N-氨甲酰谷氨酸（N-carbamylglutamic，NCG）是NAG类似物，能够参与动物体内二氢吡咯-5-羧酸合成酶（P5CS）和氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ（CPS-Ⅰ）的激活，促进谷氨酰胺或脯氨酸合成瓜氨酸，进而促进精氨酸（Arg）合成[1]。Arg是α-氨基酸之一，是组织蛋白中最丰富的氮载体。Arg在调控机体内营养代谢和免疫反应方面具有重要作用[2]，也是合成肌酸、脯氨酸、谷氨酸、多胺和一氧化氮（NO）的前体[3]，参与细胞中多样化的代谢及调节作用。但因Arg从外界摄取的量较多，日粮添加成本高，难以广泛应用于动物生产中。而NCG能够通过促进Arg的内源性合成，提升动物繁殖力，促进动物的生长发育[4]。目前，有关NCG在禽类中的应用研究较少，本试验通过在日粮中添加不同水平的NCG，研究NCG对庄河大骨鸡生产性能、蛋品质及抗氧化功能的影响，为NCG在蛋鸡养殖生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料试验用大骨鸡由锦州医科大学试验鸡场提供。NCG（纯品）由安徽普盛药业有限公司提供。1.2试验设计选取192只12周龄健康且体重接近的大骨鸡，随机分为4组，每组4个重复，每个重复12只鸡。试验各组大骨鸡分别饲喂NCG添加量为0（对照组）、0.08%、0.12%、0.16%的基础日粮。预试期1 w，正式试验期25 w。产蛋高峰期中的第26~36 w数据应用于统计分析。1.3试验日粮与饲养管理试验期间采用三层立体笼式养殖，自由饮水，定量采食。按常规方法管理与免疫。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.22.007.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米63.18代谢能/(MJ/kg)11.03大豆粕25.60粗蛋白质/%16.50磷酸氢钙1.30钙/%3.41石粉8.70有效磷/%0.32食盐0.26钠/%0.16小苏打0.20氯/%0.16蛋氨酸0.23赖氨酸/%0.80赖氨酸0.03蛋氨酸/%0.51预混料0.50蛋氨酸+半胱氨酸/%0.80色氨酸/%0.18中性洗涤纤维/%6.50酸性洗涤纤维/%5.12粗纤维/%3.47注：1.预混料为每千克日粮提供：铜20 mg、锌70 mg、硒0.5 mg、VA 7 000 IU、VD3 2 500 IU、VE 30 mg、VK3 1 mg、VB1 1.5 mg、VB2 4 mg、VB6 1.5 mg、烟酸30 mg、叶酸0.55 mg、D-泛酸10 mg、VB12 0.02 mg、生物素0.16 mg、胆碱400 mg。2.营养水平均为实测值。1.4测定指标及方法1.4.1样品采集试验鸡32周龄时，每组随机选4只鸡，禁食12 h称重；翅根采集血样，3 000 r/min，离心15 min取上清，液氮保存，应用于测定血浆中NO含量和NOS活性。试验鸡32、33周龄时，每周采集1次蛋样，测定各组蛋品质。1.4.2生产性能试验期内，每天准确记录各组各重复蛋鸡生产数据，统计产蛋高峰期中第26~36 w的总蛋重、产蛋数量，记录采食量，计算产蛋率、料蛋比。产蛋率=(产蛋总数/鸡数)×100%(1)平均蛋重=产蛋总重/产蛋数量(2)总蛋重=各组每周产蛋总重(3)料蛋比=饲料消耗量/产蛋重(4)平均日采食量=每组总采食量/每组蛋鸡数(5)1.4.3蛋品质蛋品质检测指标包括：蛋形指数、哈夫单位、蛋黄比、蛋白高度、蛋黄颜色、蛋壳厚度。蛋形指数：蛋的纵径与横径之比。哈夫单位：游标卡尺测量3个点蛋白高度，求平均值，计算哈夫单位。哈夫单位=100×lg(H－1.7×W0.37+7.57)(6)式中：H为浓蛋白高度，W为蛋重。蛋白高度：使用蛋白高度测定仪测量蛋白的厚度，测量3个等距离点，均值为蛋白高度，单位为mm。