养殖场和饲料厂通过在饲料或饲料原料中添加乳酸菌、酵母菌等益生菌进行发酵或预处理，使原料中的大分子物质降解，变为易吸收的小分子物质，发酵能够改善饲料适口性，促进营养消化吸收[1]。发酵饲料中的各种益生菌还能够增强动物机体免疫力，消除饲料中的抗营养因子，且枯草芽孢杆菌、粪肠球菌和丁酸梭菌等可在一定程度上调节动物的肠道菌群[2-5]。饲喂抗生素可以预防蛋鸡发病，但长期摄入抗生素，机体会对药物产生一定的耐药性，导致蛋鸡体内的药物残余越来越多，动物健康出现问题[6]，还会引起严重的食品安全问题。发酵饲料能够提高饲料利用率，为畜禽提供益生菌，改善动物健康，进而保证食品的安全性。目前，有关发酵饲料在蛋鸡生产中的应用报道较少，尤其在对蛋鸡输卵管功能方面的研究更少。本试验在基础饲粮中添加发酵饲料，研究其对蛋鸡生产性能、蛋品质、输卵管及卵巢的影响，为发酵饲料在蛋鸡生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验设计选取580日龄海兰褐蛋鸡960只，随机分为A组（对照组）、B组、C组和D组，每组8个重复，每个重复30只蛋鸡。对照组为基础饲粮，B组、C组、D组分别在基础饲粮中添加2.0%、2.5%、3.0%的发酵饲料。预试期1 w，正式试验期6 w。基础饲粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.02.007.T001表1基础饲粮组成及营养水平（风干基础）原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米62.30代谢能/(MJ/kg)11.29豆粕24.00粗蛋白质/%16.31豆油0.70钙/%3.40石粉8.00总磷/%0.55预混料5.00蛋氨酸/%0.48赖氨酸/%1.02蛋氨酸+半胱氨酸/%0.70注：1.每千克预混料为饲粮提供：VA≥195 000 IU、VD3≥75 000 IU、VE≥500 IU、VK3≥60 mg、VB1≥44 mg、VB2≥135 mg、VB6≥75 mg、VB12≥0.44 mg、烟酰胺≥880 mg、泛酸≥330 mg、叶酸≥30 mg、D-生物素≥6.6 mg、锌≥1 700 mg、铁≥1 600 mg、锰≥2 400 mg、铜≥250 mg、碘≥22 mg、硒≥6.0 mg、氯化钠3%~15%、钙≥2.5%、总磷≥2.5%、氯化胆碱≥6 500 mg。2.营养水平均为计算值。1.2发酵饲料的制备采用粪肠球菌、乳酸菌和枯草菌处理发酵饲料，以米糠和统糠为主要原料，发酵条件为：pH值4.2、发酵温度37 ℃、发酵时间48 h。1.3饲养管理所有试验蛋鸡均在同一鸡舍，鸡舍统一为3层全阶梯式鸡笼，试验鸡群均在走道两侧的第2层笼内饲养，每笼3只蛋鸡，光照时长为16 h/d。试验鸡群每天饲喂2次（7：00、18：00），自由采食、饮水。每周统计各重复采食量，每日14：30捡蛋1次，按照重复进行计数，计算周产蛋数。试验第6 w末，每个重复随机取1只蛋鸡称重，屠宰，测定卵泡分级和输卵管壁厚；每个重复取4枚蛋，测定蛋品质指标。1.4测定指标及方法1.4.1生产性能试验期间以重复为单位，记录产蛋个数和产蛋重量，每周统计采食量，统计死亡鸡数目，计算日产蛋率、平均蛋重、料蛋比和死淘率。日产蛋率=日产蛋数/试验鸡存栏数×100%(1)平均蛋重=总蛋重/总产蛋数(2)料蛋比=试验期间总采食量/试验期产蛋总重(3)死淘率=试验期间死亡鸡数/试验鸡总数×100%(4)1.4.2蛋品质蛋壳厚度：采用螺旋测微器测定蛋壳大、中、小头的厚度，计算平均值。蛋壳强度：采用盛泰蛋壳强度仪（ST120H）测定。蛋品质：采用多功能蛋品质分析仪，测定蛋重、蛋白高度、哈夫单位、蛋黄颜色评分以及鸡蛋的评级数据。1.4.3生殖系统卵泡分级：将卵巢取出，按照卵泡直径分级计数。输卵管壁厚：石蜡固定制作切片，在低倍显微镜下进行测定。1.5数据统计与分析数据采用Excel 2019软件进行整理，采用SPSS 13.0软件进行单因素方差分析。