葡萄籽提取物(grape seed extract,GSE)是从葡萄籽中提取出来的一种多酚混合物。GSE包含单体酚和聚合多酚。单体酚主要包括没食子酸、儿茶素、表儿茶素、儿茶素、没食子酸酯;聚合多酚即不同聚合度的原花青素(grape seed procyanidins extract,GSPE)[1]。从葡萄籽中提取出来的多酚物质具有极强的抗氧化能力,是天然的抗氧化剂[2]。研究表明,GSE可用作肉鸡饲料添加剂替代合成抗氧化剂,增强肉鸡免疫力和抗氧化功能,提高疫苗接种效果,改善肉质[3]。侯福银等[4]研究发现,饲粮中添加适量GSPE饲喂肉鸡,可在一定程度上提高肉鸡的生长性能、改善肉品质。将GSE作为饲料添加剂投入畜禽生产使用的研究较少。宁都黄鸡是江西省优质地方肉用鸡种。本试验旨在将GSE作为宁都黄鸡饲粮添加剂,探讨GSE对宁都黄鸡屠宰性能与肉品质的影响,为GSE在肉鸡养殖中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料1.1.1葡萄籽提取物葡萄籽提取物购自天津尖峰天然产物研究有限公司,为红棕色粉末。其中,原青花素含量≥95%,低聚原青花素≥65%。1.1.2基础饲粮基础饲粮根据NY/T 33—2004《鸡饲养标准》设计[5]。基础饲粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.22.008.T001表1基础饲粮组成及营养水平(风干基础)原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米58.60代谢能/(MJ/kg)13.17豆粕35.00粗蛋白/%17.00油3.00钙/%0.80磷酸氢钙1.40总磷/%0.60石粉1.10可利用磷/%0.40食盐0.30赖氨酸/%0.82DL-蛋氨酸0.10蛋氨酸/%0.32L-赖氨酸盐酸盐0.10蛋氨酸+胱氨酸/%0.6350%胆碱0.10矿物质0.25复合维生素0.05注:1.矿物质和复合维生素均购自大成农技(葫芦岛)有限公司。2.营养水平均为计算值。1.1.3试验动物40羽78日龄疫苗接种完全的宁都黄鸡。1.2试验设计试验采用单因素完全随机试验设计,将40羽鸡随机分为4组,每组10个重复。其中,S0为对照组,饲喂基础饲粮;S1、S2、S3为处理组,分别在基础饲粮中添加200、400、600 mg/kg GSE。试验鸡分栏饲养,自由光照,自由采食和饮水。试验期42 d。1.3样品采集宁都黄鸡通常120日龄出栏,按要求饲养42 d后,停饲12 h,对各组鸡进行称重,结料,计算总增重和料重比。每组随机选5羽,共20羽,割喉放血,放入10 mL一次性采血管中,在4 ℃、3 500 r/min 离心15 min,提取上层血清并转入1. 5 mL的Ependorf管中,-20 ℃冰箱中保存。屠宰后对鸡进行解剖,提取胸部肌肉,测定肉品质。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能记录各组鸡的初重、末重、总采食量。计算平均日增重和料重比。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)料重比=平均日采食量/平均日增重(2)1.4.2屠宰性能参照文献[6]的方法计算各屠宰性能指标。屠宰率=屠体重/宰前体重×100%(3)半净膛率=半净膛重/宰前体重×100%(4)全净膛率=全净膛重/宰前体重×100%(5)腹脂率=腹脂重/(全净膛重+腹脂重)×100%(6)腿肌率=两侧腿净肌肉重/全净膛重×100%(7)胸肌率=两侧胸肌重/全净膛重×100%(8)1.4.3肉品质失水力:取0.5 g胸大肌样品,置于两层医用纱布之间,上下各垫18层滤纸,加压3.5 kg,保持5 min。失水率=(m1-m2)/ml×l00%(9)式中:m1为压前样本质量;m2为压后样本质量。滴水损失:屠宰后4 h取样(5 cm×3 cm×2 cm)称重,约5 g,采用细铁丝勾住肉样,密封,避免水分蒸发,在水平于肌纤维方向悬挂在0~4 ℃冰箱内,24 h后用滤纸滤去肉样表面的水分,称重。滴水损失=(吊前质量-吊后质量)/吊前质量×100%(10)胶原蛋白:肉样用盐酸水解,使用显色试剂,采用比色法测定[7];粗蛋白采用凯氏半微量定氮法测定[8];粗脂肪采用索氏浸提法测定[9];水分采用直接干燥法测定。水分含量=(烘前皿与样共重-烘后皿与样共重)/样品重×100%[10] (11)pH值:在宰后2 h内取胸肌,用防水酸度计测定肌肉pH值。1.4.4脂代谢指标总胆固醇采用胆固醇氧化酶法测定;甘油三酯采用酶比色法测定;血清高密度脂蛋白采用清除法测定;血清低密度脂蛋白采用遮蔽法测定。