目前，滩羊以规模化、舍饲化养殖为主，滩羊的运动量下降，饲草种类单一，出现肉品质降低、胴体脂肪含量增加、个体免疫力下降等现象，影响了产业高质量发展[1]。随着人们对健康、低脂、绿色滩羊肉的需求日益增加，生产无污染、无残留、无公害的滩羊肉已经成为目前舍饲滩羊养殖的研究重点。中草药提取物是从植物源中提取的天然活性成分，具有抗氧化、抗炎杀菌、抗病毒、增强免疫力等功效，能够促进动物的生长发育，提高免疫性能，改善畜产品品质[2]。枸杞多糖是一种从茄目茄科属植物枸杞中提取的，具有促生长、调节免疫、改善抗氧化性以及抑菌活性等诸多生物学功能的活性成分[3]；黄芪多糖具有增强细胞代谢、抗应激、调节免疫、抗病毒和抗氧化等作用[4]；甘草次酸是中药甘草的有效成分之一，具有抗炎[5]、抗肿瘤及调节免疫功能[6]等多种生物学作用。本试验旨在研究宁夏滩羊日粮中分别添加枸杞多糖、黄芪多糖、甘草次酸3种免疫添加剂对滩羊生长性能、血清抗氧化及免疫因子的影响，为提升舍饲滩羊饲养水平和经济效益提供参考。1材料与方法1.1试验设计与试验饲粮采用单因素随机试验设计，选用80只体重(19±2) kg、健康的盐池滩羊公羔，随机分为4组，每组20个重复，每个重复1只羊，分别为对照组、黄芪多糖组（基础饲粮＋0.2 g/kg黄芪多糖）、枸杞多糖组（基础饲粮＋0.4 g /kg枸杞多糖）、甘草次酸组（基础饲粮＋0.4 g /kg甘草次酸）。试验所需黄芪多糖购自成都欧恩瑞思化学试剂有限公司（批号：RS20200411）；枸杞多糖购自沃福百瑞枸杞产业股份有限公司（批号：20201123）；甘草次酸购自甘肃泛植制药有限公司（批号：20011201）。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.02.003.T001表1基础饲粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米秸秆30.00消化能/(MJ/kg)11.42柠条5.00粗蛋白质/%13.67苜蓿干草15.00粗纤维/%13.80玉米30.50粗脂肪/%6.45豆粕7.00钙/%0.47预混料1.00总磷/%0.34棉籽粕5.20菜籽粕3.00小麦麸2.50石粉0.50食盐0.30注：1.每千克预混料为饲粮提供：VA 500 000 IU、VD 500 000 IU、VE 500 IU、五水硫酸铜46.8 mg、碘酸钙2.88 mg、一水硫酸亚铁257.22 mg、一水硫酸锰130.5 mg、六水氯化钴1.44 mg、一水硫酸锌135.54 mg、酵母硒（99%）71.84 mg。2.营养水平中消化能为计算值，其余均为实测值。1.2饲养管理试验羊分栏饲养，栏内单设饲槽和水槽，每日7：00、17：00各饲喂1次，自由饮水。按养殖场的常规程序进行免疫和消毒，保持圈舍自然通风。预试期10 d，正式试验期60 d。1.3样品采集与制备分别于试验第1 d和第60 d，空腹逐只称量试验羊体重。试验期内，每天准确称取给料量，回收记录剩余料量。试验结束后，每组选择10只体重相近的滩羊，颈静脉采集5 mL血液样本。静置1 h，3 000 r/min、4 ℃离心10 min制备血清，装于2 mL冻存管，用于后续血清抗氧化指标、免疫指标等测定。1.4仪器设备AMR-100酶标仪（杭州奥盛仪器有限公司）、日立-7180日立全自动生化分析仪。1.5测定指标及方法1.5.1生长性能试验期间准确记录滩羊的初重（IBW）和末重（FBW）。平均日增重(ADG)=(末重-初重)/试验天数（1）平均日采食量(ADFI)=总耗料量/(试验天数×试验羊数量)（2）料重比=平均日采食量/平均日增重（3）1.5.2血清抗氧化、免疫指标绵羊血清免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、白细胞介素-（IL-2）、白细胞介素-10（IL-10）、白细胞介素-22（IL-22）、血清碱性磷酸酶（ALP）、丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPH-Px）活性的测定，均采用江苏晶美生物科技有限公司酶联免疫分析（ELISA）检测试剂盒。1.6数据统计与分析采用SPSS 25.0软件对所得数据进行正态分布检验，符合正态分布后进行单因素方差分析（One-way ANOVA），若有显著差异则采用LSD法对组间差异进行多重比较。