香菇多糖是香菇菌丝体、子实体的主要活性物[1-2]，是一种结构中含有β-（1,3）葡聚糖的真菌多糖，可以被Dectin-1、TLR等模式识别受体识别，激活NF-κB炎症通路，增加细胞因子分泌，具有良好的免疫调节能力[3-5]。在养殖中，香菇多糖可以提高动物的生长性能，降低料重比，促进免疫细胞增殖[6-7]。采用液体发酵技术可在短时间内获得大量香菇菌丝体及发酵产物，缩短生产周期，降低成本[8-9]。目前，通过液体发酵方式获得的香菇菌丝体多糖在禽类养殖中的研究较少。因此，本试验研究在饲粮中添加香菇菌丝体多糖对肉鸡生长性能、免疫功能及抗氧化性能的影响，为香菇菌丝体多糖在肉鸡养殖中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验动物及材料360只1日龄健康爱拔益加（AA）肉鸡，购自德惠永旭牧业有限公司。香菇菌丝体多糖，由试验室前期研制，多糖含量约为50%。1.2试验试剂鸡白介素2（IL-2）、白介素4（IL-4）、白介素6（IL-6）ELISA试剂盒购自北京思量长久生物技术有限公司；鸡免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）ELISA试剂盒购自上海沪鼎生物科技有限公司；超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）试剂盒购自南京建成生物工程研究所。新城疫Ⅳ系（La Sota株）疫苗、传染性支气管炎（H 120株）疫苗购自吉林正业生物制品股份有限公司。1.3试验仪器超净工作台购自北京东联哈尔滨仪器制造有限公司；酶标仪购自瑞士Tecan仪器公司；低速离心机购自北京医用离心机厂。1.4试验设计与饲养管理360只1日龄AA肉鸡，随机分为4组，每组3个重复，每个重复30只。对照组肉鸡饲喂基础饲粮，试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组分别在基础饲粮中添加200、500、800 mg/kg的香菇菌丝体多糖。试验期21 d。密闭式育雏舍，自由饮水采食，1日龄舍内温度36 ℃，每周降低1~2 ℃；1~3 d时24 h光照，3 d后设置23 h光照，1 h黑暗。于1、11日龄免疫新城疫Ⅳ系（La Sota株）疫苗，4日龄免疫传染性支气管炎疫苗（H 120株）。饲养管理按AA肉鸡商业管进行理程序。基础饲粮参考农业行业标准NY/T 33—2004《鸡饲养标准》配制。基础饲粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.23.009.T001表1基础饲粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米55.30代谢能/(MJ/kg)12.47豆粕33.70粗蛋白/%21.72麦麸4.35钙/%0.93碳酸氢钙1.40有效磷/%0.45石粉1.00蛋氨酸/%0.50食盐0.25赖氨酸/%1.29植物油3.00预混料1.00注：1.预混料为每千克饲粮提供：Fe 80 mg、Cu 8 mg、Mn 80 mg、Zn 80 mg、I 0.7 mg、Se 0.3 mg、VA 8 500 IU、VD3 1 000 IU、VE 10 mg、VK3 0.5 mg、VB12 0.03 mg、生物素0.4 mg、泛酸10.00 mg、叶酸0.55 mg、烟酸30 mg、吡哆醇3.5 mg、植酸酶300 U。2.营养水平中代谢能为计算值，其余均为实测值。1.5测定指标及方法1.5.1生长性能试验开始前，对每组肉鸡初重进行称量并记录；试验开始后，每日记录投料量及耗料量，计算平均日采食量。21日龄，试验肉鸡禁食12 h后称重，记录末重，计算平均日增重、料重比。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=总采食量/(各组肉鸡数量×试验天数)(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.5.2免疫器官指数21日龄，每个重复取4只肉鸡，屠宰后取脾脏、胸腺、法氏囊，生理盐水冲洗，去除多余组织，滤纸吸干，称重，计算免疫器官指数。免疫器官指数=免疫器官重量/屠宰时体重(4)1.5.3血清指标21日龄，每个重复随机选取4只肉鸡，翅静脉取血，4 ℃静置40 min，3 000 r/min离心10 min，取上清，-20 ℃保存。