试剂盒均购自中生北控生物科技股份有限公司。1.4.5免疫器官指数解剖分离出脾脏,用滤纸擦干血渍后称重,计算免疫器官指数。免疫器官指数=免疫器官重/宰前活重(12)1.5数据统计与分析数据采用SPSS统计软件进行单因素方差分析,采用LSD法进行多重比较,结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1饲粮中添加GSE对宁都黄鸡生长性能的影响(见表2)由表2可知,S1组宁都黄鸡平均日增重高于其他各组,S1组宁都黄鸡平均日采食量低于其他各组,S1组宁都黄鸡料重比低于其他各组,上述指标差异均不显著(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.22.008.T002表2饲粮中添加GSE对宁都黄鸡生长性能的影响组别初重/g末重/g平均日增重/(g/d)平均日采食量/(g/d)料重比S0组(对照组)734.00±6.131 500.00±55.8018.24±0.5272.62±0.433.98±0.08S1组654.00±8.041 489.00±61.3019.89±0.5960.71±0.323.05±0.07S2组754.00±7.151 320.00±43.2213.48±0.6271.43±0.485.30±0.11S3组730.00±6.981 400.00±31.3015.95±0.4971.43±0.484.48±0.132.2饲粮中添加GSE对宁都黄鸡屠宰性能的影响(见表3)由表3可知,S2组宁都黄鸡屠宰率、半净膛率和腿肌率高于对照组,S1组、S3组宁都黄鸡屠宰率、半净膛率和腿肌率低于对照组,但是差异不显著(P0.05)。S1组、S2组宁都黄鸡全净膛率、腹脂率高于对照组,S3组宁都黄鸡全净膛率、腹脂率低于对照组(P0.05)。S1组、S3组宁都黄鸡胸肌率显著高于对照组和S2组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.22.008.T003表3饲粮中添加GSE对宁都黄鸡屠宰性能的影响组别屠宰率半净膛率全净膛率腿肌率胸肌率腹脂率S0组(对照组)93.50±1.2381.50±2.06ab66.40±1.2418.54±0.6314.26±0.13c4.93±0.26S1组88.34±0.9980.16±2.59b68.00±1.1618.44±0.7816.77±0.16ab4.94±0.77S2组94.70±1.3587.12±3.21a74.24±1.0618.88±0.1514.62±0.08c5.46±0.27S3组92.00±1.0181.14±2.33ab66.29±0.7217.11±0.3216.47±0.22ab3.65±0.29注:同列数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),无字母或相同字母表示差异不显著(P0.05);下表同。%2.3饲粮中添加GSE对宁都黄鸡肉品质的影响(见表4)由表4可知,S3组肌肉失水率显著低于对照组(P0.05);S3组的胶原蛋白含量显著高于对照组和S1组(P0.05);S3组粗脂肪含量显著高于对照组(P0.05)。各组肌肉滴水损失、水分、粗蛋白的含量和pH值差异不显著(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.22.008.T004表4饲粮中添加GSE对宁都黄鸡肉品质的影响组别失水率/%滴水损失/%胶原蛋白/%水分/%粗蛋白/%粗脂肪/%pH值S0组(对照组)25.33±1.79ab5.52±0.630.88±0.08bc71.88±1.2222.63±0.242.13±0.90b6.32±0.08S1组27.44±1.81ab7.21±0.620.89±0.06bc72.50±1.5422.00±0.262.23±0.91ab6.38±0.05S2组26.48±1.80ab5.14±0.140.93±0.07abc73.70±1.3822.58±0.302.37±0.19ab6.30±0.07S3组16.72±1.56c5.20±0.601.02±0.09a73.15±1.5121.26±0.192.49±0.15a6.38±0.052.4饲粮中添加GSE对宁都黄鸡脂代谢的影响(见表5)由表5可知,S2组宁都黄鸡血清总胆固醇含量高于对照组,S1组、S3组血清总胆固醇含量低于对照组(P0.05)。S1组宁都黄鸡血清甘油三酯含量高于对照组,S2组、S3组甘油三酯含量低于对照组,但是差异不显著(P0.05)。