紫花苜蓿（Medicago sativa L.）属于多年生豆科牧草，具有营养价值高、适口性好和适应性强等特点[1-2]。紫花苜蓿富含叶蛋白、苜蓿皂苷、苜蓿黄酮类化合物、苜蓿多糖以及维生素等多种活性物质[3-4]。将品质优良的苜蓿草粉用于畜禽饲料中，能够为畜禽提供必需的营养素，促进畜禽生长发育，提高机体免疫力，调节脂质代谢，改善抗氧化功能，从而改善畜产品品质，提高畜禽养殖的经济效益[5-6]。本试验选择和田黑鸡为试验对象，在日粮中添加不同水平的苜蓿草粉，探究苜蓿草粉对和田黑鸡的生长性能、肉品质及抗氧化性能的影响，并筛选出苜蓿草粉的最适添加水平，为苜蓿草粉在和田黑鸡生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料苜蓿草粉由新疆昆仑尼雅生态农牧发展有限公司提供。苜蓿草在初花期刈割，经过自然干燥、加工而成苜蓿草粉。苜蓿草粉中营养成分含量为：干物质89.78%、粗蛋白18.30%、粗纤维26.2%、粗脂肪2.8%、粗灰分7.81%、钙1.85%、磷0.44%。1.2试验设计选取体重相近400只7周龄和田黑鸡，随机分为5组，分别为基础日粮组（对照组）、2%苜蓿草粉组（试验Ⅰ组）、4%苜蓿草粉组（试验Ⅱ组）、6%苜蓿草粉组（试验Ⅲ组）和8%苜蓿草粉组（试验Ⅳ组），每组5个重复，每个重复16只，公、母各半。试验期77 d，预试期7 d，正式试验期70 d。全程自由采食和饮水，按常规免疫进行免疫。试验日粮参考NRC（1994）肉鸡饲养标准并结合三黄鸡日粮配方配制。试验日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.23.007.T001表1试验日粮组成及营养水平（风干基础）项目7~14周龄15~18周龄对照组试验Ⅰ组试验Ⅱ组试验Ⅲ组试验Ⅳ组对照组试验Ⅰ组试验Ⅱ组试验Ⅲ组试验Ⅳ组原料组成/%玉米57.8758.0057.8055.3956.0065.9966.1265.9063.4964.10麦麸9.116.965.105.012.466.664.512.652.560.01豆油0.150.340.601.481.542.482.672.953.823.89浓缩饲料32.8732.7032.5032.1232.0024.8724.7024.5024.1324.00苜蓿草粉02.004.006.008.0002.004.006.008.00合计100.00100.00100.00100.00100.00100.00100.00100.00100.00100.00营养水平代谢能/(MJ/kg)12.6512.6512.6512.6512.6513.5113.5113.5113.5113.51粗蛋白/%19.4319.4319.4319.4319.4316.5816.5816.5816.5816.58粗纤维/%3.653.974.304.755.053.183.503.844.294.58粗脂肪/%3.033.243.804.304.345.445.615.866.676.72钙/%0.750.780.810.830.860.570.600.630.660.69总磷/%0.550.530.520.510.250.470.460.440.440.42有效磷/%0.250.280.270.260.490.240.230.220.220.21赖氨酸/%0.950.970.980.991.000.780.790.810.820.83蛋氨酸/%0.350.360.370.380.380.290.300.310.320.33蛋氨酸+半胱氨酸/%0.680.690.700.710.720.590.590.600.610.62注：1.浓缩饲料购自新疆天山预混合饲料厂。2.营养水平均为计算值。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能预试验7 d后，禁食12 h，空腹称重，为初重。正式试验期间，每周进行1次称重，记录每个重复的剩余料量，记录每天饲料的投放量。计算平均日增重（ADG）、平均采食量（ADFI）以及料重比（F/G）。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=(投料量-剩料量)/试验天数(2)料重比＝平均日采食量/平均日增重(3)1.3.2屠宰性能饲养试验结束时，每个重复随机选取2只鸡（公、母各半）进行屠宰性能测定。计算屠宰率、半净膛率、全净膛率、胸肌率、腿肌率和腹脂率。