结果以平均值和标准误表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.13种免疫添加剂对滩羊生长性能的影响（见表2）由表2可知，各组之间滩羊初始体重无显著差异（P0.05）。各组之间滩羊末重、平均日增重均无显著差异（P0.05）。甘草次酸组滩羊平均日增重最高，为146.5 g，料重比最低，为9.910。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.02.003.T002表23种免疫添加剂对滩羊生长性能的影响项目初重/kg末重/kg平均日增重/[g/(头·d)]平均日采食量/[g/(头·d)]料重比黄芪多糖组19.5627.73136.11 440.5210.580枸杞多糖组19.8227.05141.31 442.3311.970甘草次酸组19.5428.33146.51 452.089.910对照组19.7327.88135.71 448.1410.660SEM0.1230.4260.0085.6370.568P值0.8350.7730.9720.2590.812注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05），不同大写字母表示差异极显著（P0.01），相同或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.23种免疫添加剂对滩羊血清抗氧化指标的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，黄芪多糖组滩羊血清中MDA含量显著降低（P0.05），枸杞多糖组滩羊血清MDA含量极显著升高（P0.01），且为各组中最高；与对照组相比，黄芪多糖组、枸杞多糖组滩羊血清SOD活性极显著降低（P0.01），对照组为各组中最高；与对照组相比，各组间滩羊血清中GSH-Px活性差异不显著（P0.05），枸杞多糖组滩羊血清中GSH-Px活性为各组中最高。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.02.003.T003表33种免疫添加剂对滩羊血清抗氧化指标的影响项目MDA/(μmol/L)SOD/(μg/L)GSH-Px/(ng/L)黄芪多糖组8.44Bb18.61B2 426.66枸杞多糖组20.73A20.73C2 538.88甘草次酸组9.27B23.45A2 007.22对照组10.72Ba24.82A2 345.55SEM0.8630.465147.479P值0.0010.0010.6302.33种免疫添加剂对滩羊血清免疫指标和免疫因子的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，黄芪多糖组、枸杞多糖组、甘草次酸组滩羊血清IgA、IL-2均极显著低于对照组（P0.01）；各组间滩羊血清IgG、IgM含量差异不显著（P0.05），但对照组含量最高。与对照组相比，黄芪多糖组滩羊血清IL-6含量极显著降低（P0.01），显著低于枸杞多糖组（P0.05）；与对照组相比，黄芪多糖组、枸杞多糖组滩羊血清IL-8含量极显著降低（P0.01）；与对照组相比，黄芪多糖组、枸杞多糖组滩羊血清IL-10含量极显著降低（P0.01），甘草次酸组含量显著降低（P0.05）；与对照组相比，黄芪多糖组滩羊血清中IL-22含量显著降低（P0.05）；黄芪多糖组滩羊血清AST活性显著高于枸杞多糖组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.02.003.T004表43种免疫添加剂对滩羊血液免疫指标和免疫因子的影响项目IgA/(mg/L)IgG/(g/L)IgM/(mg/L)IL-2/(ng/L)IL-6/(ng/L)IL-8/(ng/L)IL-10/(ng/L)IL-22/(ng/L)AST/(U/L)ALP/(U/L)黄芪多糖组317.30B79.942 2621 128.33B147.42Bb652.59B151.85B765.90b129.98a284.90枸杞多糖组320.07B79.532 3081 124.04B161.45a690.74B160.66B792.27ab109.53b340.20甘草次酸组303.46B82.152 5431 131.19B160.14ab850.37A173.96ABb781.13ab121.16ab377.10对照组382.30A83.652 7391 290.71A170.29A877.22A246.52Aa843.18a114.63ab347.10SEM8.9861.0683.3621.5542.60717.86711.01112.2433.02319.739P值0.0050.4920.1780.0080.014＜0.0010.0050.1290.0880.4293讨论3.13种免疫添加剂对滩羊生长性能的影响日粮中添加植物免疫添加剂有利于动物机体对营养物质的消化吸收，改善生长性能，可作为生长促进剂促进动物的生长发育。