分为2组，每组3个重复。对照组鳗鲡投喂基础饲料，香菇多糖组在基础饲料中添加480 mg/kg香菇多糖。香菇多糖的添加水平根据黄颡鱼和哲罗鱼[9,26]的试验结果及生产该添加剂公司的推荐量而确定。试验期96 d。1.2试验饲料和饲养管理基础饲料为浙江科盛饲料股份有限公司生产的粉状鳗鲡商业配合饲料，主要由白鱼粉、淀粉、啤酒酵母粉、膨化大豆和预混料组成。基础饲料营养水平为：粗蛋白质47.43%、粗脂肪4.67%、粗灰分16.87%。香菇多糖为白色粉末状，由佛山某生物科技有限公司提供，纯度为30%。养殖试验在福建锦江之曼水产科技有限公司进行。试验开始前投喂基础饲料，按料水比1∶1.1在搅拌机（YE2132M-6，上海皓天电机有限公司）中充分搅拌，制成面团状后，每天6：00和18：00定时投喂2次。试验开始后，对照组鳗鲡投喂基础饲料。香菇多糖产品在投喂前按照1 600 mg/kg的添加比例在水中充分溶解后和基础饲料在搅拌机中混匀，制成面团状后投喂。所用养殖池面积为30 m2，水深约1 m，并配备循环水装置。试验期间详细记录每个养殖池的投料量，并根据鳗鱼生长状况、养殖温度和水质的变化调整投喂量。试验鱼如有死亡，立即捞出称重，记录。养殖期间水质情况为：水温27.50~30.00 ℃、溶解氧浓度7.00~9.00 mg/L、pH值5.70~7.50、氨氮0.40~1.40 mg/L、亚硝酸盐0.10~0.14 mg/L。1.3样品采集养殖试验结束后饥饿24 h，将各养殖池中鳗鱼全部称重，从中随机取8尾鳗鱼用2 mL的注射器在尾静脉处取血。血液放在4 ℃冰箱内静置12 h后，3 500 r/min离心10 min，取血清，置于-80 ℃冰箱中保存，用于分析生化指标。解剖，取出内脏团，分离肝脏，将肝脏用预冷的生理盐水（质量分数为0.86%）冲洗干净并用滤纸吸干，迅速放入液氮中保存，用于测定肝脏丙二醛含量。1.4生长性能增重率(%)=(Wt-W0)/W0×100 (1)特定生长率(%/d)=(lnWt-lnW0)/t×100(2)摄食率(%)=Wf/(Wt/2+W0/2)/t×100(3)饲料效率(%)=(Wt－W0)/WFC×100(4)成活率(%)=Nf/Ni×100%(5)式中：W0为平均每口池的初始总重（kg）；Wt为平均每口池的终末总重（kg）；Wf为摄食饲料总量；Ni为初始尾数；Nf为终末尾数；WFC为每口池鳗鲡试验期总投料量（kg）；t为投喂天数（d）。1.5测定指标及方法1.5.1血清生化指标血清中谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）活性均采用赖氏法测定；总胆固醇（TC）采用单试剂GPO-PAP法测定；低密度脂蛋白（LDL）和高密度脂蛋白（HDL）含量采用双试剂直接法测定。上述指标试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。1.5.2肝脏丙二醛含量肝脏丙二醛（MDA）含量采用硫代巴比妥酸法测定。试剂盒购自南京建成生物工程研究所，相应操作参照试剂盒说明书进行。1.6数据统计与分析采用SPSS 21.0软件对所有数据进行独立样本t检验分析，结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1香菇多糖对欧洲鳗鲡生长性能的影响（见表1）由表1可知，香菇多糖组的增重率、特定生长率和摄食率均显著高于对照组（P0.05），饲料效率和成活率与对照组接近（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.21.015.T001表1香菇多糖对欧洲鳗鲡生长性能的影响组别初重/(kg/池)末重/(kg/池)增重率/%特定生长率/(%/d)摄食率/%饲料效率/%成活率/%对照组831.50±19.501 016.85±8.45b22.33±2.62b0.21±0.02b0.65±0.01b32.77±2.8399.94±0.01香菇多糖组823.50±13.501 094.45±27.65a32.88±1.67a0.30±0.01a0.74±0.02a40.48±2.9399.83±0.01注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2香菇多糖对欧洲鳗鲡血清生化指标的影响（见表2）由表2可知，香菇多糖组的血清AST活性以及TC、LDL含量均显著低于对照组（P0.05），ALT活性和HDL含量与对照组无显著差异（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.21.015.T002表2香菇多糖对欧洲鳗鲡血清生化指标的影响组别ALT/(U/L)AST/(U/L)TC/(mmol/L)LDL/(mmol/L)HDL/(mmol/L)对照组9.22±2.265.71±0.48a41.72±1.84a9.69±0.80a3.53±0.47香菇多糖组7.81±1.614.37±0.53b34.45±2.03b7.57±0.23b3.75±0.302.3香菇多糖对欧洲鳗鲡肝脏MDA水平的影响（见图1）由图1可知，香菇多糖组肝脏MDA水平显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.21.015.F001图1香菇多糖对欧洲鳗鲡肝脏MDA水平的影响注：不同小写字母表示组间差异显著（P0.05）。