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1发酵饲料对蛋鸡生产性能的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，各添加发酵饲料的试验组中仅C组蛋鸡日产蛋率显著升高（P0.05），其他两组差异不显著（P0.05）。各组的平均蛋重、料蛋比、死淘率差异均不显著（P0.05）。结果表明，饲粮中添加发酵饲料可以提高蛋鸡产蛋率。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.02.007.T002表2发酵饲料对蛋鸡生产性能的影响组别日产蛋率/%平均蛋重/g料蛋比死淘率/%A组（对照组）70.20±5.43b57.27±0.752.05±0.172.08±3.05B组71.61±1.76b57.89±0.421.96±0.161.67±3.09C组73.32±2.82a57.99±1.252.01±0.191.67±1.78D组71.59±2.16b57.74±0.912.01±0.212.06±2.48注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05），表4、表5与此同。2.2发酵饲料对蛋鸡蛋品质的影响（见表3）由表3可知，各试验组蛋壳重均显著高于对照组（P0.05）；C组蛋黄颜色显著优于其他3组（P0.05）；各组间蛋壳厚度、蛋壳强度、蛋白高度、蛋黄重、蛋重和哈夫单位虽然存在一定差异，但均未达到差异显著水平（P0.05）。结果表明，饲粮添加发酵饲料可促进蛋壳形成，改善蛋壳质量，加深蛋黄颜色。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.02.007.T003表3发酵饲料对蛋鸡蛋品质的影响项目A组（对照组）B组C组D组蛋壳厚度/μm332.40±24.50338.30±19.70339.80±28.70336.90±24.40蛋壳强度/Pa3.95±0.884.17±0.864.05±0.854.07±0.90蛋壳重/g8.89±0.91b9.60±0.71a9.33±0.80a9.31±0.89a蛋重/g57.27±0.7557.89±0.4257.99±1.2557.74±0.91蛋白高度/mm7.55±1.517.72±1.387.37±1.877.65±2.18蛋黄重/g17.64±1.4818.10±1.6917.91±2.1217.80±1.40蛋黄颜色9.93±025b10.13±0.30b10.75±0.39a10.23±0.20b哈夫单位83.13±8.9485.57±7.4783.97±12.3084.40±11.73注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）。2.3发酵饲料对蛋鸡输卵管壁厚的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，各试验组输卵管壁厚有所增加，但差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.02.007.T004表4发酵饲料对蛋鸡输卵管壁厚的影响组别输卵管壁厚A组（对照组）200.67±17.24B组208.04±26.35C组210.60±29.21D组205.37±20.27μm2.4发酵饲料对蛋鸡卵泡分级的影响（见表5）由表5可知，与对照组相比，各试验组在2~6 mm、8~12 mm、12 mm以上卵泡数差异均不显著（P0.05）；各试验组6~8 mm卵泡数目均显著高于对照组（P0.05），其中C组的数量最多，说明发酵饲料可以促进蛋鸡卵泡生长发育。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.02.007.T005表5发酵饲料对蛋鸡卵泡分级的影响组别2~6 mm6~8 mm8~12 mm12 mmA组（对照组）23.67±4.420.33±0.75b1.00±0.005.33±0.47B组22.50±5.792.63±1.41a1.00±0.005.13±0.33C组21.29±6.184.57±1.50a1.00±0.005.14±0.83D组25.75±5.723.25±1.92a1.00±0.005.75±0.663讨论3.1发酵饲料对蛋鸡生产性能的影响发酵饲料中含有大量益生菌和有利于蛋鸡生产的营养物质，其中乳酸菌和酵母菌是起主要作用的菌种。