S2组、S3组宁都黄鸡血清高密度脂蛋白含量高于对照组(P0.05),S1组高密度脂蛋白低于对照组(P0.05),S1组与S2组之间差异显著(P0.05)。各GSE剂量组宁都黄鸡血清低密度脂蛋白含量均低于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.22.008.T005表5饲粮中添加GSE对宁都黄鸡脂代谢的影响组别总胆固醇甘油三酯高密度脂蛋白低密度脂蛋白S0组(对照组)2.26±0.520.240±0.0601.58±0.35ab1.48±0.57S1组2.02±0.480.360±0.2101.38±0.14b1.07±0.23S2组2.41±0.110.180±0.0021.95±0.30a1.42±0.20S3组2.01±0.110.170±0.0401.60±0.17ab1.26±0.46mmol/L2.5饲粮中添加GSE对宁都黄鸡脾脏指数的影响(见表6)由表6可知,S1组宁都黄鸡脾脏指数高于对照组,S2组、S3组低于对照组,但是差异不显著(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.22.008.T006表6饲粮中添加GSE对宁都黄鸡脾脏指数的影响组别脾脏指数S0组(对照组)3.34±0.89S1组3.75±0.90S2组3.26±0.77S3组3.10±0.853讨论3.1饲粮中添加GSE对宁都黄鸡生长性能的影响本研究表明,在饲粮中添加200 mg/kg GSE可促进鸡的生长,降低料重比。原因可能是葡萄籽具有保护胃黏膜、防治胃炎和修复损伤肠道组织的作用[11],能够促进宁都黄鸡对饲料的消化吸收,提高饲料营养利用率,达到降低料重比的效果。3.2饲粮中添加GSE对宁都黄鸡屠宰性能的影响本试验中,400 mg/kg GSE组宁都黄鸡屠宰率、半净膛率、全净膛率、腿肌率、胸肌率均有不同程度的提升,胸肌率低于其他两个剂量组且高于对照组;其他两个剂量组的肌肉屠宰率、半净膛率、全净膛率、腿肌率、胸肌率比对照组均有下降,可能与GSE添加浓度有关。高浓度的多酚(GSE主要成分)可与蛋白质相互作用,形成单宁-蛋白质复合物[3],降低饲料利用率,从而对屠宰性能产生影响。GSPE进入动物机体后,可迅速被吸收、转运和代谢,大部分可通过羟基的甲基化与葡萄糖醛酸等有机酸结合成酯而进行代谢,小部分以原形排出体外[12],因此低剂量的GSE进入体内可能会很快被机体代谢掉,起效较弱。本研究中,200、600 mg/kg GSE组胸肌率显著提高,与周华等[13]研究结果大致相同。3.3饲粮中添加GSE对宁都黄鸡肉品质的影响系水力是指肌肉蛋白质受到外力作用时保持所含水分的能力,直接影响肉的风味、质地、营养成分和多汁性[14-15]。良好的系水力可有效降低肉品的水分损失,更好地保持肉品的营养、滋味、香气、多汁性、嫩度及色泽[16]。系水力可用滴水损失、失水率反映,与二者呈负线性相关[17]。肌肉中胶原蛋白含量与肉的嫩度呈负相关;粗脂肪是指肌肉脂肪的含量,与肉品的风味呈正相关[13]。侯福银等[4]研究发现,饲粮中添加适量GSPE饲喂肉鸡,可在一定程度上改善肉品质。汪水平等[16]研究发现,肉兔食用GSE可以改善肉品的抗氧化能力,进而提高肉品质。本试验结果表明,在饲粮中适量添加GSE可改善肌肉的系水力和粗脂肪含量,但肉的嫩度有所下降;600 mg/kg剂量组肌肉失水率显著下降,粗脂肪含量显著提升,胶原蛋白含量显著提升。3.4饲粮中添加GSE对宁都黄鸡脂代谢的影响徐方旭等[18]研究表明,适当浓度的GSPE能够有效降低肥胖小鼠的血脂水平。侯福银等[4]研究表明,GSPE的添加可以有效调节肉鸡的脂质代谢。本研究结果与上述结论基本一致。与对照组相比,600 mg/kg GSE组宁都黄鸡腹脂率、血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白含量均有不同程度的下降,高密度脂蛋白含量有一定程度的升高,表明添加适当剂量的GSE可以在一定程度上降低宁都黄鸡的血脂,促进脂代谢,降低腹脂率。3.5饲粮中添加GSE对宁都黄鸡脾脏指数的影响免疫器官指数在一定程度上反映机体免疫功能的强弱,是评价家禽免疫力的重要指标[19-20]。本研究中,各剂量组脾脏免疫器官差异不显著,200 mg/kg GSE组宁都黄鸡免疫指数高于对照组,表明这个剂量具有提升免疫功能的趋势。4结论从降低宁都黄鸡养殖成本和提升免疫力方面考虑,建议在饲粮中添加200 mg/kg GSE;从提升宁都黄鸡肉品质方面考虑,建议添加600 mg/kg GSE为宜。
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