本研究表明，甘草次酸组滩羊的ADG最高，料重比最低。甘草次酸为自甘草提取的有效活性物质[7]，可提高动物的采食量和动物机体免疫功能，增强抗病能力，已经成为目前研究的热点[8-10]。但关于反刍动物日粮添加甘草次酸对其生长性能研究报道较少。在单胃动物中，何子双等[11]研究发现，在代乳粉中添加甘草次酸饲喂7日龄仔猪，可促进仔猪生长。罗宗刚等[12]研究表明，甘草渣能够提高育肥猪的生长性能。车丽涛等[13]研究发现，饲粮中添加甘草次酸能够显著提高青年母猪粗脂肪、粗纤维等养分的表观消化率。本研究中，甘草次酸组滩羊ADG、ADFI均优于其他组别，但并未出现显著性差异，可能是由于本次试验甘草次酸添加量仅为0.4 g/kg，添加量较低。3.23种免疫添加剂组对滩羊血清抗氧化指标的影响滩羊在生长过程中由于断奶、疾病、免疫注射、运输等刺激均会造成动物机体氧化应激反应。氧化应激可造成滩羊机体组织器官损伤，使机体内MDA含量升高。MDA攻击细胞膜，导致细胞膜变性，同时释放大量自由基，造成膜通透性增加，从而使滩羊发生腹泻等疾病，导致动物生产性能下降、死亡。随着动物体内MDA含量的变化，SOD、GSH-Px活性可反映机体清除自由基的能力。植物免疫添加剂通过清除超氧阴离子自由基提高抗氧化酶的活性，从而提高机体的抗氧化水平，抑制肌肉的脂肪氧化，降低细胞膜的损伤[14]。本研究表明，枸杞多糖组滩羊血清MDA含量显著高于其他组，而此时枸杞多糖组的SOD活性显著低于甘草次酸组。因此，日粮中添加0.4 g/kg甘草次酸可显著提升滩羊血液中SOD活性。与蔡东森[15]研究“饲料中添加甘草次酸可显著提高团头鲂的抗氧化能力”和尤婷[16]研究“甘草酸可提高仔猪血清中的T-SOD活性，降低MDA含量，增强断奶仔猪的抗氧化能力”的结果相一致。申义君等[17]研究表明，在泌乳奶牛日粮添加不同浓度的黄芪多糖，泌乳奶牛血清T-AOC及SOD、GSH-Px活性均得到提高，MDA含量降低，提高机体抗氧化能力。本研究在滩羊日粮中添加0.2 g/kg黄芪多糖，提高了滩羊血清中GSH-Px活性，降低了MDA的含量。3.33种免疫添加剂对滩羊血清免疫指标的影响免疫指标是反映动物机体健康状况的重要指标。免疫球蛋白具有抗菌、抗病毒等作用，主要包括IgG、IgA和IgM[18]。白细胞介素在传递信息，激活与调节免疫细胞，介导T、B淋巴细胞活化、增殖与分化以及在炎症反应中起重要作用。本试验结果表明，3种免疫添加剂对滩羊血清中IgA、IgG、IgM含量具有不同程度的影响[19]。枸杞多糖组IgA含量高于其他两组，甘草次酸组滩羊血清IgG、IgM含量高于其他两组，但均低于对照组，可见3种中草药添加剂均可降低滩羊应激反应，降低动物机体因应激造成损伤导致机体免疫球蛋白表达量增加。3组试验组滩羊血清中IL-2、IL-10、IL-22含量之间差异不显著，甘草次酸组滩羊血清IL-2、IL-10含量均处于较高的水平。Matsui等[20]研究发现，甘草次酸可增强Th1细胞因子IL-2、IL-12的表达，调整Th2细胞因子表达使抗炎因子IL-10表达增加，从而增强滩羊的抗炎能力。本试验结果表明，3种免疫添加剂均可降低试验滩羊血清中促炎因子IL-2、IL-6、IL-8含量，降低动物机体炎性反应；同时间接导致动物机体抗炎因子的降低，减缓动物机体因氧化应激而造成的炎性损伤。日粮中未添加中草药提取物的对照组中，滩羊血清中炎性因子含量均高于试验组，氧化应激可以造成动物机体内炎症反应，引起动物机体各种免疫球蛋白含量增加，动物机体氧化应激造成各种炎性反应，使氧化应激羊生产性能下降。可见日粮中添加黄芪多糖、枸杞多糖和甘草次酸可间接提升滩羊生长性能和机体的免疫力。4结论本试验条件下，滩羊育肥期日粮中添加0.2 g/kg黄芪多糖提高了滩羊血清中抗炎因子含量，日粮中添加0.4 g/kg枸杞多糖可提高滩羊血清抗氧化性能和血清中抗炎因子含量，日粮中添加0.4 g/kg甘草次酸可改善滩羊生长性能，增加血清中抗炎因子含量。