血清IL-2、IL-4、IL-6、IgG、IgM、MDA含量及SOD、GSH-Px活性的测定方法参照试剂盒说明书。1.6数据统计与分析采用SPSS 26.0软件进行单因素方差分析（One-way ANOVA），采用Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1香菇菌丝体多糖对肉鸡生长性能的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，各试验组肉鸡的平均日采食量、料重比均显著降低（P0.05），但组间差异不显著（P0.05）。其中，试验Ⅱ组肉鸡生长性能最优。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.23.009.T002表2香菇菌丝体多糖对肉鸡生长性能的影响组别初重/g末重/g平均日增重/(g/d)平均日采食量/(g/d)料重比对照组45.65±0.41835.89±21.8037.60±1.0550.84±1.97a1.35±0.03a试验Ⅰ组45.30±0.46850.70±15.8438.35±0.7647.34±0.88b1.24±0.04b试验Ⅱ组44.98±0.33857.23±21.0038.68±0.9946.89±1.14b1.21±0.06b试验Ⅲ组45.43±0.34853.21±21.9438.48±1.0547.02±1.06b1.22±0.05b注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2香菇菌丝体多糖对肉鸡免疫器官指数的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，试验Ⅱ组肉鸡脾脏指数、胸腺指数、法氏囊指数均显著提高（P0.05）；试验Ⅰ组、Ⅲ组肉鸡法氏囊指数显著提高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.23.009.T003表3香菇菌丝体多糖对肉鸡免疫器官指数的影响组别脾脏指数胸腺指数法氏囊指数对照组0.768±0.107b5.073±0.211b2.319±0.172b试验Ⅰ组0.888±0.716b5.329±0.148b2.806±0.429a试验Ⅱ组0.911±0.088a5.509±0.337a2.983±0.243a试验Ⅲ组0.816±0.212b5.207±0.237b2.797±0.341ag/kg2.3香菇菌丝体多糖对肉鸡血清细胞因子及免疫球蛋白含量的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，试验Ⅱ组、Ⅲ组肉鸡血清IL-2、IL-4、IL-6、IgG、IgM含量显著提高（P0.05）。与对照组相比，试验Ⅰ组肉鸡血清IL-2、IL-4、IgG、IgM含量显著提高（P0.05）。试验Ⅱ组肉鸡血清IL-4、IL-6、IgG、IgM含量显著高于试验Ⅰ组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.23.009.T004表4香菇菌丝体多糖对肉鸡血清细胞因子及免疫球蛋白含量的影响组别IL-2/(ng/L)IL-4/(ng/L)IL-6/(ng/L)IgG/(g/L)IgM/(g/L)对照组12.34±1.76b14.89±1.26c18.25±0.96b1.20±0.042c0.563±0.020c试验Ⅰ组14.58±0.66a16.63±1.46b19.29±1.28b1.34±0.035b0.613±0.022b试验Ⅱ组15.08±1.16a18.87±1.00a21.89±0.74a1.43±0.264a0.694±0.043a试验Ⅲ组14.81±1.02a17.72±1.57ab19.98±1.44a1.40±0.067ab0.658±0.048ab2.4香菇菌丝体多糖对肉鸡抗氧化指标的影响（见表5）由表5可知，与对照组相比，各试验组肉鸡血清SOD、GSH-Px活性显著提高（P0.05），血清MDA含量显著降低（P0.05）。其中，试验Ⅱ组效果最优。