蛋黄颜色：分离蛋黄蛋清，使用罗氏比色扇比色。蛋壳厚度：将蛋壳剔除内壳膜，使用游标卡尺分别测定蛋壳的3个部位（大头、中段、小头）的厚度，蛋壳平均厚度为3个部位厚度的均值，单位为mm。1.4.4NO及NOS的测定采用硝酸还原酶法测定血浆一氧化氮（NO）含量，比色法测定血浆一氧化氮合酶（NOS）活性。试验所用试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。1.5数据统计与分析采用SPSS 26.0统计软件对数据进行单因素方差分析(One-way ANOVA)，采用Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准误”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1NCG对大骨鸡生产性能的影响（见表2）由表2可知，0.08%组、0.12%组大骨鸡产蛋率均显著高于对照组（P0.05）；各组间蛋重差异不显著（P0.05）；0.12%组大骨鸡的料蛋比最小，显著低于0.08%组（P0.05）；0.12%组大骨鸡的平均日采食量显著低于0.08%组和0.16%组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.22.007.T002表2NCG对大骨鸡生产性能的影响组别产蛋率/%平均蛋重/g料蛋比平均日采食量/g对照组60.750±2.569b57.725±0.5192.270±0.115ab129.750±1.707b0.08%NCG组71.645±2.055a55.732±0.6982.417±0.158a132.220±2.166a0.12%NCG组68.182±1.089a56.985±1.0072.169±0.168b123.000±1.660b0.16%NCG组66.269±2.547ab56.660±1.4782.347±0.219ab134.166±1.169a注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），字母相同或无字母表示差异显著（P0.05）；下表同。2.2NCG对大骨鸡蛋品质的影响（见表3）由表3可知，添加NCG各组蛋黄颜色均得到显著改善（P0.05）；0.12%组蛋形指数和蛋白高度均显著高于其他组（P0.05）；0.08%组与0.12%组的哈夫单位显著高于其他组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.22.007.T003表3NCG对大骨鸡蛋品质的影响组别蛋黄颜色蛋形指数哈夫单位蛋黄比例/%蛋白高度/mm蛋壳厚度/mm对照组7.125±1.808b1.316±0.029b60.150±4.185b29.273±0.7223.038±0.348b0.337±0.0110.08%NCG组8.500±0.522a1.305±0.276b67.800±5.967a30.472±1.1363.411±0.279b0.347±0.0070.12%NCG组8.667±0.707a1.363±0.413a68.611±4.348a29.429±1.6564.221±0.449a0.353±0.0280.16%NCG组8.167±1.169a1.307±0.272b62.133±6.964b29.557±1.9573.240±0.362b0.346±0.0072.3NCG对大骨鸡血浆NO及NOS含量的影响（见表4）由表4可知，0.12%组大骨鸡血浆中NO含量显著高于其他组（P0.05）；各组间NOS活性差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.22.007.T004表4NCG对大骨鸡血浆NO及NOS含量的影响组别NO/(μmol/L)NOS/(U/mL)对照组60.311±4.140b33.800±0.7150.08%NCG组61.350±5.326b30.532±1.8740.12%NCG组75.334±5.781a32.290±1.0630.16%NCG组61.237±4.598b32.998±0.8453讨论3.1NCG对大骨鸡生产性能的影响产蛋率是评价蛋鸡生产性能的重要指标之一，受营养、品种、环境以及疾病等多种因素影响[5]。