3讨论3.1香菇多糖对欧洲鳗鲡生长性能的影响香菇多糖在水产养殖中的应用较少，但是在其他动物养殖中的应用较多。研究表明，在仔猪饲料中添加300 mg/kg香菇多糖能够显著提高日增重和采食量[13]；在肉鸡饲料中添加300 mg/kg或350 mg/kg香菇多糖能够显著提高肉鸡平均日增重，降低料重比[14-15]。本试验中，饲料中添加480 mg/kg香菇多糖可以显著提高欧洲鳗鲡的增重率、特定生长率和摄食率，改善饲料效率的趋势，说明香菇多糖能够提高欧洲鳗鲡的生长性能，与上述研究结果类似。研究表明，在饲料中添加300~1 500 mg/kg香菇多糖对黄颡鱼生长无显著影响[9]，在饲料中添加5~10 g/kg香菇多糖对哲罗鱼增重率和特定生长率无显著影响[26]，与本研究结果不一致。原因可能与鱼类品种、香菇多糖的添加剂量、香菇多糖的组成、基础饲料营养水平等方面的差异有关，具体原因有待深入研究[27]。3.2香菇多糖对欧洲鳗鲡血清生化指标的影响正常情况下，ALT和AST主要存在于肝脏，只有肝脏细胞受损时才会释放到血液，导致血清中ALT和AST活性上升。血清中ALT和AST活性的变化反映肝功能状态[28]。本试验中，饲料中添加香菇多糖可显著降低欧洲鳗鲡血清中的AST活性，与吴旋[9]对金丝鱼的研究结果类似。在CCl4诱导建鲤肝脏损伤后，添加3.0 g/kg香菇多糖能够显著降低血清ALT、AST活性，有效缓解肝脏损伤[25]。香菇多糖自身分子结构具有的酚羟基能够有效清除氧化自由基，从而减轻氧化自由基对肝脏的损伤[29]。香菇多糖能够促进肝糖原合成，使肝微粒体细胞色素P450水平升高，间接对肝脏起保护作用[30]。TC是胆汁酸及其类固醇激素等物质的合成前体。当肝脏中脂肪过多或者肝脏脂肪代谢能力障碍时，血清中TC水平会随之升高，因此TC可以反映肝脏脂肪代谢状况[31]。HDL主要由肝脏合成，能够将血液和组织中多余的胆固醇转运至肝脏分解逆向排出体外；LDL主要将肝脏合成的内源胆固醇向外周组织转运[32]。添加香菇多糖能够降低高脂血症小鼠血清中TG、TC、LDL含量[8]；在黄颡鱼饲料中添加1 500 mg/kg香菇多糖可以显著降低血清中TG和TC含量[9]。本试验中，添加香菇多糖可显著降低欧洲鳗鲡血清中TC和LDL水平，与上述研究结果一致，说明香菇多糖能够降低欧洲鳗鲡血脂。香菇多糖降血脂的机制可能是通过抑制apo B（LDL主要的结构蛋白）的表达水平，减少血清中LDL的含量，促进胆固醇的逆向转运和代谢，加速总胆固醇向胆汁酸的转化，从而降低血清胆固醇[10,33]；也可能通过上调脂代谢中脂质分解基因PPAR α、PPAR δ的表达，下调脂质合成基因PPAR γ、SREBP-1c和脂质转运基因CD36的表达来降低血脂[8]。3.3香菇多糖对欧洲鳗鲡肝脏MDA水平的影响MDA是自由基与多不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应的产物，MDA含量反映氧自由基水平和脂质过氧化程度[34]。饲料中添加300 mg/kg香菇多糖能够显著降低黄颡鱼肝脏中MDA的含量，200 mg/kg香菇多糖降低金丝鱼肝脏中MDA的含量[23-24]。本试验中，添加香菇多糖能够降低欧洲鳗鲡肝脏MDA含量，与上述研究结果一致。此外，添加3.0 g/kg香菇多糖能够降低CCl4诱导建鲤肝脏损伤后的MDA水平[25]。饲料中添加香菇多糖可能通过提高肝脏的抗氧化能力减少肝脏脂质过氧化而降低丙二醛水平。香菇多糖提高机体抗氧化能力的途径可能包括：（1）香菇多糖分子向自由基供氢，破坏自由基链的稳定，阻断自由基的链式反应[6]；（2）多糖环上的羟基可与二价铁离子螯合，从而抑制活性氧的持续产生[35]；（3）香菇多糖可以通过诱导HO-1、AKR1C和NQO1的表达，激活Nrf2/ARE抗氧化信号通路，导致细胞内活性氧水平的减少，起到抗氧化作用[36]。本试验中，欧洲鳗鲡血清转氨酶活性降低，表明添加香菇多糖对欧洲鳗鲡肝脏健康具有一定的改善作用。4结论本试验条件下，饲料中添加480 mg/kg香菇多糖可促进欧洲鳗鲡生长，降低血脂，改善肝脏健康状况。