屠宰率=屠体重/活重×100%(4)半净膛率=半净膛重/活重×100%(5)全净膛率=全净膛重/活重×100%(6)胸肌率=两侧胸肌重/全净膛重×100%(7)腿肌率=两侧腿肌重/全净膛重×100%(8)腹脂率=腹脂重/(全净膛重+腹脂重)×100%(9)1.3.3肉品质肉鸡屠宰后，取胸肌和腿肌测定45 min和24 h的肉色（OPTO-STAR，德国Matthaus）和pH值（pH-STAR，德国Matthaus）；测定胸肌和腿肌的剪切力（C-LM3，东北农业大学研制的机械式肌肉嫩度仪）、滴水损失率和蒸煮损失率。1.3.4抗氧化性能试验结束后，禁食12 h，每个重复随机选取2只鸡，颈静脉采血，3 500 r/min离心10 min，取血清，-20 ℃保存。测定血清中总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和丙二醛（MDA）。试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。1.4数据统计与分析试验数据经Excel初步整理后，采用SPSS 23.0软件进行单因素方差分析（One-way ANOVA），采用Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著，P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1苜蓿草粉对和田黑鸡生长性能的影响（见表2）由表2可知，试验Ⅱ组和田黑鸡的末重显著高于对照组和试验Ⅰ组（P0.05），极显著高于试验Ⅲ组、Ⅳ组（P0.01）；试验Ⅰ组和田黑鸡的末重显著高于试验Ⅳ组（P0.05）。与对照组相比，试验Ⅱ组和田黑鸡的平均日增重显著提高（P0.05）；试验Ⅰ组和田黑鸡的平均日增重显著高于试验Ⅳ组（P0.05）；试验Ⅱ组和田黑鸡的平均日增重极显著高于试验Ⅲ组、Ⅳ组（P0.01）。试验Ⅲ组、Ⅳ组和田黑鸡的平均日采食量极显著高于对照组（P0.01），显著高于试验Ⅰ组（P0.05）。试验Ⅲ组和田黑鸡的料重比显著高于对照组和试验Ⅰ组（P0.05），试验Ⅳ组和田黑鸡的料重比极显著高于对照组和试验Ⅰ组（P0.01），试验Ⅱ组和田黑鸡的料重比极显著低于试验Ⅲ组、Ⅳ组（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.23.007.T002表2苜蓿草粉对和田黑鸡生长性能的影响组别初重/g末重/g平均日增重/(g/d)平均日采食量/(g/d)料重比对照组633.63±22.732 081.14±41.40ABbc20.69±0.40ABbc72.66±0.89Bb3.51±0.03BCb试验Ⅰ组639.75±14.342 099.94±29.74ABb20.86±0.27ABab73.10±1.44ABb3.50±0.09BCb试验Ⅱ组646.00±8.882 153.51±29.18Aa21.54±0.47Aa73.77±0.45ABab3.43±0.09Cb试验Ⅲ组631.50±14.112 048.08±32.63Bbc20.24±0.56Bbc74.50±0.97Aa3.68±0.08ABa试验Ⅳ组631.50±13.012 034.12±58.23Bc20.04±0.80Bc74.63±0.52Aa3.73±0.17Aa注：同列数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著（P0.05），不同小写字母表示差异显著（P0.05），不同大写字母表示差异极显著（P0.01）；表3、表5与此同。2.2苜蓿草粉对和田黑鸡屠宰性能的影响（见表3）由表3可知，试验Ⅱ组和田黑鸡的屠宰率显著高于试验Ⅲ组、Ⅳ组和对照组（P0.05）。试验Ⅱ组的胸肌率极显著高于对照组和试验Ⅲ组、Ⅳ组（P0.01），且显著高于试验Ⅰ组（P0.05）。