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.23.009.T005表5香菇菌丝体多糖对肉鸡抗氧化指标的影响组别SOD/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)MDA/(μmol/L)对照组128.71±9.98b753.92±30.55b4.13±0.19b试验Ⅰ组154.04±10.94a817.34±20.22a3.57±0.27a试验Ⅱ组164.24±6.89a827.78±9.09a3.51±0.30a试验Ⅲ组158.11±15.17a821.86±26.59a3.59±0.35a3讨论3.1香菇菌丝体多糖对肉鸡生长性能的影响饲粮添加多糖类物质可改善动物肠道形态、增强消化酶活性、改变肠道菌群结构，进而提高饲料利用率，提高生长性能[10-12]。王虹等[13]发现，饲粮添加硒化甘草多糖可降低不同时期雏鸡的平均日采食量，提高平均日增重。李文嘉等[14]发现，龙须菜多糖可提高22~42日龄肉鸡的平均体重及平均日增重，降低全期料重比。李开菊等[15]发现，饲粮添加素花党参多糖可调节乌鸡肠道菌群，降低15~29日龄料重比，提高生长性能。本试验发现，饲粮添加香菇菌丝体多糖可降低肉鸡的平均日采食量、料重比，提高生长性能，添加量以500 mg/kg最优，与刘鼎阔等[16]的研究结果相似，说明通过液体发酵技术获得的香菇菌丝体多糖与香菇子实体多糖效果类似。3.2香菇菌丝体多糖对肉鸡免疫器官指数的影响鸡的主要免疫器官包括脾脏、胸腺、法氏囊。免疫器官指数及绝对重量在一定范围内提高说明机体免疫功能得到提升[17]。李瑞萍等[18]发现，饲粮添加蝉花多糖可提高肉鸡法氏囊指数及脾脏指数。王誉瑾等[19]发现，大蒜多糖可提高肉鸡胸腺指数及法氏囊指数。耿兵等[20]采用超声波辅助水提法从桑叶中得到不同相对分子质量的两个桑叶多糖组分MLP-Ⅰ、MLP-Ⅱ，发现二者均可提高雏鸡胸腺指数及法氏囊指数，且MLP-Ⅱ效果更好。香菇子实体多糖可提高鸡免疫器官指数，其中法氏囊指数及胸腺指数变化最明显[21]。本试验中，饲粮添加香菇菌丝体多糖可提高免疫器官指数，以法氏囊指数最为明显，间接说明香菇菌丝体多糖对体液免疫影响较大。因此，通过液体发酵技术制备的香菇菌丝体多糖与香菇子实体多糖作用效果类似。3.3香菇菌丝体多糖对肉鸡血清细胞因子及免疫球蛋白含量的影响细胞因子是由免疫细胞分泌的一种小分子多肽或糖蛋白，具有调节细胞生长、促进分化增殖等功效。IgG是血清中的主要免疫球蛋白，也是免疫应答的主要抗体；IgM在血清中含量很少，是体液免疫应答最早产生的抗体，在急性感染期起关键作用[22-24]。细胞因子及免疫球蛋白在一定范围内的提高可以反映机体抗病能力提高、免疫功能增强。张英楠等[25]发现，连续3 d注射刺五加多糖可提高鸡血清IL-2、IL-4、IL-6 mRNA表达量。王思凝等[26]发现，饲粮添加不同浓度大枣多糖均可提高肉鸡IL-2、IL-4、IFN-γ mRNA表达量。孙洲等[27]发现，饲粮中添加0.5%、0.1%、0.2%茯苓多糖均可显著提高仔猪血清IgG、IgM、IgA含量。郭林霞等[28]发现，饲粮中添加枣多糖可显著提高免疫抑制蛋雏鸡IgA、IgG及SIgA含量，且IgA、IgG含量可达黄芪多糖组（600 mg/kg）水平。本试验发现，添加500 mg/kg香菇菌丝体多糖可显著提高血清IL-2、IL-4、IL-6、IgG、IgM含量，说明香菇菌丝体多糖可提高肉鸡免疫，且以体液免疫为主。3.4香菇菌丝体多糖对肉鸡抗氧化指标的影响机体自由基过多或清除自由基能力下降，过量的自由基会通过脂质过氧化作用对生物膜产生破坏作用，导致细胞凋亡，对生产性能产生负面影响[29]。多糖类物质可降低体内氧化自由基[30]，提高SOD、GSH-Px活性，提高机体抗氧化性能。刘佳等[31]发现，饲粮添加酵母多糖可降低血清MDA含量，提高SOD、GSH-Px活性，提高仔猪抗氧化性能。曾祥兵等[32]发现，鸡内金多糖可提高肠道SOD、GSH-Px、过氧化氢酶（CAT）活性及总抗氧化能力（T-AOC），降低MDA含量，提高尖吻鲈幼鱼肠道抗氧化性能。本试验发现，饲粮添加香菇菌丝体多糖可提高肉鸡血清SOD、GSH-Px活性，降低血清MDA含量，说明香菇菌丝体多糖可以增强肉鸡的抗氧化性能。4结论饲粮添加香菇菌丝体多糖可提高肉鸡的生长性能，增强免疫功能，提高抗氧化性能。香菇菌丝体多糖添加量以500 mg/kg为宜。