NCG通过促进Arg的内源合成，进而影响畜禽的繁殖及免疫等功能[6]，在家禽生产中的应用较为广泛。Ma等[7]研究发现，NCG可增加母鸡卵巢中卵泡的数量，促进卵巢发育，提高产蛋性能。本试验中，统计产蛋高峰期26~36 w的数据结果表明，日粮中添加0.08%、0.12%的NCG均可显著提高大骨鸡的产蛋率（P0.05）；添加0.12%的NCG可以提高蛋重。蛋重可评价蛋鸡生产的经济效益。本试验中，0.12%NCG组大骨鸡鸡蛋的蛋重高于0.08%NCG组和0.16%NCG组，说明适量添加NCG有利于提高蛋鸡产蛋率及蛋重，从而提高养殖的经济效益。3.2NCG对大骨鸡蛋品质的影响蛋品质直接影响蛋鸡养殖的经济效益[8]。蛋重、蛋壳颜色、蛋壳厚度、蛋黄颜色、蛋白高度、哈夫单位、蛋形指数等是衡量蛋品质的指标[9]。蛋白高度越高，哈夫单位越好，蛋品质越好[10]。蛋品质指标受品种、日粮营养水平、饲养环境、产蛋周期等因素的影响，其中鸡自身遗传因素和日粮营养水平对蛋品质影响最大。本试验采用三层立体笼式养殖，自由饮水，定量采食，可在一定程度上消除环境和饲养条件对蛋品质的影响。本试验结果表明，添加NCG各组鸡蛋的蛋黄颜色均显著高于对照组（P0.05）；0.12%NCG组蛋形指数和蛋白高度显著高于对照组和其他处理组（P0.05）；添加NCG对蛋黄比例、蛋壳厚度无显著影响（P0.05）。Afzal等[11]研究发现，蛋黄中大部分色素由脂溶性脂色素组成，均属类胡萝卜素，饲料中油脂型物质可促进该色素吸收和沉积[12]。本试验中，添加NCG各组的蛋黄颜色均显著高于对照组，说明NCG可能通过促进内源Arg合成间接促进蛋黄色素沉积。随着NCG水平提高，蛋白高度均有所提升，且0.12%NCG组蛋白高度显著高于对照组和其他处理组，说明日粮中添加NCG提高了体内氨基酸利用效率，改善了蛋白合成能力，从而提高蛋白高度，与王玉璘等[13]的研究结果相似。3.3NCG对大骨鸡血浆NO及NOS的影响机体与因氧化反应、污染、放射线照射等因素会产生过多的自由基[14]。过量自由基危害机体健康。因此，抗氧化水平是衡量机体健康的重要指标[15]。抗氧化物质能够通过自身合成和食物供给获得。本试验在日粮中添加不同水平NCG，测定蛋鸡血浆中NO含量及NOS的活性，研究NCG是否可通过调节NO的合成代谢，进而影响鸡的产蛋机能。卵巢含有丰富的血管网，为卵泡的发育及成熟提供营养、激素以及细胞因子等[16]。卵泡发育与卵巢血管网密切相关。NCG能够取代尿素循环中产生更多内源性Arg的N-乙酰谷氨酸[17-18]，在一氧化氮合酶的催化作用下，Arg可转化为一氧化氮和瓜氨酸[19]，其中一氧化氮具有促进血管生成的功能[20]。一氧化氮和一氧化氮合酶是一种细胞信使分子和效应分子，对机体抗氧化指标有着重要的影响。有研究表明，卵巢上皮细胞中有缺陷的内皮一氧化氮合酶/一氧化氮系统和血管导致奶牛卵母细胞及生育能力降低[21]，说明一氧化氮可间接影响动物卵泡发育。本试验中，随着日粮中NCG水平的增加，血浆NO含量呈先升高后降低的趋势，表明Arg产量增加，间接增加血浆中NO的含量，促进机体卵泡发育，提高抗氧化水平。4结论大骨鸡日粮中添加0.08%~0.16%的NCG均可不同程度地改善产蛋高峰期大骨鸡的生产性能、蛋品质，且NCG可通过NCG-NO途径发挥作用。结合本试验结果及成本投入等因素综合考虑，0.12%为大骨鸡最佳的NCG添加水平。