与对照组相比，试验Ⅲ组的腹脂率显著降低（P0.05）；试验Ⅳ组的腹脂率极显著降低（P0.01），且显著低于试验Ⅰ组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.23.007.T003表3苜蓿草粉对和田黑鸡屠宰性能的影响组别屠宰率半净膛率全净膛率腿肌率胸肌率腹脂率对照组88.24±0.62b79.39±0.7965.59±1.0524.36±1.2716.54±0.50Bb4.27±1.08Aa试验Ⅰ组89.35±1.23ab79.73±2.1065.86±2.0224.36±1.3616.94±0.35ABb3.89±0.82ABab试验Ⅱ组89.82±0.77a79.39±1.1966.89±1.8524.45±0.7817.70±0.53Aa3.64±0.41ABabc试验Ⅲ组88.30±1.29b79.45±0.6365.50±0.1024.39±0.8116.65±0.43Bb3.21±0.25ABbc试验Ⅳ组88.31±1.23b79.32±1.6765.44±1.3624.37±1.2316.60±0.79Bb2.79±0.57Bc%2.3苜蓿草粉对和田黑鸡肉品质的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，各试验组胸肌和腿肌的肉色24 h、pH45 min值和pH24 h值均呈上升趋势，滴水损失率和蒸煮损失率均呈下降趋势（P0.05）。与对照组相比，试验Ⅳ组的胸肌、腿肌肉色45 min显著提高（P0.05），试验Ⅳ组的腿肌剪切力显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.23.007.T004表4苜蓿草粉对和田黑鸡肌肉品质的影响项目胴体部位对照组试验Ⅰ组试验Ⅱ组试验Ⅲ组试验Ⅳ组肉色45 min胸肌46.79±0.91b47.02±0.32ab47.88±1.28ab48.34±3.59ab49.18±0.60a腿肌68.35±1.97b68.77±1.23ab69.12±1.33ab69.31±1.11ab70.29±0.49a肉色24 h胸肌44.13±0.8445.33±0.8945.71±2.6845.94±2.5545.80±1.91腿肌64.78±0.6165.35±2.4665.84±1.3565.86±0.4465.99±1.99pH45 min值胸肌5.59±0.035.60±0.035.60±0.085.61±0.075.63±0.04腿肌5.91±0.085.92±0.085.94±0.065.93±0.105.96±0.06pH24 h值胸肌5.29±0.065.30±0.025.32±0.035.33±0.035.32±0.03腿肌5.71±0.045.71±0.065.73±0.045.74±0.045.74±0.04剪切力/N胸肌36.95±8.2235.95±6.6236.04±4.1335.67±11.4734.01±4.47腿肌34.54±1.82a33.54±6.82ab31.83±9.59ab30.48±1.85ab27.19±0.91b滴水损失/%胸肌8.50±2.618.51±1.387.80±1.617.17±0.977.31±0.82腿肌6.60±1.436.47±0.986.37±1.466.01±2.126.32±2.37蒸煮损失/%胸肌23.95±1.4423.51±1.6123.42±2.6722.66±1.2922.16±1.09腿肌30.81±0.6430.79±1.0730.81±2.1230.60±2.8430.17±2.11注：同行数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著（P0.05），不同小写字母表示差异显著（P0.05）。2.4苜蓿草粉对和田黑鸡抗氧化能力的影响（见表5）由表5可知，与对照组相比，试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组和田黑鸡血清T-AOC分别提高0.1%、1.3%、4.4%、13.1%（P0.05）。试验Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组和田黑鸡血清SOD活性极显著高于对照组和试验Ⅰ组（P0.01）。与对照组相比，试验Ⅲ组、Ⅳ组和田黑鸡血清GSH-Px活性极显著提高（P0.01），试验Ⅱ组和田黑鸡血清GSH-Px活性显著提高（P0.05）；且试验Ⅳ组和田黑鸡血清GSH-Px活性显著高于试验Ⅰ组（P0.05）。