乳酸菌和酵母菌能够提高蛋鸡对营养物质的吸收率，降低蛋鸡肠道有害微生物的数量，改善蛋鸡料蛋比[7]。陈国营等[8-9]使用不同比例发酵菜粕替代豆粕，结果发现，当发酵菜粕添加量为4%~8%时，试验组的蛋壳厚度、蛋黄颜色和蛋壳重量均显著高于对照组，表明一定比例的发酵菜粕替代豆粕能够明显改善蛋鸡生产性能。王少琨等[10]研究发现，采用2%发酵酒糟部分替换蛋鸡基础饲粮，可有效提高蛋鸡的产蛋数量及经济效益。吴俊峰等[11]采用添加0.05%谷草芽孢杆菌粉或2.5%枯草芽孢杆菌发酵豆粕的饲料饲喂海兰褐蛋鸡，结果发现，蛋鸡的产蛋率等指标显著提升。魏尊等[12]研究表明，在蛋鸡饲粮中添加棉粕源发酵饲料后可提高蛋鸡对营养物质的消化率，对蛋鸡生产性能和蛋形指数等指标无显著影响。朱风华等[13]试验结果表明，饲料中添加一定比例的乳酸菌发酵饲料可提高蛋鸡的产蛋率，使蛋鸡的蛋黄颜色、哈夫单位等指标得到改善，提升养殖户的经济收益。Liu等[14]研究表明，利用蝉蜕作为饲料添加剂可提升肉鸡机体免疫功能和抗氧化能力，改善肌肉肉质和肉鸡腿、胸肌的剪切力和滴水损失。饲粮中添加发酵松针浸膏显著提高了蛋鸡的产蛋量和采食量，发酵松针浸膏还能够提高蛋黄颜色、蛋壳颜色、破壳强度和蛋黄抗氧化能力等鸡蛋品质指标[15]。Zhou等[16]研究发现，在饲粮中添加解淀粉芽孢杆菌能够促进蛋鸡产蛋率提高，改善蛋品质，提升经济效益。本试验结果与上述试验结果基本一致，表明发酵饲料能够改善蛋鸡生产性能，且以在饲粮中添加2.5%发酵饲料提升产蛋率效果较好。3.2发酵饲料对蛋鸡蛋品质的影响蛋壳颜色是直观反映蛋壳品质的指标。研究表明，钙、磷和锰等微量元素是影响蛋壳颜色的重要因素[17]；维生素B6、维生素K和维生素A等是影响蛋壳颜色的关键维生素[18]。蛋壳厚度、强度受多方面的影响[19]。哈夫单位是衡量蛋品质的重要指标[20]。哈夫单位越小，说明鸡蛋品质较差，反之，则说明鸡蛋品质较好。鸡蛋的哈夫单位一般随蛋储藏时间的延长而降低[21]。蛋黄颜色也是评价鸡蛋新鲜度的重要指标。蛋黄颜色越深，说明该鸡蛋品质越好。研究表明，乳酸菌、枯草芽孢杆菌等益生菌均可显著改善蛋品质[22-24]。植物乳杆菌发酵黄芪作为一种有效的饲粮添加剂，可显著提高产蛋后期蛋鸡的生产性能、抗氧化能力和回肠微生物群多样性，饲粮中添加发酵黄芪可使蛋鸡肝脏、脾脏、回肠和盲肠中IFN-γ和TNF-α的表达水平升高，说明发酵黄芪对先天免疫系统具有特殊作用，其确切机制有待进一步研究[25]。本试验结果与上述试验结果基本一致，表明发酵饲料能够改善蛋品质，提高经济效益。3.3发酵饲料对蛋鸡输卵管壁厚的影响蛋鸡输卵管是蛋清和蛋壳形成的地方，其发育和功能直接影响蛋鸡的生产性能。输卵管是黄体生成素（LH）和促卵泡激素（FSH）的靶器官，能够维持较高的输卵管分泌，增加产蛋量，降低饲料转化效率，延长产蛋高峰时间。LH与蛋鸡的排卵直接相关，FSH可影响卵泡的生长成熟，与LH协同促进排卵。研究表明，饲粮中添加发酵饲料能够促进蛋鸡生长以及输卵管发育，改善输卵管壁厚度。Dong等[26]研究发现，饲料中添加发酵饲料能够使输卵管形态保持良好，血液中卵泡刺激素和黄体生成素分泌增加，提升生产性能。Saleh等[27]发现，饲料中添加发酵饲料能够提升蛋鸡输卵管重量，提升产蛋率。本试验结果与上述试验结果一致，表明发酵饲料能够改善输卵管壁厚度，提升生产性能，增加经济效益。3.4发酵饲料对蛋鸡卵泡分级的影响Ebeid等[28]、Reihaneh等[29]研究发现，饲粮中添加2.5%鱼油能够减缓卵泡衰老速度，促进卵泡发育。Long等[30]研究发现，饲料中添加发酵饲料能够促进6~10 mm卵泡数目增多。Mazanko等[31]研究发现，饲粮中添加益生菌可使卵泡数目明显增多，说明发酵饲料能够减缓蛋鸡生殖衰老速度。本试验结果与上述试验结果一致，表明发酵饲料能够优化卵泡分级、减缓卵泡衰老速度，减缓蛋鸡生殖衰老速度，提升生产性能，增加经济效益。4结论综上所述，饲料中添加2.5%的发酵饲料可在一定程度上改善海兰褐蛋鸡的生产性能、蛋品质，优化卵泡分级。