试验Ⅲ组、Ⅳ组和田黑鸡血清MDA含量显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.23.007.T005表5苜蓿草粉对和田黑鸡抗氧化能力的影响组别SOD/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)MDA/(μmol/L)T-AOC/(U/mL)对照组249.46±5.22Bb1 730.09±116.98Bc5.93±2.00a7.69±2.53试验Ⅰ组256.11±3.63Bb1 854.18±143.44ABbc5.55±1.48ab7.70±1.42试验Ⅱ组282.50±6.82Aa1 920.93±212.58ABab4.99±1.27ab7.79±0.77试验Ⅲ组287.62±14.21Aa2 008.88±53.54Aab4.01±1.23b8.03±0.42试验Ⅳ组291.09±15.35Aa2 061.34±85.64Aa3.96±0.87b8.70±1.663讨论3.1苜蓿草粉对和田黑鸡生长性能的影响苜蓿草含有丰富的蛋白质、矿物质、维生素和多糖，是畜牧业发展中不可或缺的粗纤维和蛋白原料[7]。日粮中适量的粗纤维可以为动物机体提供所需要的能量和维持消化吸收功能[8-9]。徐珊珊[10]研究发现，饲喂适量苜蓿草粉可以提高科宝肉鸡的生长性能。本试验中，试验Ⅰ组、Ⅱ组和田黑鸡平均日增重较对照组分别提高0.8%和4.1%；试验Ⅰ组、Ⅱ组料重比分别下降0.3%和2.3%，与李璐等[11]研究结果相似。原因可能是苜蓿草粉中的多种活性物质促进了肉鸡消化道内消化酶的合成与分泌，促进机体对营养物质的消化与吸收，进而提高肉鸡的生长性能。3.2苜蓿草粉对和田黑鸡屠宰性能的影响屠宰率和全净膛率是衡量鸡屠宰性能的主要指标。屠宰率超过80%，全净膛率超过60%，认为产肉性能良好[12-14]。本试验中，屠宰率、全净膛率均超过80%和60%，试验组和田黑鸡的屠宰率均高于对照组；腹脂率随苜蓿草粉添加水平的提高而降低，试验Ⅳ组的腹脂率极显著低于对照组和显著低于试验Ⅰ组，试验Ⅲ组的腹脂率显著低于对照组，与王凯[15]和Zheng等[16]的研究结果相似。李璐等[11]研究发现，添加2%、4%苜蓿草粉可以显著降低肉鸭的腹脂率，添加8%苜蓿草粉能够降低腹脂率（P0.05），与本试验的结论不一致。原因可能是和田黑鸡耐粗饲较强，苜蓿活性成分中苜蓿皂苷能够调节和田黑鸡机体的脂肪代谢水平，抑制了和田黑鸡对不饱和脂肪酸的吸收，降低脂肪的沉积率和腹脂率，具体原因及机制有待进一步研究。3.3苜蓿草粉对和田黑鸡肉品质的影响pH值是肌肉酸度的直观表现，与肌肉的嫩度、滴水损失率等肉质指标直接相关。pH值越高，肌肉滴水损失率越低，肌肉嫩度越低，剪切力越低[17]。pH值由肉鸡屠宰后糖酵解产生乳酸的量决定。肉鸡屠宰后，肌肉会进行糖酵解。随着时间的延长，肌肉中的乳酸含量高，pH值下降。本试验中，胸肌、腿肌的pH45 min值均高于pH24 h值，但腿肌pH值的下降速度比胸肌慢，可能是因为腿肌中的糖原比胸肌少，糖酵解后乳酸含量也少[18]。刘大林等[19]研究发现，日粮添加苜蓿皂苷可以在一定程度上改善京海黄鸡肌肉的肉色，降低失水率和剪切力，提高肌肉pH值。有研究发现，肉鸡日粮中添加40 g/kg苜蓿草粉可以降低滴水损失率，改善肌肉品质[20]。研究表明，在饲粮中添加苜蓿草粉能够在一定程度上改善和田黑鸡的肉品质。3.4苜蓿草粉对和田黑鸡抗氧化性能的影响动物机体有氧代谢产生的羟基自由基和超氧阴离子自由基等自由基可以被机体存在的抗氧化系统中和，使机体自由基处于动态平衡状态，但这种状态一旦失衡，机体有氧代谢产生的自由基会和细胞竞争细胞代谢所必需的还原氢，造成机体细胞代谢损失和组织氧化损伤[18,21]。GSH-Px能够分解机体的过氧化氢，SOD可以消除羟自由基和氧自由基，保护细胞膜结构和功能，减少脂质过氧化物的生成[22-24]。T-AOC是动物体内综合评价抗氧化能力的体现，MDA是脂质过氧化物的产物，降低MDA含量对动物健康生长起重要作用[25]。苜蓿中含有皂苷、黄酮和多糖等活性物质[3-4]，这些活性物质能够增强动物机体的抗氧化能力。杨耀翔等[18]研究表明，肉仔鸡日粮中加入1 000 mg/kg苜蓿多糖可以提高肉仔鸡体内GSH-Px、SOD活性。日粮中添加黄芩黄酮能够提高肉鸡肝组织中T-AOC、SOD和GSH-Px活性，降低肌肉组织和血清中MDA含量[26]。本试验中，随着苜蓿草粉水平的增加，抗氧化能力增强；试验Ⅱ组能够极显著提高和田黑鸡血清中SOD活性和显著提高GSH-Px活性，试验Ⅲ组、Ⅳ组能够极显著提高和田黑鸡血清SOD和GSH-Px活性，显著降低和田黑鸡血清MDA含量；随着苜蓿草粉添加水平的增加，血清中T-AOC能力越强，与丘富安等[27]的研究结果相同。4结论日粮中添加一定量的苜蓿草粉可以提高和田黑鸡的生长性能、屠宰性能，改善肉品质，增强抗氧化能力。本试验条件下，添加4%苜蓿草粉对养殖效果更佳。